人促血紅細(xì)胞生成素 (Erythropoietin, EPO) 是zui早用于ZL貧血癥的商業(yè)化糖蛋白之一。與其它生物ZL蛋白一樣，聚集體監(jiān)測(cè)是評(píng)價(jià) EPO 的關(guān)鍵質(zhì)量屬性之一。在歐洲藥典 (European Pharmacopoeia, EP) 10.0版 中，詳細(xì)規(guī)定了使用體積排阻色譜 (Size Exclusion Chromatography, SEC) 結(jié)合峰面積歸一化法分析 EPO 樣品中的二聚體及其它大于主成分分子量的有關(guān)蛋白比例的方法。

相比之前的 EP 版本，10.0 版對(duì) EPO 的體積排阻色譜方法所作的主要修訂在于使用粒徑較小且柱長(zhǎng)較短的色譜柱。這樣在保證分離度的前提下，大幅度縮短了分析所用的時(shí)間。Agilent AdvanceBio SEC 色譜柱采用新一代填料修飾工藝，能夠更有效yi制 SEC 分析中可能存在的非特異性相互作用。其填料粒徑為 2.7 μm，工作壓力適中，同時(shí)可提供更高的塔板數(shù)與分離度。

本研究使用 Agilent AdvanceBio SEC 色譜柱并結(jié)合 EP 方法流動(dòng)相和色譜條件，對(duì) EPO 樣品進(jìn)行體積排阻分析。結(jié)果完全滿足歐洲藥典 EP 10.0 版中有關(guān)系統(tǒng)適應(yīng)性的要求，表明該方法適用于 EPO 的生產(chǎn)過程質(zhì)量控制以及其它相關(guān)的研究工作。