在自然界中，微生物混雜在一起，如果想要得到所需要的菌種，必須從中分離出它們。在保存菌種時如果菌種不小心受到污染，也需要對菌種進行分純。微生物有很多不同分離和純化的方法，可是它們的卻有著相似的基本原理，就是一定地稀釋待分離的樣品，并且盡量分散微生物的細胞(或孢子），然后讓它們長成一個個純種單菌落。但是上述工作又必須要接種，就是把一種微生物移到另一滅過菌的培養(yǎng)基上的過程。下面就讓小編介紹一下微生物的分離方法。 

平板劃線分離法

在平板培養(yǎng)基表面，接種環(huán)通過分區(qū)劃線從而達到微生物分離的一種方法被稱為平板劃線分離法。平板劃線分離法的原理是在固體培養(yǎng)基表面把微生物樣品多次作“由點到線”稀釋而達到分離的目的。

1.把溶化牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基倒在平板上，水平靜放等待凝固。

2.將接種環(huán)用酒精燈光焰灼燒，冷卻后吸取接種環(huán)金黃葡萄球菌、大腸桿菌混合菌液。

3.左手握瓊脂平板稍抬皿蓋，同時靠近火焰，右手將接種環(huán)伸入皿內(nèi)，在平板上一個區(qū)域作Z形回劃線，劃線時使接種環(huán)與平板表面成30-40°角度輕輕接觸，在平板表面輕輕地滑動，不要劃破平板表面或者滑進增基內(nèi)。

4.將接種環(huán)灼燒，從而把接種環(huán)上尚殘留的菌液殺滅，等冷卻后，將接種環(huán)伸入皿中，在diyi區(qū)域劃過線的地方輕輕接觸一下后，轉動90°，在第二區(qū)域繼續(xù)劃線。

5.劃線完成后再將接種環(huán)灼燒，冷卻后用相同方法在其他區(qū)域劃線。

6.完成全部劃線后，在平皿底用特種蠟筆注明菌種、日期、組別、姓名。將整個培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

7.在溫度37℃下經(jīng)過24-48小時培養(yǎng)后取出觀察。觀察菌落的開關、大小、顏色、邊緣、表面結構、透明度等性狀。

稀釋分離法

經(jīng)過連續(xù)地稀釋讓被分離的樣品達到Zdi限度的分散。之后吸取一定量的樣品注入平板和溫度適合溶化了的瓊脂培養(yǎng)基混合，如此，分散的細菌就會在原處被固定從而形成單菌落。

1.用無菌水將大腸桿菌或酵母菌制作成菌懸液。

2.取若干無菌試管，在每只無菌試管內(nèi)盛放9ml無菌水。

3.吸取1ml制備好的菌懸液，放到diyi支含有9ml無菌水的試管內(nèi)，這樣就稀釋了10倍

4.從diyi支試管內(nèi)吸取1ml注入第二支含有無菌水的試管內(nèi)，這樣就稀釋了100倍

5.如此這般一直稀釋到兩個合適的稀釋度。

6.分別精確吸取兩個合適的稀釋度0.2ml加入編好號的空無菌平皿中，同一稀釋度重復做三個平皿。

7.向上述各平皿內(nèi)倒入已溶化并冷卻至45℃的瓊脂培養(yǎng)基，輕輕旋轉充分混勻培養(yǎng)基與菌懸液，凝固后倒置于37℃或38℃度恒溫箱中培養(yǎng)24-48小時，觀察平板上菌落生長和分布情況。