- 2025-02-28 17:43:04純化分離填料
- 純化分離填料是用于生物大分子,如蛋白質(zhì)、核酸等純化過程中的關(guān)鍵材料。根據(jù)其性質(zhì)與用途,可分為多種類型,如離子交換填料、親和填料、凝膠過濾填料等。這些填料通過特定的相互作用機(jī)制,如靜電作用、親和作用、分子篩效應(yīng)等,實(shí)現(xiàn)對目標(biāo)分子的高效分離與純化。純化分離填料的選擇需根據(jù)目標(biāo)分子的性質(zhì)、純化條件及工藝要求綜合考慮。在生物醫(yī)藥、生物技術(shù)等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。
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純化分離填料問答
- 2022-11-23 13:24:00國粹的傳承與創(chuàng)新 | 賽默飛全新中藥分離純化解決方案
- 國粹的傳承與創(chuàng)新中醫(yī)藥是中華文明的傳統(tǒng)瑰寶,凝聚著中華民族的博大智慧,也是創(chuàng)新藥物研究的重要源泉。1971年,屠呦呦團(tuán)隊(duì)在極其艱苦的條件下從青蒿中成功發(fā)現(xiàn)了青蒿素,在過去50多年時(shí)間里拯救了全 球數(shù)以百萬的生命,得到了世界的廣泛認(rèn)可和贊譽(yù),于2015年獲得諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。在近十年的時(shí)間里,中藥有效成分的分離純化技術(shù)也得到了長足的發(fā)展,賽默飛全新推出的中藥分離純化解決方案,利用高效液相色譜技術(shù)結(jié)合先進(jìn)的餾分收集器,可以有效助力科研工作者快速發(fā)現(xiàn)和分離復(fù)雜中藥基質(zhì)中微量的化學(xué)成分,為后續(xù)的結(jié)構(gòu)鑒定,藥理毒理研究提供可靠的技術(shù)支持。以益母草為例,作為一種傳統(tǒng)的中藥材,其內(nèi)含豐富的化學(xué)成分,具有多種藥理作用。益母草中的己糖二酸是一種無毒的葡萄糖衍生物,有助于降低膽固醇和調(diào)控人體內(nèi)的激素水平,但己糖二酸類成分極性較強(qiáng)且結(jié)構(gòu)與性質(zhì)相近,加之含量較低且穩(wěn)定性較差,采用傳統(tǒng)的分離純化流程難度很大,但借助賽默飛全新推出的Vanquish?餾分收集系統(tǒng),以上問題都可以迎刃而解。Vanquish集成餾分收集器亮點(diǎn)01 系統(tǒng)設(shè)計(jì)人性化Vanquish?集成式餾分收集器的靈活擺搭組合方式為用戶提供卓 越的體驗(yàn)Vanquish?集成的餾分收集器(Vanquish Integral Fraction Collector, VFC)模塊化的設(shè)計(jì)更加靈活,可以與液相系統(tǒng)整合到一起,使流路的連接盡可能的短,結(jié)合不同流量優(yōu)化不同延遲體積管路,這種設(shè)計(jì)的優(yōu)點(diǎn)是可以最 大程度減小延遲體積、降低峰擴(kuò)散以及降低餾分重疊的風(fēng)險(xiǎn),提高低含量組分收集的準(zhǔn)確性;同時(shí)該模塊還標(biāo)配了先進(jìn)的循環(huán)風(fēng)冷控溫技術(shù),可以最 大限度提高餾分收集過程中暫存在樣品盤中的餾分的穩(wěn)定性。02 軟件控制智能化結(jié)合 Chromeleon變色龍軟件全自動(dòng)方法向?qū)Ш屠每諝馓结槳?dú) 創(chuàng)的延遲體積測定技術(shù),不需要額外輔助工具以及試劑可自動(dòng)感知系統(tǒng)延遲體積。系統(tǒng)自帶的向?qū)Э蓞f(xié)助操作精確控制餾分收集器切閥時(shí)間,最 大限度提高收集精度和樣品純度。模擬餾分收集工具及可視化收集過程可以幫助客戶靈活改進(jìn)收集策略。03 觸發(fā)模式多樣化紫外檢測器——峰觸發(fā)的益母草提取液餾分收集示意圖用戶可根據(jù)實(shí)際應(yīng)用及分離情況,針對性地選擇時(shí)間或峰值觸發(fā)餾分收集,提高分餾效率。同時(shí),通過累積收集或者重組收集等特殊模式,可以達(dá)到目標(biāo)餾分量的積累或者化繁為簡的目的。針對中藥樣品化合物紫外吸收差異問題,可以使用紫外(UV或DAD)、電霧式檢測器(CAD)等不同檢測器信號觸發(fā),滿足客戶多樣化需求。04 分餾結(jié)果“理想化”VFC采用的創(chuàng)新流路設(shè)計(jì)最 大程度降低了殘留風(fēng)險(xiǎn),VFC 具有的多種沖洗、清洗功能,可減少交叉污染,提高分餾純度。餾分收集的重復(fù)性良好,回收率高。對餾分累積收集、濃縮以后,通過紫外光譜、核磁共振波譜及質(zhì)譜等手段,可以對目標(biāo)組分進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。本文總結(jié)精確的餾分收集是客戶在整個(gè)工作流程中取得成功的基礎(chǔ)。使用Vanquish分離純化液相色譜系統(tǒng)對益母草提取液目標(biāo)組分進(jìn)行純化餾分收集,重復(fù)性好,收集效率高,收集殘留率低。說明Vanquish集成式餾分收集器方便開展分析級別的餾分收集,提高收集效率并降低殘留,非常適合分析級別的純化與分離的應(yīng)用,能夠滿足科研以及企業(yè)客戶的需求。
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- 2023-06-28 17:17:04全自動(dòng)酸蒸清洗/純化一體機(jī)——AC300
- 全自動(dòng)酸蒸清洗/純化一體機(jī)——AC300酸蒸超凈清洗是一種自動(dòng)、密閉、酸蒸汽清洗方法。通過內(nèi)置可控溫加熱系統(tǒng),利用酸蒸汽安全高效地對所 有可溶于酸中的任何痕量金屬污染物進(jìn)行超凈清洗,并將其留在液體酸中,絕不會(huì)接觸正在清洗的反應(yīng)容器。功能特點(diǎn):蒸汽單循環(huán)技術(shù)(OWV)——臟酸不回流,不污染凈酸確保洗過的臟酸直接排出系統(tǒng),而不會(huì)回流進(jìn)酸池造成污染。而傳統(tǒng)技術(shù)的臟酸要回流進(jìn)酸池,然后再次蒸發(fā)出來去清洗,不斷循環(huán),導(dǎo)致臟酸不斷污染凈酸,從而酸蒸汽也越來越臟,無法勝任稍高污染度的清洗。真實(shí)溫度控制技術(shù)(RTC)——確保蒸汽的高純度準(zhǔn)確測量,是控溫精確的前提。采用RTC真實(shí)溫度控制技術(shù),溫度探頭經(jīng)過特殊處理,具有與特氟龍一樣的抗酸能力,直接插進(jìn)酸液,監(jiān)控酸液的真實(shí)溫度,從而準(zhǔn)確控制溫度,確保酸蒸汽的純度,杜絕其他品牌只監(jiān)控加熱器溫度而無法準(zhǔn)確控溫,酸蒸汽純度低的問題。PTC半導(dǎo)體加熱器——最安全的加熱器,沒有之一!最適合長時(shí)間無人值守!加熱器具有自我溫度保護(hù)功能,在所有溫控系統(tǒng)都失靈的極端情況下,其 最高溫度也不會(huì)超過250℃,避免燒毀儀器甚至火災(zāi)。 清洗流程表:AC300讓您的酸循環(huán)起來!廢酸重復(fù)使用,節(jié)約資金,保護(hù)環(huán)境AC300不但完美勝任酸蒸清洗任務(wù),還具有自我酸純化功能,用戶只需在軟件中勾選酸純化選項(xiàng),甚至不用更換酸瓶,AC300即自動(dòng)抽取廢酸瓶中的廢酸進(jìn)行亞沸蒸餾純化,純化后的酸自動(dòng)收集到純酸瓶,以備下次使用。隨后整個(gè)系統(tǒng)會(huì)自動(dòng)被超純水潤洗和熱空氣干燥,以備下一輪的酸蒸清洗任務(wù)。廢酸純化流程圖:轉(zhuǎn)載自:http://www.hzxpz.com/
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- 2023-06-09 11:39:07經(jīng)典磁珠一文解讀:AMPure XP純化實(shí)用技巧
- 基于SPRI技術(shù)的AMPure XP,采用超順磁磁珠幫助純化核酸片段,被廣泛應(yīng)用到NGS行業(yè),PCR體系、酶切、連接反應(yīng)體系的純化。作為行業(yè)的“金標(biāo)準(zhǔn)“試劑盒,AMPure XP有哪些高頻Q&A問題呢?AMPure XP怎么純化長片段?怎么提高我的樣本得率?產(chǎn)物純度有什么優(yōu)化的方向嗎?我可以選擇純化250 bp的那一條條帶嗎?小貝總結(jié)了10條AMPure XP Q&A問題實(shí)用技巧:1、乙醇比例乙醇溶液必須至少70%。當(dāng)將100%乙醇稀釋至70%時(shí),請確保在配置溶液合并之前分別測量水和乙醇的體積。用水補(bǔ)齊乙醇的稀釋方式會(huì)導(dǎo)致濃度低于預(yù)期。請確保存儲(chǔ)的乙醇在不使用時(shí)保持瓶蓋擰緊。2、充分的混合在最 初磁珠與樣品結(jié)合和洗脫混合期間,徹底的混合至關(guān)重要。可用略低于總孔體積的吸頭進(jìn)行混合。洗脫時(shí),需要注意最 小洗脫體積(96孔規(guī)格為40 μL,384孔規(guī)格為15 μL),以確保磁珠充分重懸。還應(yīng)保持足夠的孵育時(shí)間,以確保核酸有足夠的時(shí)間與磁珠結(jié)合或解離。由于樣品的粘度,結(jié)合過程中的渦旋可能效率不高。3、大反應(yīng)體系大體積反應(yīng)可以采用更長的樣品&磁珠結(jié)合和磁分離時(shí)間??蓪inding結(jié)合時(shí)間增加到10分鐘,并確保在棄上清液之前所有的磁珠均被充分磁分離。4、避免實(shí)驗(yàn)中磁珠損失如果在棄清液的過程中磁珠被吸入槍頭,結(jié)合在這些磁珠上的核酸則會(huì)在這個(gè)步驟損失掉。首輪移除上清時(shí),緩慢輕柔地操作,盡可能多地移除清液,同時(shí)確保不會(huì)干擾磁珠在磁環(huán)/磁力架上的吸附。如果意外吸出磁珠,請將所有磁珠重新打回孔中,讓磁珠重新磁吸。隨后,再度移除上清,嘗試緩慢吸液或使用更細(xì)的槍頭。小體積樣品更容易受到磁珠損耗的影響,因?yàn)榇胖榭赡苓_(dá)不到孔中磁鐵的水平位置。5、大片段樣品的磁珠干燥10 kb以上的片段與磁珠結(jié)合非常緊密,如果樣品變干則難以洗脫。盡可能完全地棄掉最 后一次乙醇清洗液,立即加入洗脫緩沖液并充分混合。保持蓋子打開狀態(tài),乙醇在洗脫孵育期間將繼續(xù)從孔中蒸發(fā)。6、低洗脫體積洗脫體積小會(huì)導(dǎo)致回收率降低。這是因?yàn)闀?huì)有少量洗脫緩沖液始終包覆在磁珠上。該體積取決于孔的形狀和孔中的磁珠量,因此較小的洗脫體積將導(dǎo)致相對較高比例的洗脫液殘留。7、當(dāng)你用紫外吸收法檢測回收率不只是PCR雙鏈產(chǎn)物,體系中過量的引物和核苷酸同樣產(chǎn)生吸收。因此測量未純化的PCR反應(yīng),可能獲得高于實(shí)際PCR產(chǎn)物濃度的吸光度值。對比純化前后的吸收值,則會(huì)導(dǎo)致回收率看起來比實(shí)際低。小貝建議:在瓊脂糖凝膠上運(yùn)行等量的未純化PCR反應(yīng)產(chǎn)物與純化后的PCR反應(yīng)產(chǎn)物(例如1/4的未純化PCR產(chǎn)物和1/4的洗脫液)以便檢查回收情況,或使用基于特異性熒光染料的測定,例如PicoGreen。8、引物的殘留AMPure XP試劑與PCR反應(yīng)混合后的試劑最 終濃度決定了PCR產(chǎn)物與磁珠結(jié)合的片段大小。AMPure XP主要結(jié)合> 100 bp的PCR產(chǎn)物,并丟棄小于50個(gè)堿基的引物。較大的引物和引物二聚體可以與磁珠結(jié)合。請確保您的PCR產(chǎn)物在循環(huán)過程中沒有蒸發(fā)導(dǎo)致體積變小,并添加正確體積的試劑(見下表)。確保用乙醇沖洗在混合和結(jié)合過程中樣品有接觸到孔內(nèi)壁的任何地方。如果在純化體系中存在過量的引物,減少該P(yáng)CR反應(yīng)的引物量也可以是一個(gè)優(yōu)化的方向。9、下游酶反應(yīng)效果不佳如果您的下游酶反應(yīng)對痕量乙醇極其敏感,請?zhí)砑觾煞昼姷谋J馗稍锊襟E。請注意,大片段會(huì)與磁珠緊密結(jié)合,在磁珠完全干燥后可能難以洗脫。10、如何選擇性保留200-500 bp核酸片段AMPure XP是用于PCR產(chǎn)物純化的試劑盒。對于片段篩選的應(yīng)用,請考慮使用 SPRIselect試劑盒。有關(guān) SPRIselect 片篩的更多信息,請?jiān)L問經(jīng)典磁珠一文解讀:NGS片段篩選比例計(jì)算
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- 2020-12-23 10:52:40純化工藝的又一“新選擇 "——羥基磷灰石填料Ca++Pure
- 羥基磷灰石(hydroxyapatite,HA)是目前ZJ有特征的混合模式填料之一,由于其結(jié)晶的化學(xué)結(jié)構(gòu)、立體構(gòu)造的特點(diǎn),羥基磷灰石與抗體的Fab片段、Fc片段可發(fā)生相互作用。所以至今為止,羥基磷灰石在抗體及蛋白質(zhì)的純化、多聚體和殘留核酸的去除等工藝中,作為精細(xì)純化步驟的填料被廣泛使用。并且,該填料兼具離子交換和金屬親和力,具有其他填料不具備的特殊分離能力,能夠?yàn)樯锎蠓肿臃蛛x純化提供獨(dú)特的解決方案。羥基磷灰石純化工藝的“新選擇”!Ca++Pure-HA羥基磷灰石填料由東曹公司采用了優(yōu)質(zhì)ding級材料,通過專有工藝研發(fā)生產(chǎn)的高純度的10nm×100nm六邊形截面晶體,凝聚成球狀顆粒。經(jīng)過高溫?zé)Y(jié),提高了機(jī)械強(qiáng)度和化學(xué)穩(wěn)定性,能夠滿足工業(yè)規(guī)模的純化要求。Ca++Pure-HA強(qiáng)大的特性使其可以在高流速和大型層析柱中重復(fù)循環(huán)使用。Ca++Pure-HA的應(yīng)用范圍分離抗體及蛋白質(zhì)的多聚體、異構(gòu)體、分解物、電荷異質(zhì)體等目標(biāo)產(chǎn)品內(nèi)源性雜質(zhì)分離DNA、HCP、病毒等來自生產(chǎn)工藝或混入的外源性雜質(zhì)適用于ZZ(精純)步驟中的分離純化酸性條件下各填料穩(wěn)定性對比上圖顯示的是,在裝填有高吸附型羥基磷灰石Ca++Pure-HA、市售高吸附型 (B公司Type I) 和高耐久型 (B公司Type II) 羥基磷灰石填料的層析柱中,連續(xù)用弱酸性蒸餾水通液時(shí),層析柱的理論塔板數(shù)的變化情況。市售品在大約80~90小時(shí)通液后,理論塔板數(shù)下降10%以上。與之相比,Ca++Pure-HA的理論塔板數(shù)雖然也會(huì)緩慢減少,但在約160小時(shí)之前,理論塔板數(shù)仍保持在90%以上。也就是說,Ca++Pure-HA屬于高吸附型,且在酸性條件下的耐久性更好。單克隆抗體多聚體分離實(shí)例下圖是使用Ca++Pure-HA精純IgG樣品的分離實(shí)例。配合使用氯化鉀洗脫緩沖液可以有效去除mAb中的聚集體和降解物。從分析結(jié)果中可以看到,單體峰和多聚體峰中間的分辨率較高。隨后,對純化后的IgG樣品進(jìn)行尺寸排阻色譜分析。結(jié)果顯示,單克隆抗體中多聚體的總量從18.8%降到了1.1%,顯著降低。優(yōu)異的耐堿性能從下圖中可以看到,Ca++Pure-HA在0.5 mol/L的NaOH溶液中具有良好的耐堿性,即使超過65個(gè)CIP循環(huán)后,動(dòng)態(tài)吸附載量也沒有明顯降低。
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- 2021-10-28 16:08:14制氮機(jī)是由哪些填料構(gòu)成
- 制氮機(jī)是一種重要的機(jī)械設(shè)備,要先了解、學(xué)習(xí)可以打開我們的網(wǎng)站,好好體驗(yàn)一下該產(chǎn)品都有哪些重要性,只有自己正確認(rèn)識和了解以后,并且可以深入探究的話,而不是停留在表面上。 1.制氮機(jī)的日常保養(yǎng)工作,復(fù)雜嗎?此外,制氮機(jī)中一個(gè)完整的系統(tǒng),主要是包括了哪些? 制氮機(jī)的日常保養(yǎng)工作,其從專業(yè)角度來講的話,其是不復(fù)雜的,所以,是容易進(jìn)行掌握和操作的。而制氮機(jī)中的系統(tǒng),其在構(gòu)成上,主要是包括了壓縮空氣系統(tǒng)、空氣凈化系統(tǒng)、空氣分離系統(tǒng)這三個(gè),都是很重要的,缺一不可?! ?.制氮機(jī)中的PSA制氮系統(tǒng),其在填料上,主要是有哪些? 制氮機(jī)中,對PSA制氮系統(tǒng)這一個(gè),其在填料上,是有好幾層的。其中的吸附劑,是為碳分子篩,然后,還有活性氧化鋁干燥劑,起到保護(hù)和干燥氣體這兩個(gè)作用。在層數(shù)上,一般是為三層。 3.制氮機(jī)出口氮?dú)饬髁?,是?00 Nm3/h,注入容積是為5萬方的容器,那么,需要多長時(shí)間? 根據(jù)給出的上述具體這些條件,如果想要得出具體答案的話,那么,是要看具體情況了,其中主要的,是為容器壓力。如果容器壓力和氮?dú)獬隹趬毫κ且粯拥脑挘敲?,可以按每小時(shí)算,即可;如果,其壓力不同的話,那么,是要另外計(jì)算了?! ∠嘈艑τ谥频獧C(jī),上述的問題能幫大家對該設(shè)備有了近一步認(rèn)識和了解,在這個(gè)時(shí)候是能增加自己在這一方面的專業(yè)知識。
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