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異構(gòu)體峰難解難分？“寶藏神柱”幫你忙！

來源：島津（上海）實驗器材有限公司 更新時間：2025-11-27 15:45:24 閱讀量：196
導(dǎo)讀：Shim-pack Scepter HD-C18-80：高密度鍵合工藝，通過縮小了C18鏈之間的間距，達(dá)到了26.0%的高載碳量，能更好的識別不同化合物在空間結(jié)構(gòu)上的微小差異，從而使難解難分的異構(gòu)體峰實現(xiàn)基線分離。

最讓分析工作者頭疼的項目中，

(同分異構(gòu)體)的分離分析

絕對能榜上有名

類似的結(jié)構(gòu)、相近的極性，總是讓各路英雄好“柱”紛紛折戟。大家往往是嘗試了各種類型的色譜柱，使出各種招數(shù)，也還是達(dá)不到分離度要求。


這時候，就必須請出我們異構(gòu)體分離的

“寶藏神柱”

{ Shim-pack Scepter HD-C18-80}

Shim-pack Scepter HD-C18-80作為雜化硅膠Scepter家族中的一員大將，擁有其他常規(guī)色譜柱不具備的特殊工藝——高密度鍵合工藝，通過縮小了C18鏈之間的間距，達(dá)到了26.0%的高載碳量，能更好的識別不同化合物在空間結(jié)構(gòu)上的微小差異，從而使難解難分的異構(gòu)體峰實現(xiàn)基線分離。



案例一

01

某雙鍵位置異構(gòu)體的分離


如圖所示，某API與雜質(zhì)之間僅一個雙鍵位置差異，實驗員在常規(guī)C18柱上反復(fù)嘗試，也僅能將分離度做到1.6，無法滿足使用需求。然而，將同樣的方法在Shim-pack Scepter HD-C18-80上進(jìn)行實驗，即可達(dá)到2.2的分離度，輕松滿足需求。



色譜柱：Shim-pack Scepter HD-C18-80（4.6 mm × 250 mm，5 μm）

流  速：0.8 mL/min

進(jìn)樣量：10 μL

柱  溫：25 ℃

檢測器：UV，270 nm

流動相：A：20 mM磷酸二氫鈉溶液（用磷酸調(diào)pH 2.2）；B：乙腈


梯度條件：


小結(jié)：


分析化合物結(jié)構(gòu)，可以看到雙鍵位置的差異帶來了這部分空間結(jié)構(gòu)的呈現(xiàn)平面與立體的差異，從而被高密度鍵合C18鏈捕捉，從而實現(xiàn)了更好的分離效果。


案例二

02

某芳環(huán)取代異構(gòu)體的分離


如圖所示，某芳環(huán)異構(gòu)體化合物（主成分）中，存在由原料引入的兩個甲基位置異構(gòu)體（雜質(zhì)1，雜質(zhì)2），以及原料和原料的異構(gòu)體（雜質(zhì)A，雜質(zhì)B，雜質(zhì)C）。這兩組化合物由于極性差異，組間出峰時間差別較大，同時組內(nèi)又難以分離。同時由于反應(yīng)前后R1和R2基團(tuán)中，均包含有叔胺官能團(tuán)，對常規(guī)的酸性或中性條件下的分離有帶來了挑戰(zhàn)。實驗員嘗試了不同鍵合相的色譜柱以及不同的pH條件，最終在Shim-pack Scepter HD-C18-80上、以pH9.0的流動相條件完成了六個峰的基線分離。


色譜柱：Shim-pack Scepter HD-C18-80（4.6 mm × 150 mm，3 μm）；

柱流速：1 mL/min；

檢測器：VWD 254 nm；

柱溫：20 ℃；

流動相：流動相A：0.04 mol/L磷酸氫二鉀（用1 mol/L NaOH調(diào)節(jié)pH值至9.0）

流動相B：乙腈；

進(jìn)樣量：5 μL


梯度條件：


小結(jié)：


分析化合物結(jié)構(gòu)，甲基的位置異構(gòu)僅能提供微小的疏水作用力差異，載碳量26.0%的色譜柱對這種疏水作用力差異能有效識別并產(chǎn)生良好的分離效果。同時耐受pH 1-12的雜化硅膠能很好的適應(yīng)堿性流動相條件，保證了色譜柱的耐用性。


結(jié)語

從上述案例可以看出，Shim-pack Scepter HD-C18-80這根色譜柱對空間結(jié)構(gòu)、疏水作用力存在差異的同分異構(gòu)體，具有其他色譜柱所不具備的良好的識別能力，充分體現(xiàn)了高密度鍵合帶來的強大作用，無愧為同分異構(gòu)體分析的“寶藏神柱”！

掃碼下載PDF版應(yīng)用報告：


HD-C18使用小貼士:






色譜柱活化、沖洗和保存：


新柱可以使用純有機試劑（如甲醇、乙腈），從0.1mL/min流速慢慢提高到正常使用流速的一半，沖洗總體積以20倍柱體積為宜。


日常使用結(jié)束后，使用10%有機相/水和純有機相各沖洗20倍柱體積，然后保存在純有機相中。如遇到常規(guī)沖洗無法解決的問題，可以參考特別的清洗方法（點擊劃線標(biāo)題查看）：實用干貨丨還沒放假呢，峰就先“癱”了？快給柱子洗個澡吧！



注意事項：


HD-C18柱采用了高密度鍵合技術(shù)，因此不適宜高比例水相條件，建議有機相比例不低于10%。


建議在色譜柱前端連接在線過濾器和保護(hù)柱以延長色譜柱使用壽命。


在線過濾器使用與維護(hù)方法：



液相保護(hù)柱安裝方法：









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