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指標名稱 | 關注問題 | 工藝開發(fā)中能回答的問題 |
通量(Flux) | 過濾速度快不快? | 過濾需要多長時間?是否滿足生產(chǎn)要求? |
通量衰減 （Flux Decline） | 會不會越過濾越慢? | 工藝是否穩(wěn)健、會不會堵? |
最大載量 （Vmax） | 最多能過濾多少? | 需要多少濾膜面積？濾器片數(shù)及成本如何？ |
圖1：可濾性測試的重要指標
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除病毒濾膜的選型
Cytiva提供一系列用于病毒去除產(chǎn)品，包括Pegasus Prime以及Pegasus SV4等病毒過濾膜，覆蓋了從常規(guī)單抗體系到高黏度、高復雜樣品的多類應用需求。
圖2：Cytiva除病毒濾膜產(chǎn)品
在實際工藝搭建中，濾膜的選擇會直接影響病毒過濾步驟的穩(wěn)健性與效率。而不同的樣品具有不同的顆粒負荷、聚集水平與黏度。因此在進入病毒過濾之前，必須同時完成兩件事：選好預過濾膜處理雜質(zhì)，選好納濾膜實現(xiàn)病毒截留。二者合在一起，決定了后續(xù)過濾是否順暢。
圖3：預過濾膜與除病毒濾膜選型
2
影響除病毒過濾的因素
預過濾膜
除病毒濾膜的孔徑非常小，用于病毒級別的截留，因此前端任何顆粒、聚集體、脂質(zhì)或不可溶雜質(zhì)都可能迅速堵膜。預過濾的作用，就是降低病毒過濾的堵塞壓力并提高通量。不同體系的預過濾策略有所不同。對于顆粒負荷較高較復雜的樣品，深層膜材通常更合適；如果體系中的蛋白對吸附較敏感，則可考慮低吸附性PVDF膜材。
圖4：常見預過濾膜材與特點
圖5：某單抗產(chǎn)品（12 mg/ml，PB buffer，pH6.2）采用不同預過濾膜搭配Prime過濾曲線
料液性質(zhì)
除病毒濾膜的表現(xiàn)高度依賴料液的性質(zhì)。常見影響因素包括蛋白濃度、聚集體含量、pH 與鹽濃度等。
圖6：影響料液性質(zhì)的因素與優(yōu)化建議
可濾性測試怎么做
在實際操作中，可按照下圖提供的步驟進行連接、預沖洗、進樣和記錄數(shù)據(jù)。如果你是第一次嘗試，配合示例視頻可以更快上手哦。
圖 7：可濾性測試步驟流程
更多內(nèi)容，歡迎前往Cytiva學堂觀看課程
???? DJL+SV4篇????
???? Protect+Prime篇 ????
實驗結(jié)果
實驗結(jié)束后，可以根據(jù)記錄數(shù)據(jù)繪制過濾曲線。下圖展示了兩個典型的實驗案例：
低濃度樣品（2 mg/mL）：Protect+Prime過濾載量高達 1550 L/m2，濾速 476 LMH，幾乎無衰減
高濃度樣品（46 mg/mL）：DJL+SV4載量為209.5 L/m2，平均濾速 33.1 LMH，濾速衰減41.2%
圖8：過濾曲線（上圖：低濃度樣品；下圖：高濃度樣品）
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