Hi 小伙伴們大家好,歡迎來到“生物樣本庫避坑指南”系列專欄第五期,本期我們繼續(xù)介紹種質(zhì)資源庫—動物資源的建設(shè)要點。
保藏流程:動物樣本通常包括采集、接收、制備、保存、運輸、儲存、分發(fā)、銷毀等過程。
動物資源樣本采集應(yīng)建立記錄和實施動物保定程序以避免或最小化在保定過程中對動物造成的不適痛苦和疼痛??梢罁?jù)不同動物類型進(jìn)行血液,尿液,糞便,趾甲,毛發(fā),乳樣,種質(zhì)及其他動物源性樣本制定采集方法。
具體可參考下表:
固體組織樣本采集示例
血液樣本采集方法示例
尿液樣本采集方法示例
反芻動物和小型哺乳動物乳樣采集方法示例
其他樣本采集方法示例
樣本處理及存儲:可針對不同樣本類型選擇合適的固定
固體樣本:可采取液氮速凍對分裝樣本或待分裂樣本進(jìn)行處理,可選擇保護(hù)劑用于維持樣本穩(wěn)定性,對于細(xì)胞分類可采取機(jī)械法或酶解法處理組織樣本;而核酸及蛋白的提取可以從石蠟包埋的組織樣本或冷凍組織樣本中提取。
種質(zhì)樣本:主要包括胚胎,卵子及精子,宜根據(jù)不同的生物樣本類型、物種和預(yù)期要求采用合適的方法,并記錄遺傳來源、階段、保存和復(fù)原操作說明以及胚胎的數(shù)量;種質(zhì)樣本應(yīng)長期存儲于液氮環(huán)境中。
血液樣本:全血樣本分離前可選用添加劑以減少 溶血,若無分離必要,可保存在-70℃及以下環(huán)境,后續(xù)可用于DNA或RNA分離。血液衍生物可根據(jù)如淋巴細(xì)胞,循環(huán)細(xì)胞游離DNA等目標(biāo)類型選擇可是處理方式后,存儲于-70環(huán)境中。若涉及核酸等物質(zhì)長期保存可儲存于液氮中。
尿液及乳樣樣本:可在24h(尿液)/4h(乳樣)內(nèi),在2-8℃條件下進(jìn)行存儲,通過離心法來分離細(xì)胞及其他物質(zhì)。
糞便樣本:可將新鮮糞便用無菌采集管是保存并立即冷凍,若進(jìn)行DNA提取使用了保存液,需在最終存儲前將保存液離心去除。
羽毛樣本:需去除羽毛上的碎片和有機(jī)物(如異丙醇等溫和有機(jī)溶劑等方式)
魚鰭樣本:保存在含添加劑的容器內(nèi)(如采用80%酒精保存樣本用于DNA提?。?/span>
鱗片樣本:可采用95%的非變形酒精,或?qū)⑿迈r鱗片保存在濾紙之間,陰涼通風(fēng)處干燥后存儲于室溫環(huán)境(低濕度)中。
卵白樣本:可使用離心和抽吸,或 過濾卵白的方式分離球蛋白和可溶性蛋白,卵白中其他蛋白可根據(jù)其特性結(jié)晶或分離獲得。
毛發(fā)趾甲:用于DNA提取的毛發(fā)或趾甲可在室溫下短暫存放,長期存儲應(yīng)在分析前置于-70℃條件下存儲。
從活體保種場、細(xì)胞培養(yǎng)室到-196℃的液氮罐,動物種質(zhì)資源庫的建設(shè)是一條環(huán)環(huán)相扣的技術(shù)鏈。建設(shè)動物種質(zhì)資源庫,已不再是一項單純的科研工作,而是關(guān)乎國家糧食安全、生物多樣性與未來育種核心競爭力的戰(zhàn)略行動。它需要我們前瞻性的規(guī)劃、持續(xù)性的投入與跨領(lǐng)域的協(xié)作。唯有將今天的行動,視為對未來的投資,我們才能牢牢守住這份沉甸甸的“國家畜禽種質(zhì)資源家底”,讓今天的多樣性,成為明天育種創(chuàng)新的源泉。
參考資料:
1. GB/Z 44314-2024 生物技術(shù) 生物樣本保藏 動物生物樣本保藏要求
賽默飛的生物樣本庫解決方案提供全流程合規(guī)、高質(zhì)量存儲的全案,以齊全的設(shè)備與創(chuàng)新技術(shù),覆蓋從+4℃到-196℃的全線低溫存儲環(huán)境下安全保存,為每一份珍貴樣本提供“全生命周期”的精準(zhǔn)守護(hù),TSX系列超低溫冰箱及CryoExtra液氮儲存罐,提供高質(zhì)量存儲環(huán)境,Nalgene?和Nunc?凍存耗材,避免交叉污染,保障樣本活性。
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