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實(shí)驗(yàn)干貨 | 如何構(gòu)建皮膚創(chuàng)傷愈合模型?

來(lái)源:深圳市瑞沃德生命科技股份有限公司 更新時(shí)間:2025-04-17 17:45:13 閱讀量:396
導(dǎo)讀:皮膚創(chuàng)傷愈合模型的構(gòu)建和評(píng)估



前言


皮膚創(chuàng)傷愈合作為機(jī)體重要的生理修復(fù)過(guò)程,涉及復(fù)雜的細(xì)胞遷移、增殖及分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò),其機(jī)制研究對(duì)臨床創(chuàng)面管理具有重要指導(dǎo)意義。小鼠皮膚創(chuàng)傷愈合模型因具有遺傳背景清晰、操作可控性強(qiáng)及與人類愈合過(guò)程高度保守等特點(diǎn),已成為揭示皮膚再生機(jī)制和評(píng)估新型治療策略的核心工具。


然而,單純的皮膚創(chuàng)傷愈合模型難以全面模擬臨床常見(jiàn)合并代謝性疾病或循環(huán)障礙的慢性難愈性創(chuàng)面特征,如糖尿病皮膚潰瘍患者普遍存在的糖代謝紊亂、慢性炎癥微環(huán)境及血管新生障礙等特殊病理狀態(tài)。


因此,近年來(lái)研究者逐步將創(chuàng)傷模型與糖尿病、動(dòng)脈硬化或免疫缺陷等疾病模型聯(lián)合構(gòu)建,通過(guò)病理微環(huán)境與創(chuàng)傷修復(fù)的動(dòng)態(tài)互作模擬復(fù)雜臨床表型。


1. 材 料


1

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

1)物種:C57BL/6小鼠(8-10周齡)。


2)飼養(yǎng)條件:SPF級(jí)環(huán)境,12小時(shí)光暗循環(huán),自由飲水。


2

造模材料

皮膚打孔器、皮膚消毒液、剪刀、鑷子。

皮膚打孔器

3

造模方法

1)小鼠麻醉后,使用剃毛器去除背部毛發(fā),用脫毛膏脫去多余毛發(fā),使皮膚完全暴露。脫毛面積需從創(chuàng)面位置向周圍擴(kuò)大2-3倍,防止周圍毛發(fā)生長(zhǎng)影響創(chuàng)面愈合。


2)背部皮膚消毒后,用直徑6mm皮膚打孔器在各組小鼠背部正中靠近尾部位置制作創(chuàng)口。因小鼠皮膚較薄,制作真皮層創(chuàng)口難度較大,一般制作全層皮膚切除創(chuàng)口。


Tip


① 如進(jìn)行糖尿病小鼠的創(chuàng)面愈合實(shí)驗(yàn),需考慮麻醉劑對(duì)小鼠的影響,建議使用氣體麻醉方式麻醉,縮短麻醉時(shí)間。


② 小鼠創(chuàng)口制作面積6mm為宜,一般14天即可觀察到創(chuàng)面大幅度縮小且結(jié)痂;8mm創(chuàng)面需20天以上。



2. 模型評(píng)估


2.1 創(chuàng)面愈合情況觀察


可于拍攝造模前后及愈合過(guò)程中的創(chuàng)面照片,Image J 軟件統(tǒng)計(jì)創(chuàng)面面積,計(jì)算創(chuàng)面愈合率。


圖 1 小鼠6mm創(chuàng)面愈合情況 [1]


2.2 創(chuàng)面組織病理學(xué)觀察


實(shí)驗(yàn)終點(diǎn),取創(chuàng)面及周圍正常皮膚組織,進(jìn)行病理檢查。使用HE染色等染色方法觀察創(chuàng)面表皮細(xì)胞爬行、肉芽組織新生情況。


圖 2 創(chuàng)面皮膚染色后的病理學(xué)觀察 [1]


參考文獻(xiàn):

【1】 楊丹陽(yáng),張暇蔚,姚文濤,等.雞血藤對(duì)db/db糖尿病皮膚潰瘍小鼠創(chuàng)面愈合的影響及作用機(jī)制研究[J].世界中醫(yī)藥,2024,19(23):3583-3591.



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