信使RNA( mRNA )相比于DNA治療有很多優(yōu)勢,但同時也具有不穩(wěn)定性,所以目前廣泛使用脂質納米粒(LNPs)載體來保護mRNA免受核酸酶降解,使其能成功被細胞吞噬,核酸胞內釋放并翻譯成蛋白。
LNP有四個重要組成部分:結構性脂質、膽固醇、陽離子脂質和隱形脂質[1] ,在工藝設計時各配方的配比對納米粒和mRNA的穩(wěn)定性十分重要,否則可能會產(chǎn)生不溶性微粒,降低藥物運送效率和藥物穩(wěn)定性。
mRNA-LNPs樣品測試實例展示
酯類物質
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蛋白質
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可能來源于:
(1)mRNA原料或輔料中殘留蛋白質可能形成顆粒;
(2)制備過程中引入的環(huán)境蛋白。
聚類有機物質
▼
知識鏈接
脂質體樣品中的雜質可能來源于很多物質,包括反應中使用的酶,以及添加到反應中的其他成分和殘留的三磷酸核苷 (NTP)等[2]。
未使用冷凍保護劑的情況下,在 ?80°C 下儲存可能導致顆粒聚集,從而降低蛋白質表達效率。振動和光照也會引起類似的變化[3] 。
具有叔胺的可離子化脂質通過氧化和水解產(chǎn)生醛雜質,這些雜質與 mRNA 共價結合,損害其在儲存期間的完整性和活性[4] ;
[1] Chen, X., Gao, Y., Li, J., Guo, H., Wang, Z., & Gao, S. (2023). mRNA脂質納米粒載藥系統(tǒng)的構建及體外評價 [Construction and in vitro evaluation of mRNA lipid nanoparticle drug delivery system]. 藥學實踐與服務 Journal of Pharmaceutical Practice and Service, 41(5), 291-295.
[2] Fahr, S., Pe?a-Benavides, S.A., Thiel, L., Sengoba, C., Karacasulu, K., Ihling, N., Sosa-Hernández, J.E., Gilleskie, G., Woodley, J.M., Parra-Saldívar, R., Mansouri, S.S., & Roh, K. (2022). Mobile On Demand COVID-19 Vaccine Production Units for Developing Countries. Industrial & Engineering Chemistry Research.
[3] Kamiya, M., Matsumoto, M., Yamashita, K., Izumi, T., Kawaguchi, M., Mizukami, S., Tsurumaru, M., Mukai, H., & Kawakami, S. (2022). Stability Study of mRNA-Lipid Nanoparticles Exposed to Various Conditions Based on the Evaluation between Physicochemical Properties and Their Relation with Protein Expression Ability. Pharmaceutics, 14(11), 2357.
[4] Hashiba, K., Taguchi, M., Sakamoto, S., Otsu, A., Maeda, Y., Ebe, H., Okazaki, A., Harashima, H., & Sato, Y. (2024). Overcoming thermostability challenges in mRNA-lipid nanoparticle systems with piperidine-based ionizable lipids. Communications biology, 7(1), 556.
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