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【阿拉丁】蛋白質(zhì)純化相關(guān)試劑:親和層析,精準(zhǔn)分離

來(lái)源:阿拉丁試劑(上海)有限公司 更新時(shí)間:2025-12-19 17:00:25 閱讀量:161
導(dǎo)讀:親和層析純化蛋白,推薦阿拉丁His標(biāo)簽純化相關(guān)試劑與配套產(chǎn)品。










親和層析是重組蛋白純化中的“王牌技術(shù)”,憑借其高選擇性、高純度和溫和操作,成為實(shí)驗(yàn)室及工業(yè)級(jí)純化不可或缺的利器。無(wú)論是His標(biāo)簽蛋白、GST融合蛋白,還是抗體類大分子,親和層析都能實(shí)現(xiàn)快速、穩(wěn)定的目標(biāo)蛋白捕獲。

那么,親和層析實(shí)驗(yàn)到底如何開(kāi)展?需要哪些關(guān)鍵試劑?

?? 一套標(biāo)準(zhǔn)的His標(biāo)簽蛋白親和純化流程如下

?? 步驟一:蛋白表達(dá)與裂解

在大腸桿菌或哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)目標(biāo)蛋白后,使用裂解緩沖液進(jìn)行細(xì)胞裂解。常搭配超聲或反復(fù)凍融,確保釋放蛋白質(zhì)。

?? 步驟二:親和結(jié)合

將裂解液加入Ni-NTA瓊脂糖柱(或磁珠、預(yù)裝柱),利用His標(biāo)簽與Ni2?之間的螯合作用,使目標(biāo)蛋白特異性結(jié)合。

??推薦試劑:UltraBio? His-tag Purification Resin、UltraBio? His標(biāo)簽蛋白純化瓊脂糖磁珠(TED-Ni)、Ni親和層析預(yù)裝柱(阿拉丁官網(wǎng)具有多規(guī)格可選)

?? 步驟三:洗脫雜蛋白

洗滌緩沖液中加入低濃度咪唑(10–30 mM),去除非特異性結(jié)合蛋白,同時(shí)保留目標(biāo)蛋白在柱上結(jié)合。

 ?? 步驟四:蛋白洗脫

使用高濃度咪唑(250–500 mM)洗脫目標(biāo)蛋白??纱钆鋚H調(diào)節(jié)及NaCl調(diào)控,提升純化效率與蛋白活性。

??推薦試劑:咪唑、Tris-HCl、NaCl、甘油、DTT

?? 步驟五:蛋白緩沖液置換 / 濃縮

經(jīng)親和洗脫后,目標(biāo)蛋白可通過(guò)透析、離心濃縮或柱層析進(jìn)行緩沖液更換,適應(yīng)后續(xù)結(jié)構(gòu)或功能實(shí)驗(yàn)。

?? 阿拉丁親和層析產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

? 完整親和純化體系

從親和填料(Ni-NTA介質(zhì)、磁珠、預(yù)裝柱)到高純緩沖液組分(咪唑、Tris-HCl甘油等),全流程覆蓋,輕松實(shí)現(xiàn)純化標(biāo)準(zhǔn)化。

 高純穩(wěn)定,適合多系統(tǒng)表達(dá)

阿拉丁試劑純度高、蛋白兼容性強(qiáng),適用于大腸桿菌、哺乳細(xì)胞、酵母等表達(dá)體系。

多規(guī)格靈活選擇

適配科研、藥物開(kāi)發(fā)與工藝優(yōu)化所需,提供小包裝到大包裝填料規(guī)格,以及緩沖液等。

從表達(dá)到洗脫,從實(shí)驗(yàn)室到產(chǎn)業(yè)級(jí),阿拉丁蛋白質(zhì)純化相關(guān)產(chǎn)品始終為您的分離之路保駕護(hù)航。

?? 部分親和層析相關(guān)產(chǎn)品

貨號(hào)

產(chǎn)品

名稱

包裝

規(guī)格

級(jí)別

和純度

H752721-FR

UltraBio? His-tag Purification Resin

10ml;

100ml;

1L

Fast Flow;

耐還原

螯合型

T751558

UltraBio? His標(biāo)簽

蛋白純化

瓊脂糖

磁珠

(TED-Ni)

2ml;

10ml;

50ml

UltraBio?

N5289

Ni親和

層析

預(yù)裝柱

1ml;

5ml

i-Quip? 

柱管材質(zhì):

塑料;

粒徑:

90μm;

柱載量:

≥30mg

肌紅蛋白/ml

I108706

咪唑

5g;25g;

100g;500g

化學(xué)

適用于

分子

生物學(xué),

≥99.5%

純(CP)

T301499

Tris-鹽酸

緩沖液

100ml;

500ml

1M,pH 

7.4 滅菌

C111547

氯化鈉

500g;2.5kg;

12×500g

適用于

分子

生物學(xué),

≥99.5%

(AT)

G116208

甘油

100ml;

250ml;

1L;4L

適用于

分子

生物學(xué),

≥99%

D104860

DL-二硫

蘇糖醇(DTT) 

1g;5g;

25g;100g

適用于

分子

生物學(xué),

≥99%


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