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細胞抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性染色試劑盒產(chǎn)品說明書
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本文由 上海哈靈生物科技有限公司 整理匯編
2024-09-11 17:46 292閱讀次數(shù)
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細胞抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性染色試劑盒產(chǎn)品說明書
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細胞抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性染色試劑盒產(chǎn)品說明書
- 細胞抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性染色試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細]
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2024-09-11 17:46
應(yīng)用文章
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細胞抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性染色試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細胞抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性染色試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-03-30 00:00
選購指南
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細胞抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性染色試劑
- 主要用途細胞抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性染色試劑是一種旨在使用偶聯(lián)偶氮技術(shù),在酸性環(huán)境和酒石酸存在的情況下,呈現(xiàn)出紫紅色沉淀現(xiàn)象,來分析細胞樣本中酸性磷酸酶表達的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心改良、成功實驗證明的。主要適用于動物原生代或培養(yǎng)細胞尤其是細胞和破骨細胞的酶活性檢測。可用于骨質(zhì)細胞病理生理的研究的鑒定。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,靈敏牢固,顯色清晰。技術(shù)背景抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrateresistantacidphosphatase;TRAP)是一種在哺乳動物內(nèi)表達的糖化單體金屬蛋白酶,970多堿基,320多氨基酸,分子量為35kD。作為破骨細胞的標志,抗酒石酸酸性磷酸酶與破骨細胞調(diào)節(jié)的骨resorption活性和骨生成代謝有關(guān)??咕剖崴嵝粤姿崦甘且悦冈问胶铣桑ㄟ^蛋白酶裂解和還原后活化。在酸性環(huán)境下,催化磷酸酯鍵的水解,產(chǎn)生醇和釋放磷酸。其特征性為酒石酸抗性而與其它酸性磷酸酶區(qū)別。抗酒石酸酸性磷酸酶在破骨細胞(osteoclast)、活化的巨噬細胞、神經(jīng)細胞以及懷孕期的豬內(nèi)皮層子宮內(nèi)膜(endometrium)高度表達。在網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖(leukaemicreticuloendotheliosis)或毛細胞性白血?。╤airycellleukaemia)、戈謝病(Gaucher’sdisease)、愛茲性腦?。℉IV-inducedencephalopathy)、骨巨細胞瘤(osteoclastoma)、骨質(zhì)疏松癥(osteoporosis)和代謝性骨病等病人體內(nèi)抗酒石酸酸性磷酸酶顯著?;诘孜镙练覣S-MX磷酸鹽(naphtholAS-MXphosphate),在酸性環(huán)境和酒石酸(tartrate)存在的條件下,酸性磷酸酶催化其水解,釋放出萘酚(naphthol-AS),進而與重氮鹽耐曬紅紫(Fastredviolet)偶聯(lián),于是在酶的活動處形成不溶性紫紅色沉淀的偶氮染料,由此證明抗酒石酸酸性磷酸酶活性。其反應(yīng)體系為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP)elisa試劑盒說明書
- 購人抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)elisa試劑盒可以享受免費代測服務(wù)![詳細]
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2018-10-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)ELISA檢測試劑盒
- www.biokanu.com本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)ELISA檢測試劑盒使用說明書檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。3.細胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。5.保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品酶標儀(450nm)高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱操作注意事項試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。標準品稀釋液即可視為陰性對照或者空白;預(yù)處理后的樣本無需稀釋,直接取10μL加樣即可。嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。所有液體組分使用前充分搖勻。試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標板12孔×8條12孔×4條無標準品(48U/L)0.6mL0.6mL按說明書進行稀釋標準品稀釋液6mL3mL無樣本稀釋液6mL3mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無注:標準品用標準品稀釋液依次稀釋為:48、24、12、6、3、1.5U/L試劑的準備20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。洗板方法手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步驟從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。結(jié)果判斷繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應(yīng)OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。試劑盒性能1.準確性:標準品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。2.靈敏度:Zdi檢測濃度小于1.0U/L。3.特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。4.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。5.貯藏:2-8℃,避光防潮保存。6.有效期:6個月免責(zé)聲明1.試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔(dān),本公司概不負責(zé)。2.嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔(dān)。[詳細]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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抗酒石酸酸性磷酸酶TRACP 5b試劑盒說明書
- 【產(chǎn)品名稱】通用名稱:抗酒石酸酸性磷酸酶5bELISA試劑盒英文名稱:TRACP5bELISAKit【包裝規(guī)格】規(guī)格:96人份/盒【預(yù)期用途】用于定量檢測人血清中抗酒石酸酸性磷酸酶含量。【簡介】大量的抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)是由骨吸收的破骨細胞和有活力的巨噬細胞所釋放的。在血液循環(huán)中的TRACP有TRACP5b和TRACP5a二種形式,TRACP5b來源于破骨細胞,而TRACP5a來源于巨噬細胞。由破骨細胞剛分泌到血液中的TRACP5b是有活性的酶,但當(dāng)TRACP5b在血液循環(huán)中被清除之前已無活性,并被降解為碎片。這樣TRACP5b不會因肝、腎功能受損而在血液中積蓄。血清中TRACP5b均來源于破骨細胞,此酶在晝夜的活性水平變化不明顯,且不受進食的影響,故可在一天的任何時候都可以采集樣本進行檢驗。BoneTRAP檢測試劑盒是檢測由破骨細胞剛釋放出的TRACP5b活性的特異性測定方法。它可用作骨吸收的指示劑及在絕經(jīng)后婦女或已進行抗骨吸收ZL(HRT和bisphosphonates)的骨質(zhì)疏松患者骨吸收變化監(jiān)測的輔助手段(4,6-18).Invitro,TRACP5bactivityreflectsthenumberofosteoclasts/TRACP5b活性反映破骨細胞數(shù)量(15,19),因此應(yīng)用于此試劑盒在進行人的破骨細胞培養(yǎng)時,可用于檢測破骨細胞的數(shù)量。[詳細]
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2018-10-31 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b檢測試劑盒說明書
- 英文名稱:RatTRAPAssayKit產(chǎn)地:英國IDS貨號:SB-TR102規(guī)格:96T【使用目的】RatTRAPTMtest是一種用來測定大鼠血樣中來源于破骨細胞的抗酒石酸性磷酸酶5b(TRAP5b)的固相酶聯(lián)免疫活性測定。RatTRAPTMtest只供科研使用。[詳細]
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2018-09-28 10:00
產(chǎn)品樣冊
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兔抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)試劑盒說明書
- 兔抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)試劑盒說明書本試劑盒僅供研究使用。使用目的:本試劑盒用于測定兔血清、血漿及相關(guān)液體樣本中抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中兔抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)水平。用純化的兔抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b),再與HRP標記的抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中兔抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)濃度。標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。兔抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)試劑盒操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。20ng/L5號標準品150l的原倍標準品加入150l標準品稀釋液10ng/L4號標準品150l的5號標準品加入150l標準品稀釋液5ng/L3號標準品150l的4號標準品加入150l標準品稀釋液2.5ng/L2號標準品150l的3號標準品加入150l標準品稀釋液1.25ng/L1號標準品150l的2號標準品加入150l標準品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50l,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測樣品10l(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50l,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50l,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié):計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。兔抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-11-23 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠酒石酸酸性磷酸酶試劑盒說明書
- 一.簡介:RatTRAP分析能用于監(jiān)測睪丸切除術(shù)和卵巢切除術(shù)后大鼠模型的骨吸收速率的改變。然而,該分析方法的使用存在著一些限制。我們推薦在手術(shù)操作前提取血清樣本(日子0,基準樣本,非常重要),在手術(shù)操作后的1,2,4,7和14天提取血清樣本。在每個時間點都必須包括一個假設(shè)群體作為正常水平組。我們的結(jié)果出示血清TRAP5b水平在睪丸切除術(shù)和卵巢切除術(shù)之后的幾天內(nèi)快速上升,然后在手術(shù)后2個星期又回重到正常的水平。在那個時間點之后,TRAP5b水平不再高于正常值。二.產(chǎn)品名稱:中文名稱:大鼠酒石酸酸性磷酸酶試劑盒英文名稱:RatTRACP5bELISA[詳細]
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2018-10-31 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人抗酒石酸酸性磷酸酶(ACP5)ELISA試劑盒
- 人抗酒石酸酸性磷酸酶(ACP5)ELISA試劑盒[詳細]
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2015-03-18 00:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)檢測試劑盒
- 大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)檢測試劑盒[詳細]
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2024-09-11 17:46
期刊論文
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人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人TRACP-5b單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的TRACP-5b與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人TRACP-5b,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,TRACP-5b濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中TRACP-5b濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):20U/L1瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標準品液配制:設(shè)標準管7管,每管加入標本稀釋液300ul。在**管中加入20U/L的標準品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第六管中吸出300ul棄去。第七管為空白對照。加上原液管總共八管。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標準品20、10、5、2.5、1.25、0.625、0.312、0U/L為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)TRACP-5b含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的TRACP-5b檢測濃度小于0.15U/L。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人TRACP-5b。不與人其它細胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10.2%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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溴化乙啶細胞端粒酶活性TRAP電泳分析試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 溴化乙啶細胞端粒酶活性TRAP電泳分析試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-03-30 00:00
期刊論文
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溴化乙啶細胞端粒酶活性TRAP電泳分析試劑盒
- 主要用途溴化乙啶細胞端粒酶活性TRAP電泳分析試劑是一種旨在通過端粒酶體外合成端粒重復(fù)序列的引物延展方法,繼而進行多聚酶聯(lián)擴增反應(yīng),在非變性聚丙烯酰胺電泳上,通過經(jīng)典的溴化乙啶染色技術(shù),呈現(xiàn)六堿基相間的階梯圖像,以分析和評價活細胞端粒酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。廣泛應(yīng)用于腫瘤、衰老等研究。產(chǎn)品即到即用,性能穩(wěn)定,無核酶污染,操作便捷,敏感GX,染色清晰,重復(fù)性好。技術(shù)背景端粒重復(fù)序列擴增方法(telomericrepeatamplificationprotocol;TRAP)是基于多聚酶聯(lián)擴增的敏感GX的體外端粒酶活性的檢測技術(shù)。首先,非端粒單核苷酸引物作為端粒酶的底物而持續(xù)延長產(chǎn)生六堿基差異的片段;然后,延長所獲得的產(chǎn)物在非端粒單核苷酸引物和逆向引物的參與下進行特異性擴增;內(nèi)參引物的整合用于定量酶活性。溴化乙啶染色技術(shù)可以檢測到10ng的DNA條帶。[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA試劑盒
- 大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-10 00:00
課件
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人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA試劑盒
- 人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-06 00:00
標準
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人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)elisa試劑盒
- 人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)elisa試劑盒實驗原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)水平。用純化的人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b),再與HRP標記的抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)抗體結(jié)合,形成抗體抗原酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)濃度。人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)ELISA試劑盒操作步驟:1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)ELISA試劑盒注意事項:1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡1530分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。[詳細]
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2018-09-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
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小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)試劑盒使用方法
- 檢測范圍:48T6ng/L160ng/L使用目的:本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)水平。用純化的小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b),再與HRP標記的抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)濃度。試劑盒組成120倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液3ml×1瓶2酶標試劑3ml×1瓶8標準品(320ng/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×4條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液3ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液3ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液3ml×1/瓶12密封袋1個[詳細]
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2018-09-19 10:01
產(chǎn)品樣冊
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兔抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)ELISA試劑盒
- 兔抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)ELISA試劑盒說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T0.6ng/L25ng/L使用目的:本試劑盒用于測定兔血清、血漿及相關(guān)液體樣本中抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中兔抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)水平。用純化的兔抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b),再與HRP標記的抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中兔抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)濃度。兔抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)ELISA試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(40ng/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。兔抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)ELISA試劑盒操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。20ng/L5號標準品150l的原倍標準品加入150l標準品稀釋液10ng/L4號標準品150l的5號標準品加入150l標準品稀釋液5ng/L3號標準品150l的4號標準品加入150l標準品稀釋液2.5ng/L2號標準品150l的3號標準品加入150l標準品稀釋液1.25ng/L1號標準品150l的2號標準品加入150l標準品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50l,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測樣品10l(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50l,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50l,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié):計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。兔抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)ELISA試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照兔抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)ELISA試劑盒說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-11-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA試劑盒
- 小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-22 18:13
標準
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