- 2025-02-28 17:43:04純化分離
- 純化分離是化學、生物學及制藥等領域中的關鍵步驟,旨在從混合物中提取或去除特定成分,以獲得高純度物質(zhì)。這一過程常涉及物理、化學或生物方法,如蒸餾、萃取、色譜分離、結(jié)晶、膜過濾及電泳等。純化分離技術對于提升產(chǎn)品質(zhì)量、確保藥物安全有效及推動科學研究進展至關重要。通過精確控制條件,可高效實現(xiàn)目標成分的分離與純化,滿足不同領域?qū)Ω呒兌任镔|(zhì)的需求。
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純化分離問答
- 2022-11-23 13:24:00國粹的傳承與創(chuàng)新 | 賽默飛全新中藥分離純化解決方案
- 國粹的傳承與創(chuàng)新中醫(yī)藥是中華文明的傳統(tǒng)瑰寶,凝聚著中華民族的博大智慧,也是創(chuàng)新藥物研究的重要源泉。1971年,屠呦呦團隊在極其艱苦的條件下從青蒿中成功發(fā)現(xiàn)了青蒿素,在過去50多年時間里拯救了全 球數(shù)以百萬的生命,得到了世界的廣泛認可和贊譽,于2015年獲得諾貝爾生理學或醫(yī)學獎。在近十年的時間里,中藥有效成分的分離純化技術也得到了長足的發(fā)展,賽默飛全新推出的中藥分離純化解決方案,利用高效液相色譜技術結(jié)合先進的餾分收集器,可以有效助力科研工作者快速發(fā)現(xiàn)和分離復雜中藥基質(zhì)中微量的化學成分,為后續(xù)的結(jié)構(gòu)鑒定,藥理毒理研究提供可靠的技術支持。以益母草為例,作為一種傳統(tǒng)的中藥材,其內(nèi)含豐富的化學成分,具有多種藥理作用。益母草中的己糖二酸是一種無毒的葡萄糖衍生物,有助于降低膽固醇和調(diào)控人體內(nèi)的激素水平,但己糖二酸類成分極性較強且結(jié)構(gòu)與性質(zhì)相近,加之含量較低且穩(wěn)定性較差,采用傳統(tǒng)的分離純化流程難度很大,但借助賽默飛全新推出的Vanquish?餾分收集系統(tǒng),以上問題都可以迎刃而解。Vanquish集成餾分收集器亮點01 系統(tǒng)設計人性化Vanquish?集成式餾分收集器的靈活擺搭組合方式為用戶提供卓 越的體驗Vanquish?集成的餾分收集器(Vanquish Integral Fraction Collector, VFC)模塊化的設計更加靈活,可以與液相系統(tǒng)整合到一起,使流路的連接盡可能的短,結(jié)合不同流量優(yōu)化不同延遲體積管路,這種設計的優(yōu)點是可以最 大程度減小延遲體積、降低峰擴散以及降低餾分重疊的風險,提高低含量組分收集的準確性;同時該模塊還標配了先進的循環(huán)風冷控溫技術,可以最 大限度提高餾分收集過程中暫存在樣品盤中的餾分的穩(wěn)定性。02 軟件控制智能化結(jié)合 Chromeleon變色龍軟件全自動方法向?qū)Ш屠每諝馓结槳?創(chuàng)的延遲體積測定技術,不需要額外輔助工具以及試劑可自動感知系統(tǒng)延遲體積。系統(tǒng)自帶的向?qū)Э蓞f(xié)助操作精確控制餾分收集器切閥時間,最 大限度提高收集精度和樣品純度。模擬餾分收集工具及可視化收集過程可以幫助客戶靈活改進收集策略。03 觸發(fā)模式多樣化紫外檢測器——峰觸發(fā)的益母草提取液餾分收集示意圖用戶可根據(jù)實際應用及分離情況,針對性地選擇時間或峰值觸發(fā)餾分收集,提高分餾效率。同時,通過累積收集或者重組收集等特殊模式,可以達到目標餾分量的積累或者化繁為簡的目的。針對中藥樣品化合物紫外吸收差異問題,可以使用紫外(UV或DAD)、電霧式檢測器(CAD)等不同檢測器信號觸發(fā),滿足客戶多樣化需求。04 分餾結(jié)果“理想化”VFC采用的創(chuàng)新流路設計最 大程度降低了殘留風險,VFC 具有的多種沖洗、清洗功能,可減少交叉污染,提高分餾純度。餾分收集的重復性良好,回收率高。對餾分累積收集、濃縮以后,通過紫外光譜、核磁共振波譜及質(zhì)譜等手段,可以對目標組分進行結(jié)構(gòu)鑒定。本文總結(jié)精確的餾分收集是客戶在整個工作流程中取得成功的基礎。使用Vanquish分離純化液相色譜系統(tǒng)對益母草提取液目標組分進行純化餾分收集,重復性好,收集效率高,收集殘留率低。說明Vanquish集成式餾分收集器方便開展分析級別的餾分收集,提高收集效率并降低殘留,非常適合分析級別的純化與分離的應用,能夠滿足科研以及企業(yè)客戶的需求。
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- 2023-06-28 17:17:04全自動酸蒸清洗/純化一體機——AC300
- 全自動酸蒸清洗/純化一體機——AC300酸蒸超凈清洗是一種自動、密閉、酸蒸汽清洗方法。通過內(nèi)置可控溫加熱系統(tǒng),利用酸蒸汽安全高效地對所 有可溶于酸中的任何痕量金屬污染物進行超凈清洗,并將其留在液體酸中,絕不會接觸正在清洗的反應容器。功能特點:蒸汽單循環(huán)技術(OWV)——臟酸不回流,不污染凈酸確保洗過的臟酸直接排出系統(tǒng),而不會回流進酸池造成污染。而傳統(tǒng)技術的臟酸要回流進酸池,然后再次蒸發(fā)出來去清洗,不斷循環(huán),導致臟酸不斷污染凈酸,從而酸蒸汽也越來越臟,無法勝任稍高污染度的清洗。真實溫度控制技術(RTC)——確保蒸汽的高純度準確測量,是控溫精確的前提。采用RTC真實溫度控制技術,溫度探頭經(jīng)過特殊處理,具有與特氟龍一樣的抗酸能力,直接插進酸液,監(jiān)控酸液的真實溫度,從而準確控制溫度,確保酸蒸汽的純度,杜絕其他品牌只監(jiān)控加熱器溫度而無法準確控溫,酸蒸汽純度低的問題。PTC半導體加熱器——最安全的加熱器,沒有之一!最適合長時間無人值守!加熱器具有自我溫度保護功能,在所有溫控系統(tǒng)都失靈的極端情況下,其 最高溫度也不會超過250℃,避免燒毀儀器甚至火災。 清洗流程表:AC300讓您的酸循環(huán)起來!廢酸重復使用,節(jié)約資金,保護環(huán)境AC300不但完美勝任酸蒸清洗任務,還具有自我酸純化功能,用戶只需在軟件中勾選酸純化選項,甚至不用更換酸瓶,AC300即自動抽取廢酸瓶中的廢酸進行亞沸蒸餾純化,純化后的酸自動收集到純酸瓶,以備下次使用。隨后整個系統(tǒng)會自動被超純水潤洗和熱空氣干燥,以備下一輪的酸蒸清洗任務。廢酸純化流程圖:轉(zhuǎn)載自:http://www.hzxpz.com/
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- 2023-06-09 11:39:07經(jīng)典磁珠一文解讀:AMPure XP純化實用技巧
- 基于SPRI技術的AMPure XP,采用超順磁磁珠幫助純化核酸片段,被廣泛應用到NGS行業(yè),PCR體系、酶切、連接反應體系的純化。作為行業(yè)的“金標準“試劑盒,AMPure XP有哪些高頻Q&A問題呢?AMPure XP怎么純化長片段?怎么提高我的樣本得率?產(chǎn)物純度有什么優(yōu)化的方向嗎?我可以選擇純化250 bp的那一條條帶嗎?小貝總結(jié)了10條AMPure XP Q&A問題實用技巧:1、乙醇比例乙醇溶液必須至少70%。當將100%乙醇稀釋至70%時,請確保在配置溶液合并之前分別測量水和乙醇的體積。用水補齊乙醇的稀釋方式會導致濃度低于預期。請確保存儲的乙醇在不使用時保持瓶蓋擰緊。2、充分的混合在最 初磁珠與樣品結(jié)合和洗脫混合期間,徹底的混合至關重要??捎寐缘陀诳偪左w積的吸頭進行混合。洗脫時,需要注意最 小洗脫體積(96孔規(guī)格為40 μL,384孔規(guī)格為15 μL),以確保磁珠充分重懸。還應保持足夠的孵育時間,以確保核酸有足夠的時間與磁珠結(jié)合或解離。由于樣品的粘度,結(jié)合過程中的渦旋可能效率不高。3、大反應體系大體積反應可以采用更長的樣品&磁珠結(jié)合和磁分離時間??蓪inding結(jié)合時間增加到10分鐘,并確保在棄上清液之前所有的磁珠均被充分磁分離。4、避免實驗中磁珠損失如果在棄清液的過程中磁珠被吸入槍頭,結(jié)合在這些磁珠上的核酸則會在這個步驟損失掉。首輪移除上清時,緩慢輕柔地操作,盡可能多地移除清液,同時確保不會干擾磁珠在磁環(huán)/磁力架上的吸附。如果意外吸出磁珠,請將所有磁珠重新打回孔中,讓磁珠重新磁吸。隨后,再度移除上清,嘗試緩慢吸液或使用更細的槍頭。小體積樣品更容易受到磁珠損耗的影響,因為磁珠可能達不到孔中磁鐵的水平位置。5、大片段樣品的磁珠干燥10 kb以上的片段與磁珠結(jié)合非常緊密,如果樣品變干則難以洗脫。盡可能完全地棄掉最 后一次乙醇清洗液,立即加入洗脫緩沖液并充分混合。保持蓋子打開狀態(tài),乙醇在洗脫孵育期間將繼續(xù)從孔中蒸發(fā)。6、低洗脫體積洗脫體積小會導致回收率降低。這是因為會有少量洗脫緩沖液始終包覆在磁珠上。該體積取決于孔的形狀和孔中的磁珠量,因此較小的洗脫體積將導致相對較高比例的洗脫液殘留。7、當你用紫外吸收法檢測回收率不只是PCR雙鏈產(chǎn)物,體系中過量的引物和核苷酸同樣產(chǎn)生吸收。因此測量未純化的PCR反應,可能獲得高于實際PCR產(chǎn)物濃度的吸光度值。對比純化前后的吸收值,則會導致回收率看起來比實際低。小貝建議:在瓊脂糖凝膠上運行等量的未純化PCR反應產(chǎn)物與純化后的PCR反應產(chǎn)物(例如1/4的未純化PCR產(chǎn)物和1/4的洗脫液)以便檢查回收情況,或使用基于特異性熒光染料的測定,例如PicoGreen。8、引物的殘留AMPure XP試劑與PCR反應混合后的試劑最 終濃度決定了PCR產(chǎn)物與磁珠結(jié)合的片段大小。AMPure XP主要結(jié)合> 100 bp的PCR產(chǎn)物,并丟棄小于50個堿基的引物。較大的引物和引物二聚體可以與磁珠結(jié)合。請確保您的PCR產(chǎn)物在循環(huán)過程中沒有蒸發(fā)導致體積變小,并添加正確體積的試劑(見下表)。確保用乙醇沖洗在混合和結(jié)合過程中樣品有接觸到孔內(nèi)壁的任何地方。如果在純化體系中存在過量的引物,減少該PCR反應的引物量也可以是一個優(yōu)化的方向。9、下游酶反應效果不佳如果您的下游酶反應對痕量乙醇極其敏感,請?zhí)砑觾煞昼姷谋J馗稍锊襟E。請注意,大片段會與磁珠緊密結(jié)合,在磁珠完全干燥后可能難以洗脫。10、如何選擇性保留200-500 bp核酸片段AMPure XP是用于PCR產(chǎn)物純化的試劑盒。對于片段篩選的應用,請考慮使用 SPRIselect試劑盒。有關 SPRIselect 片篩的更多信息,請訪問經(jīng)典磁珠一文解讀:NGS片段篩選比例計算
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- 2023-05-31 13:01:17【ISCO Webinar】您有公斤級的樣品需要純化嗎?
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