NSAID是一類常用藥物非甾體抗 炎藥的簡稱，曾經(jīng)一藥難求的布洛芬就屬于該類藥物。除了鎮(zhèn)痛、抗 炎和解熱功效外，NSAID還可以預防多種嚴重疾病，包括癌癥和心臟病發(fā)作等。NSAID的結構和功能具有多樣性，但大多數(shù)是弱有機酸，進樣到色譜系統(tǒng)后，由于理化性質，可能會導致樣品損耗、結果差異或峰形不對稱等，對檢測造成影響。針對這些情況，我們必須開發(fā)?種可靠的色譜分析方法。下面就跟隨小編，看看MaxPeak HPS技術能否克服這些影響，改善NSAID的分析結果，實現(xiàn)更快、更準確的檢測。

檢測挑戰(zhàn)

NSAID本?是?種自由基清除劑，是由酸性基團（羧酸、烯醇）和芳香族官能團組成的弱有機酸，當暴露于色譜系統(tǒng)和色譜柱中存在的合金衍生組分時，會表現(xiàn)出分析物與金屬離子絡合的傾向。NSAID/非特異性金屬離?復合物的形成可能會顯著降低色譜靈敏度，導致色譜回收率較低。這?問題有時可通過添加流動相離子對試劑和螯合劑解決，例如添加0.1%三氟乙酸(TFA)以改善色譜峰形，但使用這些試劑會導致系統(tǒng)污染、色譜柱選擇性的不可逆變化、高背景干擾，以及紫外(UV)和液相色譜-質譜(LC-MS)應用中的靈敏度較低。

MaxPeak HPS技術旨在通過盡可能減少對金屬離?敏感的自由基清除化合物的分析物/表面相互作用，提供出色的色譜性能，同時省去使用流動相添加劑或鈍化的需求。本研究通過分析丙酸和乙酸衍生物NSAID，比較MaxPeak HPS技術與傳統(tǒng)色譜系統(tǒng)的色譜性能。

圖1. 本研究使用丙酸和乙酸衍生物結構的NSAID。

材料與方法

• LC系統(tǒng)1：ACQUITY Arc系統(tǒng)，配備四元溶劑管理器(rQSM)、樣品管理器(rFTN)、ACQUITY Arc色譜柱管理器(rCM)、Empower 3色譜軟件

• 色譜柱： XBridge XP, BEH C18, 2.5 μm色譜柱，4.6x150 mm

• LC系統(tǒng)2：Arc Premier系統(tǒng)，配備四元溶劑管理器(rQSM)、Arc Premier樣品管理器(rFTN)、Empower 3色譜軟件

• 色譜柱： XBridge Premier，BEH C18，2.5 μm色譜柱，4.6x150 mm

• 檢測條件： ACQUITY光電二極管陣列檢測器(PDA)在215 nm處檢測布洛芬和酮洛芬，在265 nm處觀察所有其他化合物

• 柱溫： 50 °C

• 樣品溫度： 20 °C

結果與討論

使?樣品稀釋劑分別制備布洛芬、酮洛芬、苯氧苯丙酸、萘普生、雙氯芬酸、氟比洛芬和吲哚美辛（Sigma-Aldrich，美國密蘇?州圣路易斯）的NSAID儲備液，濃度約為0.4 mg/mL。為了避免流動相導致鈍化的潛在影響，我們采用了新的色譜柱。先后用100%異丙醇和HPLC級水徹底沖洗系統(tǒng)。每個系統(tǒng)設置都使用相同的UV檢測器以確保連續(xù)性。

使用MaxPeak HPS技術時，所有NSAID的色譜峰高和峰面積靈敏度均有所提高（圖2、圖3、表1、表2）。使用XBridge Premier色譜柱時，峰高響應增加至1.6倍(38%)，峰面積響應增加至1.7倍(41%)。當Arc Premier系統(tǒng)與XBridge Premier色譜柱搭配使用時，觀察到峰高應增加至高達4.7倍(79%)，峰面積響應增加至高達4.0倍(75%)。

圖2. 使用MaxPeak HPS技術增加色譜峰?積。

表1. 與傳統(tǒng)的ACQUITY Arc系統(tǒng)/XBridge XP色譜柱相比，MaxPeak HPS技術使峰面積增加了數(shù)倍。

圖3．使用MaxPeak HPS技術增加色譜峰高。

表2.與傳統(tǒng)的ACQUITY Arc系統(tǒng)/XBridge XP色譜柱相比，MaxPeak HPS技術使峰高增加了數(shù)倍。

結論

NSAID是具有鎮(zhèn)痛、解熱和抗 炎作用的藥物活性化合物。在NSAID化合物的色譜分析過程中，MaxPeak HPS技術顯?出顯著的峰?和峰?積響應提升效果。此外，與使?傳統(tǒng)色譜系統(tǒng)和色譜柱的分析相比，MaxPeak HPS技術使靈敏度有所提升，因此也能提供更出色的NSAID化合物檢測限。