色譜柱在色譜分析系統(tǒng)中主要起著分離檢測物質(zhì)的作用,如同色譜系統(tǒng)的心臟,同時也是易損耗品由于色譜柱在分離樣品的過程中,色譜柱中固定相對檢測樣品中不同成分的吸附程度不同,使各成分分離,而色譜柱在吸附樣品時,樣品中所含有的鹽脂質(zhì)疏水蛋白質(zhì)和其它一些生物物質(zhì)都有可能與色譜柱發(fā)生相互作用,一些保留值較小的物質(zhì)如鹽類比較容易被沖出色譜柱,而一些保留強的流動相溶液成分不足以把這些物質(zhì)洗脫下來,多次上樣后,這些吸附在柱子表面的物質(zhì)通常就會積累在柱頭當(dāng)這些被吸附的樣品成分累積到一定程度足以使之形成新的固定相而分離機理,以致樣品保留時間會波動,會出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象 GX液相色譜柱的污染的直接表現(xiàn)是色譜峰形變差展寬不對稱拖尾還有柱效下降等,進而影響色譜數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性導(dǎo)致色譜柱不能再繼續(xù)使用的主要原因是長期使用過程中,樣品中強保留物質(zhì)逐漸在色譜柱中積累造成的,情況嚴(yán)重的直接造成色譜柱報廢為延長色譜柱的使用壽命,常用到的方法是色譜柱再生 GX液相色譜柱的再生就是對在正常使用過程中,被嚴(yán)重污染而常規(guī)清洗方法不能有效清除出污染雜質(zhì)的色譜柱進行再處理,從而達(dá)到去除污染物,明顯提高色譜柱各項性能指標(biāo),使之恢復(fù)可繼續(xù)使用狀態(tài)的一系列清洗過程
色譜柱再生方法主要是根據(jù)固定相來選擇,根據(jù)不同固定相選擇的方法如下: 反相柱:分別用甲醇:水=90:10純甲醇二氯甲烷等溶劑著流動相,依次沖洗,每種流動相流經(jīng)色譜柱不少于20倍的色譜柱體積然后再以相反的次序沖洗 正相柱:分別用正己烷異丙醇二氯甲烷甲醇等溶劑做流動相,順次沖洗,每種流動相流經(jīng)色譜柱不少于20倍的柱體積(異丙醇粘度大,可降低流速,避免壓力過高)注意使用溶劑的次序不要顛倒,用甲醇沖洗完后,再以相反的次序沖洗至正己烷所有的流動相必須嚴(yán)格脫水 離子交換柱:長時間在緩沖溶液中使用和進樣,將導(dǎo)致色譜柱離子交換能力下降,用稀酸緩沖溶液沖洗可以使陽離子柱再生,反之,用稀堿緩沖溶液沖洗可以使陰離子柱再生 WondaCract ODS-2液相色譜柱(貨號:8520-39993) WondaCract ODS-2液相色譜柱(貨號:8520-39991) shodex液相碳18色譜柱 大連依利特液相色譜柱C18 Hypersil ODS2 4.6*200*5 大連依利特液相色譜柱C18 Hypersil ODS2 4.6*250*5
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