構(gòu)建攜帶人alpha突觸核蛋白真核重組質(zhì)粒，檢測(cè)其在人神經(jīng)母細(xì)胞瘤SKNSH細(xì)胞中的表達(dá)及對(duì)細(xì)胞存活率的影響方法 PCR擴(kuò)增alpha突觸核蛋白基因，產(chǎn)物純化后與pcDNA3.1(+)載體進(jìn)行連接反應(yīng), 構(gòu)建pcDNA3.1(+)/alpha突觸核蛋白真核重組質(zhì)粒Lipofectamine法轉(zhuǎn)染人神經(jīng)母細(xì)胞瘤SKNSH細(xì)胞，RTPCR方法檢測(cè)SKNSH細(xì)胞中alpha突觸核蛋白mRNA的表達(dá)，四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測(cè)其對(duì)細(xì)胞存活率的影響結(jié)果 酶切鑒定及基因測(cè)序證明人alpha突觸核蛋白基因已被完整正確地插入到pcDNA3.1(+)載體中RTPCR 結(jié)果顯示該表達(dá)載體轉(zhuǎn)染SKNSH細(xì)胞后，細(xì)胞內(nèi)alpha突觸核蛋白mRNA的表達(dá)水平明顯，MTT方法檢測(cè)結(jié)果顯示該表達(dá)載體轉(zhuǎn)染并未引起細(xì)胞存活率的改變結(jié)論 alpha突觸核蛋白真核重組質(zhì)粒構(gòu)建成功, 并可在SKNSH細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，且對(duì)細(xì)胞的存活率不產(chǎn)生任何影響，從而為進(jìn)一步研究alpha突觸核蛋白在帕金森病發(fā)病機(jī)制中的作用奠定了基礎(chǔ)