天然產(chǎn)物的分離與純化
天然產(chǎn)物中的成分復(fù)雜,有的達(dá)到幾十種甚至上百種,因此對(duì)其化學(xué)成分的分離純化一直以來就是一項(xiàng)很艱巨的工作。可是由于傳統(tǒng)的方法不僅步驟繁瑣,有機(jī)溶劑也消耗過大,而且Z終的產(chǎn)率及純度都很低,所以需要采用一種新型的分離與純化方法,GX液相色譜法(HPLC)正可以解決這一問題。并且據(jù)統(tǒng)計(jì),80%的天然藥物宜采用GX液相色譜分析。
HPLC分離純化生物堿類化合物
生物堿是生物體內(nèi)一類除蛋白質(zhì)、肽類、氨基酸及維生素B 以外的含氮有機(jī)化合物,它們結(jié)構(gòu)復(fù)雜且大多有顯著的生物活性或毒性,是中草藥重要的有效成分。
在生物堿分離制備中,反相制備是制備型GX液相色譜應(yīng)用Z普遍的方法。根據(jù)樣品的不同其流動(dòng)相有很大差異,目前紫杉醇的制備是GX液相中比較成熟的應(yīng)用。
HPLC分離純化生物黃酮類化合物
黃酮類化合物是由兩個(gè)苯環(huán)通過三碳鏈相互連接而成的,具有C6–C3–C6 15個(gè)碳原子基本骨架的一類物質(zhì),其廣泛分布于各種YY植物中,尤其是花、葉部位,約20%的中草藥中都含有黃酮類化合物,資源豐富。目前已知的具有生物活性的黃酮類化合物有很多,其活性主要包括抗心血管疾病、抗腫瘤、抗氧化、抗病毒等。
結(jié)合制備型GX液相色譜儀進(jìn)行純化羅布麻花的總黃酮提取物,通過優(yōu)化流速、樣品進(jìn)樣量、洗脫梯度的變化,一次可從羅布麻花中制備分離得到9個(gè)黃酮類化合物,純度均超過90%。該分離技術(shù)給天然產(chǎn)物黃酮類的分離、純化提供了一種直接有效的方法。
HPLC分離純化生物萜類化合物
萜類化合物是由異戊二烯或異戊烷以各種方式連接而成的天然化合物,具有祛痰、ZK、鎮(zhèn)痛等生理活性。
利用GX液相色譜儀從莢果蕨中分離出9 種高純度的倍半萜類單體化合物,利用GX液相色譜儀,分別對(duì)豆莢軟珊瑚中二萜類成分進(jìn)行研究,制備得到6 種半萜類化合物,這些研究都發(fā)展了分離純化生物萜類化合物的分離方法,豐富了萜類化合物的化學(xué)成分。
HPLC分離純化生物甾體化合物
甾體類化合物是基本母核為環(huán)戊稠多氫化菲的一類天然化合物,其在維持生命、調(diào)節(jié)性功能、ZL皮膚疾病及控制生育等方面具有重要的生理、藥理作用。
利用半制備GX液相色譜儀、硅膠柱色譜和色譜柱,對(duì)緋紅南五味子莖的化學(xué)成分進(jìn)行研究,可以分離制備出10個(gè)甾體化合物。
HPLC分離純化其它類型天然產(chǎn)物
皂苷是苷元為三萜或螺旋甾烷類化合物的一類結(jié)構(gòu)復(fù)雜的苷類化合物,一些皂苷類成分有明顯的藥理作用。
GX液相色譜法能直接對(duì)刺身中各皂苷成分進(jìn)行快速分析,能克服由于皂苷類物質(zhì)分子內(nèi)有寡糖鏈存在、結(jié)構(gòu)復(fù)雜且極性大、難揮發(fā)、含量低、沒有紫外吸收等特點(diǎn)造成的分析鑒別困難。
其他比如香豆素、木脂素、蒽醌類化合物也都可以利用半制備GX液相色譜分離得到純化。
總結(jié)
從植物、動(dòng)物、微生物等天然材料中發(fā)現(xiàn)結(jié)構(gòu)新穎且具有藥理活性的天然產(chǎn)物并進(jìn)一步開發(fā)成新藥,是人類預(yù)防和ZL疾病的重要渠道,也是國際天然產(chǎn)物領(lǐng)域關(guān)注的研究方向。天然物的組分非常復(fù)雜,如中草藥中各組分含量多少對(duì)藥劑作用影響很大。采用GX、高分辨、多功能的分離技術(shù)是開展天然產(chǎn)物研究的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一。近十幾年來,制備型GX液相色譜法(HPLC)是天然產(chǎn)物化學(xué)研究中應(yīng)用Z普遍、Z有效和相關(guān)技術(shù)發(fā)展Z快的分離純化方法,在藥物研究領(lǐng)域具有不可替代的地位。
展望
采用HPLC不僅能從天然產(chǎn)物中分離得到高純度的化合物單體,而且產(chǎn)率高,速度快,操作簡便,便于收集。但是由于天然產(chǎn)物種類豐富,用HPLC進(jìn)行提取分離在條件或工藝上還有很多需要摸索和改進(jìn)。由于天然產(chǎn)物分離純化的核心目標(biāo)是從天然生物資源中獲取具有生物功能或活性的天然產(chǎn)物,因此建立GX液相色譜分離純化天然產(chǎn)物的技術(shù)集成和樣品庫,是今后利用GX液相色譜分離純化研究的發(fā)展趨勢(shì)。作為一種GX的分離純化技術(shù),HPLC在天然產(chǎn)物分離中具有很廣闊的發(fā)展與應(yīng)用前景。
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