資料庫
淋巴細胞毒自身抗體的檢測方法及臨床意義
-
本文由 上海金穗生物科技有限公司 整理匯編
2018-10-08 10:00 254閱讀次數
文檔僅可預覽首頁內容,請下載后查看全文信息!
-
立即下載
上海金穗生物公司是一家專業(yè)經營生物試劑、標準品、試劑耗材的公司,生物引擎在廣大用戶的幫助和支持下,經過不懈的努力,已成為國內生命科學領域產品的主要供應商之一,主要經營ELISA試劑盒、細胞、血清、抗體、金標試劑盒、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗等產品,產品暢銷國內大部分地區(qū),銷售額逐年穩(wěn)步提高。上海金穗生物公司擁有雄厚的實力、合理的價格和優(yōu)良的服務,能夠及時解決和滿足客戶的各方面的需求,公司的服務和業(yè)務網絡遍及全國,在同行獲得一致好評。www.shjsbio.com
登錄或新用戶注冊
請用手機微信掃描下方二維碼
快速登錄或注冊新賬號
微信掃碼,手機電腦聯動
更多資料
-
淋巴細胞毒自身抗體的檢測方法及臨床意義
- 上海金穗生物公司是一家專業(yè)經營生物試劑、標準品、試劑耗材的公司,生物引擎在廣大用戶的幫助和支持下,經過不懈的努力,已成為國內生命科學領域產品的主要供應商之一,主要經營ELISA試劑盒、細胞、血清、抗體、金標試劑盒、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗等產品,產品暢銷國內大部分地區(qū),銷售額逐年穩(wěn)步提高。上海金穗生物公司擁有雄厚的實力、合理的價格和優(yōu)良的服務,能夠及時解決和滿足客戶的各方面的需求,公司的服務和業(yè)務網絡遍及全國,在同行獲得一致好評。www.shjsbio.com[詳細]
-
2018-10-08 10:00
產品樣冊
-
淋巴細胞毒自身抗原
- 上海金穗生物公司是一家專業(yè)經營生物試劑、標準品、試劑耗材的公司,生物引擎在廣大用戶的幫助和支持下,經過不懈的努力,已成為國內生命科學領域產品的主要供應商之一,主要經營ELISA試劑盒、細胞、血清、抗體、金標試劑盒、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗等產品,產品暢銷國內大部分地區(qū),銷售額逐年穩(wěn)步提高。上海金穗生物公司擁有雄厚的實力、合理的價格和優(yōu)良的服務,能夠及時解決和滿足客戶的各方面的需求,公司的服務和業(yè)務網絡遍及全國,在同行獲得一致好評。www.shjsbio.com[詳細]
-
2018-10-08 10:00
產品樣冊
-
人抗淋巴細胞毒抗體(ALA/LCA)檢測試劑盒
- 人抗淋巴細胞毒抗體(ALA/LCA)檢測試劑盒[詳細]
-
2024-09-28 01:18
其它
-
人抗淋巴細胞毒抗體ELISA試劑盒
- 本試劑盒采用雙抗原夾心酶聯免疫法ELISA試劑盒測定標本中人抗淋巴細胞毒抗體。用純化的人抗淋巴細胞抗原包被微孔板,制成固相抗原,可與樣品中人抗淋巴細胞毒相結合,經洗滌除去未結合的抗體和其他成分后再與HRP標記的人抗淋巴細胞毒抗原結合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標本中人抗淋巴細胞毒抗體的存在與否。人抗淋巴細胞毒抗體ELISA試劑盒樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。2.血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。人抗淋巴細胞毒抗體ELISA試劑盒抗淋巴操作步驟:編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。人抗淋巴細胞毒抗體ELISA試劑盒結果判定:試驗有效性:陽性對照孔平均值≥1.00;陰性對照平均值≤0.10臨界值(CUTOFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15陰性判定:樣品OD值<臨界值(CUTOFF)者為人軍團菌抗體IgG(LPAb-IgG)陰性陽性判定:樣品OD值≥臨界值(CUTOFF)者為人軍團菌抗體IgG(LPAb-IgG)陽性注意事項1.操作嚴格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用。2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。3.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。5.底物請避光保存。6.試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準,使用雙波長檢測時,參考波長為630nm7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為2M的硫酸,使用時必須注意安全。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
-
2018-09-14 10:00
產品樣冊
-
抗橋粒自身抗體自身抗原
- 上海金穗生物公司是一家專業(yè)經營生物試劑、標準品、試劑耗材的公司,生物引擎在廣大用戶的幫助和支持下,經過不懈的努力,已成為國內生命科學領域產品的主要供應商之一,主要經營ELISA試劑盒、細胞、血清、抗體、金標試劑盒、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗等產品,產品暢銷國內大部分地區(qū),銷售額逐年穩(wěn)步提高。上海金穗生物公司擁有雄厚的實力、合理的價格和優(yōu)良的服務,能夠及時解決和滿足客戶的各方面的需求,公司的服務和業(yè)務網絡遍及全國,在同行獲得一致好評。www.shjsbio.com[詳細]
-
2018-10-08 10:00
產品樣冊
-
小鼠胰島素自身抗體(IAA)檢測試劑盒
- 小鼠胰島素自身抗體(IAA)檢測試劑盒[詳細]
-
2015-07-24 00:00
期刊論文
-
現貨供應小鼠胰島素自身抗體ELISA 檢測試劑盒
- 小鼠胰島素自身抗體ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標本:血清或血漿試驗原理:IAA試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知IAA濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將IAA和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中IAA的濃度呈比例關系。自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。小鼠胰島素自身抗體ELISA檢測試劑盒安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7.底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。小鼠胰島素自身抗體ELISA檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液5、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到極ng確的結果。小鼠胰島素自身抗體ELISA檢測試劑盒試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應。3.重復性:板內、板間變異系數均小于10%。結果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的IAA標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的IAA含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍:0-80mIU/ml4、敏感度:0.1mIU/mlMBS3-馬來酰亞胺基苯甲酸-N-羥基琥珀酰亞胺酯[58626-38-3]50mgMebendazole甲苯咪唑[31431-39-7]50gMechlorethaminehydrochloride鹽酸氮芥[55-86-7]10gMega-10葵?;?N-甲基葡萄糖胺[85261-20-7]1gMega-10葵?;?N-甲基葡萄糖胺[85261-20-7]5gMelatonin褪黑素[73-31-4]5gMelatonin褪黑素[73-31-4]25gMelezitosemonohydrate松三糖單水[10030-67-8]5gMelezitosehydrate松三糖[207511-10-2]5gMelibiose蜜二糖[585-99-9]5gMemantinehydrochloride鹽酸美金剛胺[41100-52-1]25gMercaptoaceticacid巰代乙醇酸[68-11-1]100ml2-Mercaptobenzothiazole2-巰基苯并噻唑[149-30-4]25g6-Mercaptopurine6-巰基嘌呤[6112-76-1]5gMerthiolate,sodiumsalt硫柳汞鈉鹽[54-64-8]25gMES,freeacid,monohydrate2-(N-嗎啉代)乙烷磺酸一水[145224-94-8]25gMES,freeacid,monohydrate2-(N-嗎啉代)乙烷磺酸一水[145224-94-8]100gMES,freeacid,monohydrate2-(N-嗎啉代)乙烷磺酸一水[145224-94-8]500gMES,freeacid,monohydrate2-(N-嗎啉代)乙烷磺酸一水[145224-94-8]25g[詳細]
-
2018-09-27 10:00
產品樣冊
-
人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)檢測試劑盒
- 人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)檢測試劑盒[詳細]
-
2024-09-20 13:34
專利
-
抗網硬蛋白抗體自身抗體
- 上海金穗生物公司是一家專業(yè)經營生物試劑、標準品、試劑耗材的公司,生物引擎在廣大用戶的幫助和支持下,經過不懈的努力,已成為國內生命科學領域產品的主要供應商之一,主要經營ELISA試劑盒、細胞、血清、抗體、金標試劑盒、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗等產品,產品暢銷國內大部分地區(qū),銷售額逐年穩(wěn)步提高。上海金穗生物公司擁有雄厚的實力、合理的價格和優(yōu)良的服務,能夠及時解決和滿足客戶的各方面的需求,公司的服務和業(yè)務網絡遍及全國,在同行獲得一致好評。www.shjsbio.com[詳細]
-
2018-10-08 10:00
產品樣冊
-
尿碘檢測的臨床意義
- 尿碘檢測的臨床意義[詳細]
-
2024-09-10 23:13
應用文章
-
尿碘檢測的臨床意義
- 尿碘檢測的臨床意義[詳細]
-
2024-09-29 02:22
報價單
-
了解自身抗體功能很重要
- 了解自身抗體功能很重要抗體的主要功能是與抗原(包括外來的和自身的)相結合,從而有效地清除侵入機體內的微生物、寄生蟲等異物,中和它們所釋放的毒素或清除某些自身抗原,使機體保持正常平衡,但有時也會對機體造成病理性損害,如抗核抗體、抗雙鏈DNA抗體、抗甲狀腺球蛋白抗體等一些自身抗體的產生,對人體可造成危害??贵w的功能如下: 1、抗體能YZ病原體的生長繁殖,比如抗病菌的抗體就使入侵的病菌發(fā)生凝集,不讓病菌吸取營養(yǎng),饑餓的病菌就不能繁殖了?! ?、抗體能阻止病毒或病菌靠近人體細胞,入侵者不能靠近人體細胞,就不能黏附在細胞上,它就不能破壞人體細胞,不能形成感染。如同植物種子,只有落入土壤才能生根發(fā)芽??贵w不讓病毒黏附于細胞上,猶如飄浮在空中的種子,永遠不會生根發(fā)芽?! ?、抗體可以中和病毒,比如HBv,它的表面有一層蛋白質結構,井借此黏附到人的肝細胞表面,隨之鉆進肝細胞。而抗體在HBv沒有黏附前與其相遇,兩者出現表面結合,這一結合非常重要,使HBv表面的蛋白質發(fā)生改變,令其失去了黏附肝細胞的能力,不能進入肝細胞,更談不上復制了;抗體的這種中和作用,好像“酸堿中和”,使HBv不再有感染性,不久可能被人體清除?! ?、抗體還能識別感染微生物的種類。每種致病微生物侵入人體后,人體都會自動產生一種專一的抗體,比如SARS病毒侵入人體,人體就針對它產生抗SARS抗體;HBv入侵,人體也會產生一系列抗乙肝抗體等等。[詳細]
-
2018-12-30 10:00
產品樣冊
-
大鼠ELISA試劑盒巨細胞毒抗體IgM(CMV-IgM)說明書
- 大鼠ELISA試劑盒試驗原理: CMV-IgM試劑盒是間接法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知CMV-IgM濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將CMV-IgM和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中CMV-IgM的濃度呈比例關系。大鼠ELISA試劑盒內容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品:40IU/L1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進行稀稀空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標準品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標記的抗CMV-IgM抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型大鼠ELISA試劑盒自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。[詳細]
-
2018-09-19 10:00
產品樣冊
-
大鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒
- 大鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒[詳細]
-
2013-12-09 00:00
安裝說明
-
小鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒
- 小鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒[詳細]
-
2013-12-08 00:00
其它
-
胃蛋白酶的臨床意義說明
- 胃蛋白酶為白色或淡黃色的粉末;無霉敗臭;有引濕性;水溶液顯酸性反應。胃蛋白酶的臨床意義如下:胃蛋白酶原由胃底主細胞分泌,在pH1.5~5.0條件下,被活化成胃蛋白酶,將蛋白質分解為胨,而且一部分被分解為酪氨酸、苯丙氨酸等氨基酸。胃液胃蛋白酶測定可用于鑒別神經性低酸癥和胃性低酸癥,當胃酸過少或缺乏時,前者胃蛋白酶的含量有時正常而后者鹽酸與胃蛋白酶同時缺乏。一般認為胃性低酸癥是由于胃粘膜的重癥器質性變化所致,特別是對于惡性貧血、無酸癥、無胃蛋白酶分泌是診斷上的重要所見。慢性胃炎、慢性胃擴張、慢性十二脂腸炎等胃蛋白酶的分泌常減少。一般胃酸基礎分泌高的疾患,如十二指腸潰瘍等,胃蛋白酶活性。正常值:基礎胃液胃蛋白酶分泌量為84.4±9.72mg酪氨酸/h,Z高胃蛋白酶分泌量為190.29±15.31酪氨酸/h(Anson氏法);420±208kU/L(改良李氏法)。胃蛋白酶的作用方法:胃蛋白酶應保存在低溫環(huán)境中(-20℃至-80℃),以防止其發(fā)生自降解。儲存于pH值大于11的溶液中或對其進行還原性甲基化也可以有效防止自降解的發(fā)生;當pH值回到6時,胃蛋白酶的活性即可恢復。胃內的消化主要是對蛋白質初步分解,胃蛋白酶具有分解蛋白質的作用,但從主細胞分泌出的胃蛋白酶是以無活性的酶原存在,必須依據胃酸激活并提供作用環(huán)境,因此鹽酸激活胃蛋白質酶原、提供胃蛋白酶作用的酸性環(huán)境,是其助消化功能.胃蛋白酶原由胃底主細胞分泌,在pH1.5~5.0條件下,被活化成胃蛋白酶,將蛋白質分解為胨,而且一部分被分解為酪氨酸、苯丙氨酸等氨基酸。[詳細]
-
2018-09-28 10:00
產品樣冊
-
應用SPR 技術測量自身免疫性神經病的抗體水平
- 應用SPR 技術測量自身免疫性神經病的抗體水平[詳細]
-
2005-04-05 00:00
產品樣冊
-
ELISA法在梅毒檢測中的臨床意義
- 梅毒是一種性傳播疾病,近幾年來在我國的發(fā)病率呈明顯的上升趨勢。當前我國實驗室診斷梅毒常用TRUST或快速血漿反應素試驗(RPR)篩選后再用TPPA或螺旋體血球凝集試驗(TPHA)等確證。前類試驗有較高的生物學假陰性和假陽性,后類試驗則成本高、不能自動化、結果判斷受主觀影響。重組抗原ELISA是近年發(fā)展檢測梅毒的方法,具有敏感性高、特異性好、自動化程度高、易于標準化等優(yōu)點,本實驗研究應用其對臨床檢測進行評價,現報告如下。1材料和方法 1.1.1臨床標本均來自廣東惠州市ZX人民醫(yī)院,包括性病門診124例梅毒血清,其中24例為一期梅毒、28例為早期潛伏梅毒、72例為二期梅毒,各期梅毒的診斷按標準方法進行[2]。59例門診病人(其中19例類風濕關節(jié)炎、40例慢性乙型肝炎),172例獻血員血清由血站提供。1.1.2試劑TRUST試劑盒(上海諾泰ZG生物技術有限公司);TPPA試劑盒(美國諾泰生物技術有限公司);重組抗原ELISA試劑盒(雙抗原夾心)(上海伊麗薩生物科技有限公司)。1.1.3方法所有血清TRUST試劑盒、重組抗原ELISA試劑盒、TPPA試劑盒。試劑盒操作均在有效期之內,嚴格按說明書進行。TRUST和TPPA目測觀察結果;ELISA結果用酶標儀測光密度(OD值),以cutoff值為界判斷結果。2結果 3種血清學方法檢測355份血清白標本的結果得知,ELISA和TPPA均為陽性的24例一期梅毒和28例早期潛伏梅毒中,TRUST分別為4例和3例陰性,而ELISA和TPPA均為陰性的類風濕患者的TRUST有4例為假陽性。TRUST和ELISA的敏感性、特異性分為92.7%(115/124)、98.3%(227/231)和1**%(124/124)、99.1%(229/231)。TRUST與TPPA的符合率為96.3%(342/355)。ELISA與TPPA的符合率為99.4%(353/355)。3討論梅毒(Syphilis)是由蒼白螺旋體(TreponemaPallidum,TP)所引起的一種嚴重危害人類健康的性傳播疾病,近年來在我國有逐年上升趨勢。選擇好的檢測方法,可以有效的盡快對梅毒進行ZL和預防。在我國當前大多數單位仍然采用檢測非特異性抗體(如TRUST、RPR)作為梅毒初篩,陽性者再用檢測特異性抗體(如TPPA、TPHA)作確診。非特異性的檢測試劑成本低、操作簡便,結果易讀,常用于梅毒的初篩,但其檢測的是非特異性的抗心磷脂抗體,易受許多因素的影響,對于其他一些非梅毒者如紅斑狼瘡、類風濕自身免疫性疾病、孕婦等易產生生物學假陽性,及人工假陽性[1],特異性低。在本研究中,有4例TRUST為陽性的標本經TPPA確定為假陽性;此外,抗心磷脂抗體在梅毒的非活動期和ZL后易消失,對隱性梅毒早期或晚期梅毒和ZL后梅毒的敏感性低[2],造成假陰性而漏診,本研究中一期、隱性梅毒共有8例TRUST陰性而TPPA為陽性,表明單靠檢測非特異性抗體來篩查梅毒易造成漏檢,給健康人群帶來潛在的危害,應引起檢測單位的足夠重視。TPPA采用梅毒螺旋體天然抗原作為診斷抗原,有很高的特異性,采用間接凝集反應的原理,敏感性高,作為確證試驗在世界許多國家被廣泛使用,但梅毒螺旋體至今不能體外人工培養(yǎng),抗原來源困難,因而TPPA試劑盒成本高,此外,TPPA測定包括多次吸液過程,會造成操作者出錯的風險[3],還有該方法結果都依賴于操作者肉眼來判斷和解釋,結果不易保存。并且,先初篩再進行確診操作煩瑣。近年來,隨著梅毒螺旋體全基因序列的解析,通過基因工程途徑生產重組蛋白抗原或多肽作為抗原,應用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)將TP重組抗原包被在微孔測定板上,使試劑盒成本大大降低,重組抗原特異性高、純度高,多種重組抗原聯合使用可得到更高的敏感性和特異性,結合ELISA雙抗原夾心法,使重組抗原雙抗體夾心法ELISA試劑盒具有高度特異、靈敏、能自動化、標準化等優(yōu)點,尤其適用于大樣本的測定。本實驗中,在總共355份標本中,ELISA假陽性僅2份,無漏檢,以TPPA結果為參照,ELISA的敏感性、特異性為1**%、99.1%,表明ELISA與TPPA有良好的相關性;而TRUST的敏感性、特異性為92.7%、98.3%,ELISA敏感性和特異性均高于TRUST。國內外的研究也表明,梅毒-ELISA是目前檢測梅毒的一種良好方法?! 】傊p抗原夾心ELISA法具有敏感性高,特異性好,能自動化,判斷結果客觀準確,成本低,操作簡便等優(yōu)點,是一種集篩查和確診為一體的檢測梅毒的好方法,應該在臨床檢測方面進行推廣,普遍使用。【參考文獻】 ?。?]葉應撫.全國臨床檢測操作規(guī)程[M].第2版.南京:東南大學出版社,1997,432. ?。?]楊文林,楊健,劉丹瑩,等.早期梅毒ZL前后血清學分析[J].臨床皮膚科雜志,1998,27(5):314.[3]龔匡隆.梅毒血清學試驗的內部質量控制[J].ZG皮膚性病學雜志,1997,11(1):31.閱讀延伸:ELISA法與TRUST法在梅毒檢測中的比較梅毒是一種廣泛流行的性病,近年來在ZG發(fā)病率又有所回升。梅毒螺旋體(TreponemaPallidun)是梅毒的病原體,因其透明,不易著色,故又稱蒼白螺旋體。檢測梅毒螺旋體的方法有快速血漿反應素卡片試驗(RPR)和甲苯胺紅不加熱血清試驗(TRUST)。RPR法和TRUST法為非特異性血清試驗,敏感性及特異性較差,肉眼判斷結果易受檢測者的主觀性影響,易出現漏檢和誤判。下面采用梅毒螺旋體酶聯免疫試驗(TP-ELISA)與TRUST法進行比較,實驗過程和結果報告如下[詳細]
-
2018-09-27 10:00
產品樣冊
-
大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒
- 大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒[詳細]
-
2013-12-10 00:00
操作手冊
-
小鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒
- 小鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒[詳細]
-
2013-12-09 00:00
期刊論文
Copyright 2004-2026 yiqi.com All Rights Reserved , 未經書面授權 , 頁面內容不得以任何形式進行復制
參與評論
登錄后參與評論