本文由 上海希美化學(xué)有限公司 整理匯編

2012-02-08 00:00 720閱讀次數(shù)

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  2024-09-29 08:02

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  急性白血病MDR1與分化抗原關(guān)系及其臨床意義[詳細(xì)]

  2013-08-21 00:00

  產(chǎn)品樣冊

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• ELISA法在梅毒檢測中的臨床意義

  梅毒是一種性傳播疾病,近幾年來在我國的發(fā)病率呈明顯的上升趨勢。當(dāng)前我國實(shí)驗(yàn)室診斷梅毒常用TRUST或快速血漿反應(yīng)素試驗(yàn)（RPR）篩選后再用TPPA或螺旋體血球凝集試驗(yàn)（TPHA）等確證。前類試驗(yàn)有較高的生物學(xué)假陰性和假陽性，后類試驗(yàn)則成本高、不能自動化、結(jié)果判斷受主觀影響。重組抗原ELISA是近年發(fā)展檢測梅毒的方法，具有敏感性高、特異性好、自動化程度高、易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)，本實(shí)驗(yàn)研究應(yīng)用其對臨床檢測進(jìn)行評價(jià)，現(xiàn)報(bào)告如下。1材料和方法　　1.1.1臨床標(biāo)本均來自廣東惠州市ZX人民醫(yī)院，包括性病門診124例梅毒血清，其中24例為一期梅毒、28例為早期潛伏梅毒、72例為二期梅毒，各期梅毒的診斷按標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行［2］。59例門診病人（其中19例類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、40例慢性乙型肝炎），172例獻(xiàn)血員血清由血站提供。1.1.2試劑TRUST試劑盒（上海諾泰ZG生物技術(shù)有限公司）；TPPA試劑盒（美國諾泰生物技術(shù)有限公司）；重組抗原ELISA試劑盒（雙抗原夾心）（上海伊麗薩生物科技有限公司）。1.1.3方法所有血清TRUST試劑盒、重組抗原ELISA試劑盒、TPPA試劑盒。試劑盒操作均在有效期之內(nèi)，嚴(yán)格按說明書進(jìn)行。TRUST和TPPA目測觀察結(jié)果；ELISA結(jié)果用酶標(biāo)儀測光密度（OD值），以cutoff值為界判斷結(jié)果。2結(jié)果　　3種血清學(xué)方法檢測355份血清白標(biāo)本的結(jié)果得知，ELISA和TPPA均為陽性的24例一期梅毒和28例早期潛伏梅毒中，TRUST分別為4例和3例陰性，而ELISA和TPPA均為陰性的類風(fēng)濕患者的TRUST有4例為假陽性。TRUST和ELISA的敏感性、特異性分為92.7%（115/124）、98.3%（227/231）和1**%（124/124）、99.1%（229/231）。TRUST與TPPA的符合率為96.3%（342/355）。ELISA與TPPA的符合率為99.4%（353/355）。3討論梅毒（Syphilis）是由蒼白螺旋體（TreponemaPallidum,TP）所引起的一種嚴(yán)重危害人類健康的性傳播疾病，近年來在我國有逐年上升趨勢。選擇好的檢測方法，可以有效的盡快對梅毒進(jìn)行ZL和預(yù)防。在我國當(dāng)前大多數(shù)單位仍然采用檢測非特異性抗體（如TRUST、RPR）作為梅毒初篩，陽性者再用檢測特異性抗體（如TPPA、TPHA）作確診。非特異性的檢測試劑成本低、操作簡便，結(jié)果易讀，常用于梅毒的初篩，但其檢測的是非特異性的抗心磷脂抗體，易受許多因素的影響，對于其他一些非梅毒者如紅斑狼瘡、類風(fēng)濕自身免疫性疾病、孕婦等易產(chǎn)生生物學(xué)假陽性，及人工假陽性［1］，特異性低。在本研究中，有4例TRUST為陽性的標(biāo)本經(jīng)TPPA確定為假陽性；此外，抗心磷脂抗體在梅毒的非活動期和ZL后易消失，對隱性梅毒早期或晚期梅毒和ZL后梅毒的敏感性低［2］，造成假陰性而漏診，本研究中一期、隱性梅毒共有8例TRUST陰性而TPPA為陽性，表明單靠檢測非特異性抗體來篩查梅毒易造成漏檢，給健康人群帶來潛在的危害，應(yīng)引起檢測單位的足夠重視。TPPA采用梅毒螺旋體天然抗原作為診斷抗原，有很高的特異性，采用間接凝集反應(yīng)的原理，敏感性高，作為確證試驗(yàn)在世界許多國家被廣泛使用，但梅毒螺旋體至今不能體外人工培養(yǎng)，抗原來源困難，因而TPPA試劑盒成本高，此外，TPPA測定包括多次吸液過程，會造成操作者出錯的風(fēng)險(xiǎn)［3］，還有該方法結(jié)果都依賴于操作者肉眼來判斷和解釋，結(jié)果不易保存。并且，先初篩再進(jìn)行確診操作煩瑣。近年來，隨著梅毒螺旋體全基因序列的解析，通過基因工程途徑生產(chǎn)重組蛋白抗原或多肽作為抗原，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）將TP重組抗原包被在微孔測定板上，使試劑盒成本大大降低，重組抗原特異性高、純度高，多種重組抗原聯(lián)合使用可得到更高的敏感性和特異性，結(jié)合ELISA雙抗原夾心法，使重組抗原雙抗體夾心法ELISA試劑盒具有高度特異、靈敏、能自動化、標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)，尤其適用于大樣本的測定。本實(shí)驗(yàn)中，在總共355份標(biāo)本中，ELISA假陽性僅2份，無漏檢，以TPPA結(jié)果為參照，ELISA的敏感性、特異性為1**%、99.1%，表明ELISA與TPPA有良好的相關(guān)性；而TRUST的敏感性、特異性為92.7%、98.3%，ELISA敏感性和特異性均高于TRUST。國內(nèi)外的研究也表明，梅毒-ELISA是目前檢測梅毒的一種良好方法?！　】傊?，雙抗原夾心ELISA法具有敏感性高，特異性好，能自動化，判斷結(jié)果客觀準(zhǔn)確，成本低，操作簡便等優(yōu)點(diǎn)，是一種集篩查和確診為一體的檢測梅毒的好方法，應(yīng)該在臨床檢測方面進(jìn)行推廣，普遍使用?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】　　［1］葉應(yīng)撫.全國臨床檢測操作規(guī)程［M］.第2版.南京：東南大學(xué)出版社，1997,432.　　［2］楊文林，楊健，劉丹瑩,等.早期梅毒ZL前后血清學(xué)分析［J］.臨床皮膚科雜志，1998，27（5）：314.［3］龔匡隆.梅毒血清學(xué)試驗(yàn)的內(nèi)部質(zhì)量控制［J］.ZG皮膚性病學(xué)雜志，1997，11（1）：31.閱讀延伸：ELISA法與TRUST法在梅毒檢測中的比較梅毒是一種廣泛流行的性病，近年來在ZG發(fā)病率又有所回升。梅毒螺旋體（TreponemaPallidun）是梅毒的病原體，因其透明，不易著色，故又稱蒼白螺旋體。檢測梅毒螺旋體的方法有快速血漿反應(yīng)素卡片試驗(yàn)（RPR）和甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)（TRUST）。RPR法和TRUST法為非特異性血清試驗(yàn)，敏感性及特異性較差，肉眼判斷結(jié)果易受檢測者的主觀性影響，易出現(xiàn)漏檢和誤判。下面采用梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫試驗(yàn)（TP-ELISA）與TRUST法進(jìn)行比較，實(shí)驗(yàn)過程和結(jié)果報(bào)告如下[詳細(xì)]

  2018-09-27 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• mTOR和eIF4E蛋白在大腸癌組織中的表達(dá)及臨床意義

  mTOR和eIF4E蛋白在大腸癌組織中的表達(dá)及臨床意義[詳細(xì)]

  2013-11-02 00:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 微循環(huán)監(jiān)測在膿毒癥休克患者中的應(yīng)用及進(jìn)展

  休克是臨床上常見的綜合征，按照病理生理學(xué) 改變主要分為 4 種類型，包括心源性休克、低血容量 性休克、梗阻性休克和分布性休克 。各種類型休克 的核心均為微循環(huán)灌注不足，造成組織氧供和氧交換受到影響，導(dǎo)致組織細(xì)胞缺氧，引起組織器官功能 障礙 。休克類型中的分布性休克 ( 如膿毒癥休克)Z為復(fù)雜 。臨床上常見的膿毒癥休克患者的心排出 量可以正常甚至高于正常，周圍血管阻力也可能正 常，然而微循環(huán)卻表現(xiàn)出顯著的灌注不足或者分流， Z終導(dǎo)致細(xì)胞缺氧 。此時(shí)，體循環(huán)監(jiān)測指標(biāo)如中心 靜脈壓、平均動脈壓、心排出量等已不能全面、真實(shí) 地反映患者的循環(huán)狀態(tài)，需結(jié)合微循環(huán)的監(jiān)測指標(biāo)加以判斷 。[詳細(xì)]

  2024-09-12 18:29

  應(yīng)用文章

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• 大鼠白介素-8（IL-8）ELISA試劑盒

  電話：021-6533363955229872網(wǎng)址：http://www.westang.com大鼠白介素-8（IL-8）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠IL-8單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的IL-8與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗大鼠IL-8，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液硫酸，在450nm處測OD值，IL-8濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中IL-8濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：40ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時(shí)；更長時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。血清、血漿至少作1：2稀釋（取50ul，加標(biāo)本稀釋液50ul,稀釋2倍）。細(xì)胞上清至少10倍稀釋。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入2ml蒸餾水混勻，配成20ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，**管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)IL-8含量，再乘上稀釋倍數(shù)。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的IL-8檢測濃度小于16pg/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測重組或天然的大鼠IL-8。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于12％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔，每次測定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:00

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• 胃蛋白酶的臨床意義說明

  胃蛋白酶為白色或淡黃色的粉末；無霉敗臭；有引濕性；水溶液顯酸性反應(yīng)。胃蛋白酶的臨床意義如下：胃蛋白酶原由胃底主細(xì)胞分泌，在pH1.5～5.0條件下，被活化成胃蛋白酶，將蛋白質(zhì)分解為胨，而且一部分被分解為酪氨酸、苯丙氨酸等氨基酸。胃液胃蛋白酶測定可用于鑒別神經(jīng)性低酸癥和胃性低酸癥，當(dāng)胃酸過少或缺乏時(shí)，前者胃蛋白酶的含量有時(shí)正常而后者鹽酸與胃蛋白酶同時(shí)缺乏。一般認(rèn)為胃性低酸癥是由于胃粘膜的重癥器質(zhì)性變化所致，特別是對于惡性貧血、無酸癥、無胃蛋白酶分泌是診斷上的重要所見。慢性胃炎、慢性胃擴(kuò)張、慢性十二脂腸炎等胃蛋白酶的分泌常減少。一般胃酸基礎(chǔ)分泌高的疾患，如十二指腸潰瘍等，胃蛋白酶活性。正常值：基礎(chǔ)胃液胃蛋白酶分泌量為84.4±9.72mg酪氨酸/h，Z高胃蛋白酶分泌量為190.29±15.31酪氨酸/h（Anson氏法）；420±208kU/L（改良李氏法）。胃蛋白酶的作用方法：胃蛋白酶應(yīng)保存在低溫環(huán)境中（－20℃至－80℃），以防止其發(fā)生自降解。儲存于pH值大于11的溶液中或?qū)ζ溥M(jìn)行還原性甲基化也可以有效防止自降解的發(fā)生；當(dāng)pH值回到6時(shí)，胃蛋白酶的活性即可恢復(fù)。胃內(nèi)的消化主要是對蛋白質(zhì)初步分解，胃蛋白酶具有分解蛋白質(zhì)的作用，但從主細(xì)胞分泌出的胃蛋白酶是以無活性的酶原存在，必須依據(jù)胃酸激活并提供作用環(huán)境，因此鹽酸激活胃蛋白質(zhì)酶原、提供胃蛋白酶作用的酸性環(huán)境，是其助消化功能.胃蛋白酶原由胃底主細(xì)胞分泌，在pH1.5～5.0條件下，被活化成胃蛋白酶，將蛋白質(zhì)分解為胨，而且一部分被分解為酪氨酸、苯丙氨酸等氨基酸。[詳細(xì)]

  2018-09-28 10:00

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• 淋巴細(xì)胞毒自身抗體的檢測方法及臨床意義

  上海金穗生物公司是一家專業(yè)經(jīng)營生物試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、試劑耗材的公司，生物引擎在廣大用戶的幫助和支持下，經(jīng)過不懈的努力，已成為國內(nèi)生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的主要供應(yīng)商之一，主要經(jīng)營ELISA試劑盒、細(xì)胞、血清、抗體、金標(biāo)試劑盒、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗等產(chǎn)品，產(chǎn)品暢銷國內(nèi)大部分地區(qū)，銷售額逐年穩(wěn)步提高。上海金穗生物公司擁有雄厚的實(shí)力、合理的價(jià)格和優(yōu)良的服務(wù)，能夠及時(shí)解決和滿足客戶的各方面的需求，公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國，在同行獲得一致好評。www.shjsbio.com[詳細(xì)]

  2018-10-08 10:00

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• 小鼠ELISA試劑盒白介素8酶免的說明書

  小鼠ELISA試劑盒操作較繁雜，操作不當(dāng)將引起較大的誤差。豬白介素8酶免試劑盒，（IL-8/CXCL8）ELISA檢測試劑盒在操作中應(yīng)注意以下5個(gè)方面。1．隨著病情的進(jìn)展或由其他因素影響，某些抗體在機(jī)體內(nèi)的含量發(fā)生大幅波動，因此有必要對標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理，例如對血清標(biāo)本作適當(dāng)稀釋，或離心分離血脂等。間接法測定中，標(biāo)本適當(dāng)稀釋還可降低非特異性反應(yīng)。2．加樣一般使用加液器，在ELISA中一般有4次加樣：加標(biāo)本、加酶結(jié)合物、加底物和加終止液。加標(biāo)本時(shí)必須每份標(biāo)本使用一支移液器吸嘴，以免交叉污染。加酶結(jié)合物、底物和終止液時(shí)則不需更換吸嘴。3．在成批手工檢測中，還應(yīng)注意操作時(shí)差的影響。加樣及混勻時(shí)間的差異，使抗原抗體反應(yīng)和酶促反應(yīng)時(shí)間不一致，對競爭法及定量檢測影響很大，不注意可能會導(dǎo)致錯誤結(jié)果或定量不準(zhǔn)。4．洗滌是ELISA操作過程中決定實(shí)驗(yàn)成敗的一個(gè)關(guān)鍵步驟。目的是除去未結(jié)合的免疫反應(yīng)物，終止抗原抗體反應(yīng)，除去標(biāo)本中與反應(yīng)無關(guān)的成分、游離的酶標(biāo)物以及反應(yīng)過程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)。可用洗板機(jī)洗板或手工洗板，前者洗滌質(zhì)量較好，各反應(yīng)孔洗滌效果均一，批內(nèi)、批間差異小，手工洗板應(yīng)注意控制各孔洗滌效果，差異不宜太大。小鼠ELISA試劑盒5．準(zhǔn)確判定結(jié)果須使用ELISA測讀儀（酶標(biāo)儀），比色法判讀可選擇單波長或雙波長，根據(jù)反應(yīng)液顏色的不同選用不同波長的濾光片，以空白孔校零測定反應(yīng)孔的吸光度值（A值）。酶標(biāo)儀具有良好的重復(fù)性轉(zhuǎn)基因油菜（canola）MS8品系基因檢測試劑盒Y8108920次轉(zhuǎn)基因油菜（canola）RF3品系基因檢測試劑盒Y8109020次[詳細(xì)]

  2018-09-19 10:00

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• OCTA與皮膚傷口愈合——OCTA監(jiān)測急性創(chuàng)傷及愈合過程中的結(jié)構(gòu)和脈管系統(tǒng)變化

  在臨床、醫(yī)學(xué)和皮膚病學(xué)研究中，對皮膚血管和結(jié)構(gòu)特征檢查是必不可少的程序，然而目前還沒有比較合適的非侵入式成像工具能夠清晰準(zhǔn)確地評估皮膚的血管和結(jié)構(gòu)特征。華盛頓大學(xué)的Wendy Wang等人使用光學(xué)相干斷層掃描血管造影術(shù)(OCTA)，對急性創(chuàng)傷及愈合過程中的組織結(jié)構(gòu)和脈管系統(tǒng)進(jìn)行了深度達(dá)1.2 mm的成像和分析，測量了不同深度的血管密度和直徑等關(guān)鍵血管參數(shù)。觀察發(fā)現(xiàn)皮膚脈管系統(tǒng)的改變與主動愈合有關(guān)，淺血管的第一反應(yīng)是直徑增加，而深血管的第一反應(yīng)是密度增加。此外，與較深的血管相比，淺血管似乎會更早恢復(fù)正常。該研究成果為表征皮膚的血管結(jié)構(gòu)特征提供了可靠依據(jù)，并以“Optical Coherence Tomography Angiography and Cutaneous Wound Healing”為題發(fā)布于SPIE. Photonics West BIOS, 2018會議期刊。[詳細(xì)]

  2022-05-24 15:12

  應(yīng)用文章

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• ECM 8介紹及在電化學(xué)研究領(lǐng)域的應(yīng)用

  ECM 8介紹及在電化學(xué)研究領(lǐng)域的應(yīng)用[詳細(xì)]

  2024-09-22 21:24

  專利

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• 小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒

  小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-09 00:00

  操作手冊

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• 人白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒

  人白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-05 00:00

  應(yīng)用文章

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• 人白介素-8（IL-8）ELISA試劑盒說明書

  人白介素-8（IL-8）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人IL-8單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的IL-8與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人IL-8，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液，在450nm處測OD值，IL-8濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中IL-8濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：160ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時(shí)；更長時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入2ml蒸餾水混勻，配成80ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，**管加標(biāo)本稀釋液975ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入80ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液25ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)IL-8含量。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的IL-8檢測濃度小于15pg/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測重組或天然的人IL-8。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10.2％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔，每次測定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:01

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