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人腎上腺素(AD)ELISA試劑盒說明書
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2018-09-13 10:01 383閱讀次數(shù)
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人腎上腺素(AD)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和唾液等其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人AD單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的AD與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人AD,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,AD濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中AD濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):40ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、唾液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。血清、血漿作1:2稀釋(取100ul,加標本稀釋液100ul,稀釋2倍)。細胞培養(yǎng)上清可以不做稀釋直接檢測。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成40ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應AD含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的AD檢測濃度小于31pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人AD。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷!
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人腎上腺素(AD)ELISA試劑盒說明書
- 人腎上腺素(AD)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和唾液等其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人AD單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的AD與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人AD,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,AD濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中AD濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):40ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、唾液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。血清、血漿作1:2稀釋(取100ul,加標本稀釋液100ul,稀釋2倍)。細胞培養(yǎng)上清可以不做稀釋直接檢測。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成40ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應AD含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的AD檢測濃度小于31pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人AD。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒說明書
- 人腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人EPI(Epinephrine,Adrenalinum)單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的EPI與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人EPI,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,EPI濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中EPI濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):1280ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成2560ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入2560ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品256、128、64、32、16、8、4、0ng/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應EPI含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的EPI檢測濃度小于2ng/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人EPI。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人腎上腺素(Adrenalin)ELISA試劑盒說明書
- 人腎上腺素(Adrenalin)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人Adrenalin單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的Adrenalin與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人Adrenalin,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,Adrenalin濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中Adrenalin濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):6ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。尿液、細胞培養(yǎng)上清1:5倍稀釋。血清、血漿1:20倍稀釋。2.標準品液配制:使用前加入0.3ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。設標準管8管,每管加入標本稀釋液300ul。在**管中加入20ng/ml的標準品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品10、5、2.5、1.25、0.625、0.312、0.156、0ng/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應Adrenalin含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的Adrenalin檢測濃度小于0.1ng/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人Adrenalin。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒使用說明書
- 人腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。實驗原理人腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人腎上腺素(EPI)水平。用純化的人腎上腺素(EPI)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入腎上腺素(EPI),再與HRP標記的腎上腺素(EPI)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腎上腺素(EPI)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人腎上腺素(EPI)濃度。人腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(400ng/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。人腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。200ng/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液100ng/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液50ng/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液25ng/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液12.5ng/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。人腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。人腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2019-01-02 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒
- 人腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-06 00:00
安裝說明
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人腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒
- 人腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-28 03:34
標準
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人變腎上腺素(MN) ELISA試劑盒
- 人變腎上腺素(MN) ELISA試劑盒[詳細]
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2015-01-13 00:00
選購指南
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人甲氧基腎上腺素(MEPI)ELISA試劑盒使用說明書
- 本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中人甲氧基腎上腺素(MEPI)的含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人甲氧基腎上腺素(MEPI)水平。用純化的人甲氧基腎上腺素(MEPI)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入甲氧基腎上腺素(MEPI),再與HRP標記的甲氧基腎上腺素(MEPI)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的甲氧基腎上腺素(MEPI)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人甲氧基腎上腺素(MEPI)含量。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品:135pg/mL0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。2.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在**、第二孔中分別加標準品100μl,然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為90pg/mL,60pg/mL,30pg/mL,15pg/mL,7.5pg/mL)。加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。注意事項:試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批見應分別小于9%和11%檢測范圍:3.5pg/mL-120pg/mL保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-11-07 14:16
產(chǎn)品樣冊
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小鼠腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒說明書
- 小鼠腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗小鼠EPI(Epinephrine,Adrenalinum)單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的EPI與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗小鼠EPI,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,EPI濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中EPI濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):1280ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成2560ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入2560ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品256、128、64、32、16、8、4、0ng/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應EPI含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的EPI檢測濃度小于2ng/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的小鼠EPI。不與小鼠其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠EPI(Epinephrine,Adrenalinum)單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的EPI與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠EPI,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,EPI濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中EPI濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):2560ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成2560ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入2560ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品256、128、64、32、16、8、4、0ng/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應EPI含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的EPI檢測濃度小于2ng/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠EPI。不與大鼠其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
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豚鼠腎上腺素(EPI)elisa試劑盒說明書
- 豚鼠腎上腺素(EPI)elisa試劑盒使用目的:本試劑盒用于測定豚鼠血清、血漿及相關液體樣本中腎上腺素(EPI)含量。豚鼠腎上腺素(EPI)elisa試劑盒實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中豚鼠腎上腺素(EPI)水平。用純化的豚鼠腎上腺素(EPI)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入腎上腺素(EPI),再與HRP標記的腎上腺素(EPI)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腎上腺素(EPI)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中豚鼠腎上腺素(EPI)濃度。豚鼠腎上腺素(EPI)elisa試劑盒組成:130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(96pg/ml)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求:1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。豚鼠腎上腺素(EPI)elisa試劑盒操作步驟:1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。48pg/ml5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液24pg/ml4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液12pg/ml3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液6pg/ml2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液3.0pg/ml1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。豚鼠腎上腺素(EPI)elisa試劑盒計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項:1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。豚鼠腎上腺素(EPI)elisa試劑盒保存條件及有效期:1.試劑盒保存:2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2019-01-02 10:00
產(chǎn)品樣冊
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兔腎上腺素(EPI)elisa試劑盒使用說明書
- 兔腎上腺素(EPI)elisa試劑盒使用說明書[詳細]
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2014-03-24 00:00
專利
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人腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒
- 人腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-29 08:16
期刊論文
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人腎上腺素(EPI)檢測試劑盒
- 人腎上腺素(EPI)檢測試劑盒[詳細]
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2024-09-28 01:25
實驗操作
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腎上腺素ELISA Kit使用說明書
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Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4腎上腺素ELISAKit使用說明書(德國IBL:RE59251)1、應用范圍此試劑盒可用于人血清和尿液中腎上腺素的體外定量檢測。2、臨床意義兒茶酚胺類激素腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺主要由腎上腺髓質(zhì)、交感神經(jīng)系統(tǒng)和大腦產(chǎn)生。它們幾乎影響所有的組織,并與其它激素和神經(jīng)系統(tǒng)一起參與各種生理過程的調(diào)節(jié)。在許多疾病中,兒茶酚胺激素及其代謝產(chǎn)物變腎上腺素和去甲變腎上腺素的分泌量都會增加,因而這些激素可用于疾病的診斷。所以,這些激素的檢測對于疾病的診斷及神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤疾病的具有重要意義。它主要用于嗜鉻細胞瘤的診斷,當然也用于成神經(jīng)細胞瘤和神經(jīng)節(jié)細胞瘤的診斷。因為在實驗一開始時有提取步驟,用戶可使用各種動物材料進行實驗。所有動物的兒茶酚胺的化學結(jié)構(gòu)相同,因此此試劑盒可用于測大鼠、小鼠或其它動物。3、實驗原理此固相ELISA試劑盒利用的夾心法原理。微孔中包被了羊抗兔抗體。之后加入的液態(tài)抗體可以結(jié)合到抗原分子的一個抗原決定簇上,而抗原分子可在溫育期內(nèi)結(jié)合到固相抗體上。樣品中的抗原與酶標二抗一起在微孔內(nèi)溫育,此酶標二抗可結(jié)合到抗原分子上的另一不同表位上。加入底物液后,溶液所顯示的顏色強度與樣品中抗原的量成正比。樣品的結(jié)果可直接從標準曲線上讀取。4、貯存與穩(wěn)定性試劑盒和運輸環(huán)境和儲存環(huán)境溫度為2-8℃,避免熱源或太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑的準備將在相關章節(jié)中闡述。開封的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定,前提是要將試劑盒用袋子密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下。5、樣品的采集與儲存注意人體內(nèi)的兒茶酚氨和間甲腎上腺素的釋放會受到一些食品和藥物的影響。因此在樣品采集前72小時內(nèi)病人應禁止服用下列食物和藥品:維生素B,咖啡,香蕉,α甲基多巴,MAO,COMTYZ劑,還有降血壓類藥物。血漿(EDTA)注意血液采集后兩小時內(nèi),將血液樣品冷藏于2-8℃的環(huán)境下直致離心獲取血漿。注意靜脈穿刺采集全血的常規(guī)注意事項。從采集到血液樣品的那一刻起到檢測時都應保持血液樣品的化學整體性。不要使用明顯溶血、黃疸的和脂血樣品。如果樣品出現(xiàn)混濁,則在實驗前應當離心以除去所有的微粒物質(zhì)。貯存2-8℃≤-20℃避免熱源或太陽直射,避免反復凍融,冷凍狀態(tài)下運輸樣品。穩(wěn)定性6h1個月尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。將病人24h內(nèi)的所有尿液都收集到,并混合于含10-15ml6N的HCl防腐劑的試劑瓶中。貯存≤-20℃避免熱源或太陽直射,避免反復凍融,冷凍狀態(tài)下運輸樣品。穩(wěn)定性6個月6、試劑盒成分注意:試劑盒有足夠做96份單孔檢測或48份雙孔檢測所需的試劑成分數(shù)量標志成分1×12×8MTP包被板,可拆,微孔中包被了抗兔IgG(羊,單克隆)。1×6×2.5mlCALA-F標準品A-F,即用腎上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml(0;8;27;82;273;819nmol/L)去甲腎上素:0;5;15;50;150;500ng/mL(0;30;89;296;887;2955nmol/L)多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL(0;78;228;750;2938;14688nmol/L)內(nèi)含[-]腎上腺素,[-]去甲腎上腺素,[-]多巴胺(有生物活性),0.1M的HCl1×2×2.5mlCONTROL1+2質(zhì)控品1+2即用,內(nèi)含[-]腎上腺素,[-]去甲腎上腺素,[-]多巴胺(具有生物活性),0.1M的HCl,具體濃度及可允許范圍請見試劑瓶標簽.1×250μLENZCONJCONC酶聯(lián)物濃縮型(100×)內(nèi)含:堿性磷酸酶標記的抗體,Tris緩沖液,HCl,0.01%的NaN32×EXTRPLATE提取板(微孔板)每板24孔,包被了硼酸親和凝膠。1×60mlEXTRBUF提取緩沖液粉紅色,即用,內(nèi)含:0.016%的NaN3。2×1.25mlCOMTLYOCOMT凍干粉內(nèi)含:兒茶酚-氧位-甲基轉(zhuǎn)移酶(豬肝),NaN31×2mlCOMTADDCOMT添加劑內(nèi)含:人血漿,穩(wěn)定劑,0.01%硫柳汞。1×7mlANTISERUMDO腎上腺素抗血清紫羅蘭色,即用,內(nèi)含:抗腎上腺素抗體(兔),緩沖液,穩(wěn)定劑。2×1.25mlCOENZ酶聯(lián)復合物即用,內(nèi)含:S-腺苷-L-蛋白酸,穩(wěn)定劑。1×3mlENZBUF酶緩沖液即用,內(nèi)含:Tris緩沖液,HCl,穩(wěn)定劑。1×17mlRELEASEBUFRelease緩沖液黃色,即用,內(nèi)含:0.1M的HCl,指示劑。1×3mlACYLREAG酰化試劑即用,內(nèi)含:二甲基甲酰胺,乙醇。注意:有毒,高可燃性。1×50mlWASHBURCONC洗滌液濃縮型(10×)內(nèi)含:Tris緩沖液,HCl,吐溫,0.2%的NaN31×9×PNPPSUBSPNPP底物片內(nèi)含:對硝基苯磷酸(PNPP)1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液即用,內(nèi)含:二乙醇胺,水,0.05%的NaN31×15mlPNPPSTOPPNPP終止液即用,內(nèi)含:1M的NaOH,0.25M的EDTA3×FOIL粘性金屬板7、實驗所需器材(但試劑盒不提供)1)移液器(10;10-100;100-1000μL)2)軌道搖床(200-900rpm)3)旋渦混合器4)帶儲器的8通道移液器5)洗滌瓶,自動或半自動包被板清洗系統(tǒng)6)酶標儀7)雙蒸水或去離子水8)吸水紙,取樣吸頭,計時器8、實驗前說明注意用于96人份檢測色試劑盒成分可分成兩次進行。,下列所述體積為做48人份時所需要的量。8.1樣品的稀釋如果樣品中腎上腺素濃度高于Z高標準品的應按照下列所述進行稀釋:樣品待稀釋稀釋液備注血漿腎上腺素濃度高于Z高標準品中腎上腺素的濃度雙蒸水提取步驟前尿液腎上腺素濃度高于Z高標準品中腎上腺素的濃度0.1N的HCl提取步驟前8.2樣品、標準品和質(zhì)控品的提?。ㄌ崛“澹?)將標準品、已稀釋好的質(zhì)控品、已稀釋好的尿液樣品各20μL和500μL血漿樣品加入到提取板相應的微孔中。除血漿樣品孔外,在所有的微孔中加入500μL雙蒸水以消除體積差別。2)在每一微孔中加入1000μL提取緩沖液3)蓋板。在軌道搖床(600-900rpm)上18-25℃的環(huán)境下提取30min。在提取過程中,液體的表面應該會浸濕粘性金屬板,但液體的量不能超過微孔的2/3。液體是否濺出并不會影響實驗結(jié)果。4)移去粘性金屬板,快速棄取孔內(nèi)反應液,在吸水紙上拍干。5)每孔加入2ml雙蒸水6)用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上(600-900rpm)18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結(jié)果。7)移去粘性金屬板,快速棄取孔內(nèi)反應液,在吸水紙上拍干。8)每孔加入150μL提取緩沖液,再向每孔中加入50μL?;噭?,立即混合均勻。9)在軌道搖床(400-600rpm)上18-25℃的環(huán)境下提取20min。(無需蓋板)10)快速棄取孔內(nèi)反應液,在吸水紙上拍干。11)每孔加入2ml雙蒸水。12)用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上(600-900rpm)18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結(jié)果。13)移去粘性金屬板,快速棄取孔內(nèi)反應液,在吸水紙上拍干。14)每孔加入300μLRelease緩沖液。15)在軌道搖床(400-500rpm)上18-25℃的環(huán)境下振蕩30min。(無需蓋板)已準備好的樣品應當在當天就進行檢測。如果不行的話,您可將提取板用粘性金屬板蓋好,在2-8℃的環(huán)境下可存放一夜。9、實驗步驟9.1COMT酶溶液的準備注意:COMT酶溶液應在使用前直接臨時配置。在COMT凍干粉中加入1.25ml雙蒸水,充分混和。再加入1.25ml酶聯(lián)溶液,然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加劑以充分混合溶解的COMT試劑*,COMT酶溶液Z后的體積為每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋渦混合器混合,但要避免氣泡產(chǎn)生,配置好的COMT溶液可在室溫下穩(wěn)定存放1小時。*如果只需要一定量的COMT溶液,則剩余的COMT溶液應立即凍存于-20℃的環(huán)境下。COMT溶液可在此環(huán)境下穩(wěn)定存放1-2個月。9.2樣品、標準品和質(zhì)控品的酶分化注意如果要檢測腎上腺素和去甲腎上腺素,我們建議您先檢測腎上腺素。如果使用自動置換型衣液器加樣,請將取樣吸頭內(nèi)的殘余液體加入到提取板的相應微孔內(nèi),否則剩余的提取液不夠去甲腎上腺素檢測用。將提取板放到有一定坡度的位置上。實驗開始前,確定好腎上腺素和去甲腎上腺素的檢測孔并標記好。9.3尿液與血漿中的甲腎上腺素1在每一微孔內(nèi)加入25ul臨時配制的COMT酶溶液,輕輕振板以使溶液混合均勻。2將提取好的標準品、質(zhì)控品和樣品分別25ul加入到相應的微孔內(nèi)。在此步驟中,我們可以將取樣吸頭直接深入到COMT溶液里。加樣后,溶液顏色變成粉色,輕輕振板以使溶液混合均勻。3向每一微孔中加入50ul甲腎上腺素抗血清(綠色)。4蓋板,在軌道搖床上(400-600rpm)18-25℃的環(huán)境下孵育120min。8.4凍干粉或濃縮成分的準備稀釋成分稀釋液比例備注貯存穩(wěn)定性20ml洗滌液180ml雙蒸水1:10充分混合2-8℃4W60μL酶聯(lián)物6ml洗滌緩沖液(已稀釋好)1:101臨時配置,僅能使用一次,混合時避免氣泡產(chǎn)生18-25℃30min4PNPP底物片10.7mlPNPP底物緩沖液臨時配置,僅能使用一次18-25℃10min9.5ELISA實驗步驟1)移去粘性金屬板,棄取孔內(nèi)反應液,每孔用250-300ul稀釋好的洗滌液洗板4次。Z后在吸水紙上拍干以除去殘余液體。2)在每一微孔中加入100ul臨時配置好的酶聯(lián)物。3)蓋板,在軌道搖床上(400-600rpm)18-25℃的環(huán)境下孵育60min。4)移去粘性金屬板,棄取孔內(nèi)反應液,每孔用250-300ul稀釋好的洗滌液洗板4次。Z后在吸水紙上拍干一除去殘余液體。5)如果可以的話,使用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液的時間間隔應當相同,使用自動置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。6)在每一微孔中加入200ul底物液。7)不要蓋板,在軌道搖床上(400-600rpm)18-25℃的環(huán)境下孵育60min。8)在每一微孔內(nèi)加入50ulPNPP終止液以終止酶反應。輕輕振板以使溶液混合均勻。9)加終止液后60min內(nèi)405nm處讀取OD值。10、期望值實驗結(jié)果不能當作判斷任何ZL結(jié)果的**因素,疾病的判斷還應當與其它臨床觀察和診斷檢測相結(jié)合。以下結(jié)果為正常人群的正常值(5%-95%),建議每個實驗室讀確定自己的正常值范圍:尿液血漿μg/dnmol/dpg/mLnmol/L去甲腎上腺素<20<110<125<0.68本譯文僅供參考,詳情請以原文為準。ZGdu家總代理:深圳市科潤達生物工程有限公司辦公地址:深圳市蛇口工業(yè)區(qū)太子路18號海景廣場11C研發(fā)基地:深圳市蛇口沿山路10號6層電話:0755-26814430,26680196郵政編碼:518067免費電話:800-8306296傳真:0755-26814431[詳細]
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2018-11-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒
- 大鼠腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-10 00:00
標準
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豬腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒
- 豬腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-28 01:10
報價單
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pACT2 AD說明書
- pACT2AD載體描述:pACT2generatesafusionoftheGAL4AD(aminoacids768881),aHAepitopetag,andaproteinofinterest(orproteinencodedbyacDNAinafusionlibrary)clonedintotheMCSinthecorrectorientationandreadingframe.pACT2,whichisderivedfrompACT,containsauniqueEcoRIsiteintheMCS.ThehybridproteinisexpressedathighlevelsinyeasthostcellsfromtheconstitutiveADH1promoter(P);transcriptionisterminatedattheADH1transcriptionterminationsignal(T).TheproteinistargetedtotheyeastnucleusbythenuclearlocalizationsequencefromSV40T-antigenwhichhasbeenclonedintothe5'endoftheGAL4ADsequence.pACT2isashuttlevectorthatreplicatesautonomouslyinbothE.coliandS.cerevisiaeandcarriestheblagene,whichconfersampicillinresistanceinE.coli.pACT2alsocontainstheLEU2nutritionalgenethatallowsyeastauxotrophstogrowonlimitingsyntheticmedia.TransformantswithAD/libraryplasmidscanbeselectedbycomplementationbytheLEU2genebyusinganE.colistrainthatcarriesaleuBmutation(e.g.,HB101).質(zhì)粒圖譜:[詳細]
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2018-09-29 10:03
產(chǎn)品樣冊
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大鼠β2腎上腺素受體(β2-AR)ELISA試劑盒使用說明書
- 大鼠β2腎上腺素受體(β2-AR)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。實驗原理大鼠β2腎上腺素受體(β2-AR)ELISA試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠β2腎上腺素受體(β2-AR)水平。用純化的大鼠β2腎上腺素受體(β2-AR)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入β2腎上腺素受體(β2-AR),再與HRP標記的β2腎上腺素受體(β2-AR)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的β2腎上腺素受體(β2-AR)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠β2腎上腺素受體(β2-AR)濃度。大鼠β2腎上腺素受體(β2-AR)ELISA試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(160pg/ml)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。大鼠β2腎上腺素受體(β2-AR)ELISA試劑盒操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。80pg/ml5號標準品150l的原倍標準品加入150l標準品稀釋液40pg/ml4號標準品150l的5號標準品加入150l標準品稀釋液20pg/ml3號標準品150l的4號標準品加入150l標準品稀釋液10pg/ml2號標準品150l的3號標準品加入150l標準品稀釋液5pg/ml1號標準品150l的2號標準品加入150l標準品稀釋液2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50l,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測樣品10l(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50l,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.10.終止:每孔加終止液50l,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。大鼠β2腎上腺素受體(β2-AR)ELISA試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。大鼠β2腎上腺素受體(β2-AR)ELISA試劑盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-11-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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赤羽?。ˋD)ELISA試劑盒說明
- 赤羽?。ˋD)ELISA試劑盒說明[詳細]
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2024-09-29 04:25
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