PCR反應(yīng)污染源的排查 如果PCR反應(yīng)不慎發(fā)生污染，應(yīng)逐一分析排查污染源 一設(shè)立對照組： 每次擴增均應(yīng)設(shè)立PCR體系中各試劑的隨機對照組，即除模板DNA外應(yīng)包含PCR反應(yīng)所需的全部組分若擴增結(jié)果中對照組為陽性，則表明有一種或數(shù)種試劑被污染 排查方法：將PCR反應(yīng)所需各組分試劑分別置于不同的擴增反應(yīng)管進行擴增，結(jié)果陽性的試劑即為被污染試劑 二排查環(huán)境污染源：若排除試劑污染或更換試劑后，仍然發(fā)現(xiàn)污染情況，則考慮可能為環(huán)境污染應(yīng)從以下裝置儀器方面進行排查： (1)模板提取時真空抽干裝置； (2)凝膠電泳加樣器； (3)電泳裝置； (4)紫外分析儀； (5)切膠用刀或手術(shù)刀片； (6)離心機； (7)冰箱門把手，冷凍架，門把手或?qū)嶒炁_面等； (8)氣溶膠； 排查方法： (a)用無菌水浸泡過的滅菌棉簽擦拭可疑污染源 (b)0.1ml去離子水浸泡 (c)取5ml做PCR實驗 (d)電泳檢測結(jié)果 若經(jīng)上述排查仍無法確定污染源，則懷疑污染空氣PCR產(chǎn)物氣溶膠污染造成，則應(yīng)考慮重新設(shè)計新的與原引物無相關(guān)性的引物或可更換實驗場所，以消除污染影響