感染性疾病是指由各種生物性病原體（如細(xì)菌、病毒、真菌、寄生蟲(chóng)等）侵害或寄生人體所引發(fā)的疾病。這類(lèi)疾病具有傳染性和流行性，其發(fā)生和傳播與病原體的致病性、宿主的易感性以及環(huán)境因素密切相關(guān)。

近百年來(lái)全球五次大規(guī)模傳染病的流行均為呼吸道相關(guān)病毒，包括甲型流感病毒和新型冠狀病毒（SARS-CoV-2）。病毒感染呼吸道后可誘導(dǎo)固有和適應(yīng)性免疫應(yīng)答，觸發(fā)抗病毒免疫和級(jí)聯(lián)炎癥反應(yīng)。理想有效的免疫應(yīng)答可以中和病毒、抑制病毒入侵、及時(shí)清除病毒感染的靶細(xì)胞、維持炎癥與損傷修復(fù)之間適當(dāng)?shù)钠胶?，最終得以保證機(jī)體的穩(wěn)態(tài)。反之，重癥感染和過(guò)度的免疫應(yīng)答可誘導(dǎo)病理?yè)p傷，諸如細(xì)胞因子風(fēng)暴，靶器官炎癥失調(diào)等可引起多器官組織損傷和功能衰竭。

流式細(xì)胞術(shù)可用于分析免疫細(xì)胞的亞群分布、活化狀態(tài)和功能。通過(guò)檢測(cè)免疫細(xì)胞表面的標(biāo)志物，可以評(píng)估機(jī)體的免疫功能，為感染性疾病的治療提供指導(dǎo)。如在艾滋病診療中，CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)是艾滋病分期的核心指標(biāo)，流式細(xì)胞術(shù)可動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)CD4+T細(xì)胞水平，評(píng)估抗病毒治療效果及免疫重建情況。再進(jìn)一步的監(jiān)測(cè)中，流式細(xì)胞術(shù)可區(qū)分初始T細(xì)胞、記憶T細(xì)胞等亞群，揭示免疫恢復(fù)的微觀機(jī)制，為免疫功能重建不全患者的監(jiān)測(cè)提供依據(jù)。

TBNK細(xì)胞是外周血T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞亞群的簡(jiǎn)稱(chēng)，這些細(xì)胞是機(jī)體免疫功能的重要指標(biāo)之一，主要用于免疫系統(tǒng)疾病及免疫相關(guān)疾病診斷和治療的臨床監(jiān)測(cè)。自身免疫疾病發(fā)病、進(jìn)展以及治療過(guò)程中常伴隨著TBNK淋巴細(xì)胞數(shù)量、比例和功能上的變化。TBNK淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)能反映機(jī)體當(dāng)前的免疫狀態(tài)，輔助疾病診斷，同時(shí)對(duì)分析疾病的發(fā)病機(jī)制、B細(xì)胞清除療效評(píng)估、副作用及預(yù)后監(jiān)測(cè)提供參考依據(jù)。

T淋巴細(xì)胞起源于骨髓，然后轉(zhuǎn)移到胸腺中發(fā)育成熟，是機(jī)體免疫細(xì)胞中數(shù)目最多、功能最復(fù)雜的一類(lèi)細(xì)胞。

流式細(xì)胞分析儀FCM根據(jù)淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志的不同來(lái)檢測(cè)T淋巴細(xì)胞亞群：初始T細(xì)胞（CD45RA+CD27+）、中央記憶T細(xì)胞（CD45RA-CD27+）、效應(yīng)記憶T細(xì)胞（CD45RA-CD27-）、終末分化效應(yīng)記憶T細(xì)胞（CD45RA+CD27-）、活化亞群（CD38+）、衰老耗竭亞群（PD1,CD57,CD28）等。通過(guò)T淋巴細(xì)胞亞群的監(jiān)測(cè)可以了解在不同疾病狀態(tài)下患者的細(xì)胞免疫功能狀態(tài)，已經(jīng)廣泛在腫瘤、自身免疫、感染性疾病中,輔助臨床診斷、幫助了解發(fā)病機(jī)理、判斷預(yù)后和指導(dǎo)臨床治療。若外周血中T細(xì)胞總數(shù)或不同T細(xì)胞亞群的絕對(duì)數(shù)和比值發(fā)生改變,可視為免疫異常。

CD64是可以識(shí)別免疫球蛋白的IgGFc片段I型受體（FcγR1），對(duì)IgG單體具有高親和力，介導(dǎo)體液免疫和細(xì)胞免疫，對(duì)感染性疾病具有早期診斷價(jià)值。正常情況下，中性粒細(xì)胞表面幾乎不表達(dá)CD64。當(dāng)機(jī)體患感染性疾病后4-6小時(shí)中性粒細(xì)胞表面CD64表達(dá)迅速升高，CD64表達(dá)可增強(qiáng)中性粒細(xì)胞功能，包括細(xì)胞吞噬功能。CD64可通過(guò)抗體依賴(lài)性細(xì)胞毒作用、細(xì)胞吞噬作用和免疫復(fù)合物清除作用實(shí)現(xiàn)對(duì)病原微生物的清除，可做為感染性疾病良好的診斷依據(jù)。

nCD64指數(shù)以1.19為臨界值，判斷是否為細(xì)菌感染；≤1.19，判斷為非細(xì)菌感染，＞1.19，判斷為細(xì)菌感染。與革蘭陽(yáng)性細(xì)菌相比，革蘭染色陰性細(xì)胞感染時(shí)中性粒細(xì)胞的CD64表達(dá)更高⁶。膿毒癥發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，存在一定的免疫抑制現(xiàn)象，免疫抑制現(xiàn)象與炎癥的嚴(yán)重程度有一定的相關(guān)性。

*由于方案、溶血素、儀器等不同都會(huì)造成熒光強(qiáng)度差異，因此不同實(shí)驗(yàn)室在建立此方案時(shí)建議重新驗(yàn)證參考范圍，以達(dá)到最精確的判讀效果。

單核細(xì)胞HLA-DR（mHLA-DR）的檢測(cè)可直接反映該類(lèi)細(xì)胞的抗原呈遞功能，mHLA-DR水平可反映感染性疾病尤其是急重癥患者機(jī)體免疫抑制的狀態(tài)，是天然免疫監(jiān)測(cè)的首要指標(biāo)；外周血單核細(xì)胞表面HLADR/CD14的表達(dá)率與感染及疾病的嚴(yán)重程度密切相關(guān)，可作為判斷急重癥疾病嚴(yán)重程度和預(yù)后的免疫指標(biāo)。

研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)表達(dá)<30%時(shí)，存活率降低，認(rèn)為<30%的表達(dá)是膿毒癥免疫抑制的標(biāo)準(zhǔn)。感染者早期單核細(xì)胞HLA-DR表達(dá)降低，并證明其與嚴(yán)重程度評(píng)分、繼發(fā)感染及死亡相關(guān)。

單核細(xì)胞根據(jù)CD16/CD14進(jìn)一步分為經(jīng)典單核細(xì)胞（CD14++CD16-，Mo1），主要發(fā)揮吞噬功能、中間單核細(xì)胞（CD14++CD16+，Mo2）其主要分泌細(xì)胞因子，激活淋巴細(xì)胞免疫功能、非經(jīng)典單核細(xì)胞（CD14+CD16++，Mo3），其抗原提呈功能增強(qiáng)。從經(jīng)典到中間型再到非經(jīng)典單核細(xì)胞存在一種發(fā)展關(guān)系，即在感染過(guò)程中或使用巨噬細(xì)胞集落刺激因子 (M-CSF) 治療時(shí)，首先是中間單核細(xì)胞增加，然后是非經(jīng)典CD14+CD16++單核細(xì)胞增加。

CD14++CD16+中間型和CD14+CD16++非經(jīng)典單核細(xì)胞在哮喘、動(dòng)脈粥樣硬化、心血管疾病、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、癌癥等炎癥性疾病中發(fā)現(xiàn)增加。

流式細(xì)胞術(shù)作為一項(xiàng)先進(jìn)的細(xì)胞分析技術(shù)，為感染性疾病的臨床診療提供了快速、準(zhǔn)確、全面的免疫學(xué)檢測(cè)手段：