褐藻膠寡糖具有多種生物學(xué)功能，有整腸、降血糖血脂、抗凝血、抗炎、免疫調(diào)節(jié)等作用。

在醫(yī)藥、食品領(lǐng)域，褐藻膠寡糖可作為糖尿病、肥胖癥、直腸結(jié)腸癌、習(xí)慣性便秘患者的療效食品；在飼料領(lǐng)域，褐藻寡糖克服了以往所有抗生素、益生素、酶制劑等的不足，用量少、天然、無(wú)殘留且穩(wěn)定性強(qiáng)，并能提高動(dòng)物機(jī)體的抗病能力，促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)，增加動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)，是優(yōu)良的飼料添加劑。

褐藻膠是由1，4-甘露糖醛酸 (M)和1，4-古羅糖醛酸(G)不規(guī)則鏈接起來(lái)的線性長(zhǎng)鏈分子，采用不同的降解方法（酸降解法，酶降解法，氧化降解法）降解褐藻膠，可以得到聚合度20以下的系列褐藻膠寡糖，由β-D-聚甘露糖醛酸(M)和α-L-聚古羅糖醛酸(G)組成的線型低聚合物，有聚甘露糖醛酸（PM）、聚古羅糖醛酸（PG）和雜合褐藻寡糖（PMG）三種類(lèi)型產(chǎn)品。

褐藻膠寡糖是一種淡黃褐色粉末，能溶于水，穩(wěn)定性強(qiáng)。本實(shí)驗(yàn)中使用具有脈沖安培檢測(cè)器的高效陰離子交換色譜對(duì)褐藻膠寡糖中的甘露糖醛酸單糖和古羅糖醛酸單糖進(jìn)行檢測(cè)。詳情如下：

壹

儀器和設(shè)備

表1 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中所使用的儀器設(shè)備

貳

試劑和材料

除非另有說(shuō)明，所用試劑均為優(yōu)級(jí)純。

水：超純水（18.2MΩ?cm）；

50%氫氧化鈉：色譜純；

無(wú)水乙酸鈉：優(yōu)級(jí)純；

古羅糖醛酸單糖（客戶提供）：2mmol/L；

甘露糖醛酸單糖（客戶提供）：2mmol/L。

叁

樣品的制備

精密稱(chēng)取褐藻膠G段寡糖0.1088g，用超純水溶解稀釋定容到100mL，經(jīng)0.22 μm濾膜過(guò)濾，直接進(jìn)樣分析。

精密稱(chēng)取褐藻膠寡糖0.1049g，用超純水溶解稀釋定容到100mL，經(jīng)0.22 μm濾膜過(guò)濾，直接進(jìn)樣分析。

將古羅糖醛酸單糖標(biāo)準(zhǔn)品（客戶提供）稀釋20倍，直接進(jìn)樣分析。

將甘露糖醛酸單糖標(biāo)準(zhǔn)品（客戶提供）稀釋20倍，直接進(jìn)樣分析。

肆

分析步驟

色譜條件

流動(dòng)相：

溶劑A：超純水；

溶劑B：250mM氫氧化鈉；

溶劑C：250mM氫氧化鈉+500mM乙酸鈉水溶液。

表2 淋洗液梯度變化表

流  速：0.5mL/min；

柱  溫：30℃；

進(jìn)樣量：25μL；

色譜柱：Dionex CarboPac PA20 Analytical色譜柱，150 mm×3mm，配Dionex CarboPac PA20 Guard保護(hù)柱30 mm×3 mm。

電化學(xué)檢測(cè)器參數(shù)

模式：脈沖安培；檢測(cè)頻率：2Hz；反應(yīng)時(shí)長(zhǎng)Ts=200ms；Flexcell金電極。

表3 檢測(cè)器波形設(shè)置

衰減200μA；濾波器0.050Hz

標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖

0.1mmol/L古羅糖醛酸單糖標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖

0.1mmol/L甘露糖醛酸單糖標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖

空白色譜圖

空白試樣的色譜圖

樣品測(cè)定

褐藻膠G段寡糖色譜圖

褐藻膠寡糖色譜圖

伍

結(jié)果與計(jì)算

表4  檢測(cè)結(jié)果（含量%）

備注：①ND表明未檢出或低于檢出限；②測(cè)定值已扣除空白值；③不同方法、不同實(shí)驗(yàn)室間檢測(cè)結(jié)果會(huì)存在差異。

標(biāo)簽：褐藻膠寡糖離子色譜盛瀚