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石蠟切片彈性纖維(ELASTIC)馬森(MASSON)試劑盒

本文由 上海科學(xué)儀器有限公司 整理匯編

2018-11-18 10:00 966閱讀次數(shù)

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石蠟切片彈性纖維(ELASTIC)馬森(MASSON)染色試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)主要用途石蠟切片彈性纖維(ELASTIC)馬森(MASSON)染色試劑是一種旨在使用標(biāo)準(zhǔn)化的化學(xué)脫蠟方法和偉郝夫(Verhoeff)蘇木素以及三色染料(trichrome),分析和區(qū)分存檔中的石蠟包埋組織切片中的彈性纖維的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心改良傳統(tǒng)方法、成功實(shí)驗(yàn)證明的。廣泛用于結(jié)締組織、肌肉組織和纖維蛋白的研究等。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,顯色清晰。技術(shù)背景彈性纖維(elasticfiber),又稱(chēng)為黃色纖維(yellowfiber),是固有結(jié)締組織(Connectivetissueproper)細(xì)胞外基質(zhì)的成分之一,由平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞產(chǎn)生彈力蛋白質(zhì)(elastin)、原纖維蛋白(fibrillin;FBN)等構(gòu)成。彈性纖維具有可伸展性。存在于皮膚、肺、動(dòng)脈、靜脈、彈力軟骨、牙周韌帶(periodontalligament)、脂肪組織中。彈性纖維缺失導(dǎo)致皮膚松弛癥(cutislaxa)、威廉姆斯綜合征(WilliamsSyndrome)等疾病。基于摩羅利(mallory)S次應(yīng)用三色系統(tǒng)的方法,馬森(masson)進(jìn)行了改良,在三色復(fù)合染料體系中,使用苯胺籃(anilineblue)替代綠籃。同時(shí)使用偉郝夫(Verhoeff)蘇木素選擇性染色彈性纖維,三色復(fù)合染料幫助區(qū)別其它包括肌肉、膠原纖維、纖維蛋白(fibrin)等組織成分。馬森方法操作復(fù)雜,可以細(xì)致區(qū)分多種組織成分。產(chǎn)品內(nèi)容脫蠟液(ReagentA)300毫升脫水液A(ReagentB)100毫升脫水液B(ReagentC)100毫升脫水液C(ReagentD)100毫升脫水液D(ReagentE)100毫升清理液(ReagentF)200毫升韋格液(ReagentG)100毫升祛色液(ReagentH)20毫升岑克液(ReagentI)100毫升范氏液(ReagentJ)10毫升比氏液(ReagentK)10毫升酸性液(ReagentL)10毫升染色液(ReagentM)10毫升修正液(ReagentN)10毫升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存在4℃冰箱里,避免光照;試劑具有腐蝕性,注意安全;有效保證6月用戶(hù)自備小型玻璃染色缸:用于組織或切片處理的容器培養(yǎng)箱或烘箱:用于樣品反應(yīng)孵育微波爐:用于樣品反應(yīng)孵育處理中性樹(shù)脂:用于切片封片光學(xué)顯微鏡:用于切片染色后觀(guān)察分析實(shí)驗(yàn)步驟脫蠟處理取出10片待測(cè)的5微米厚的石蠟包埋的組織切片放進(jìn)80℃烘箱,孵育30分鐘室溫下靜置15分鐘按下表依次放進(jìn)小染色缸里孵育染色缸孵育時(shí)間50毫升脫蠟液(ReagentA)15分鐘50毫升脫蠟液(ReagentA)15分鐘50毫升脫蠟液(ReagentA)15分鐘50毫升脫水液A(ReagentB)3分鐘50毫升脫水液B(ReagentC)3分鐘50毫升脫水液C(ReagentD)3分鐘50毫升脫水液D(ReagentE)3分鐘小心移去切片上的脫水液D(ReagentE)小心加上200微升清理液(ReagentF)在切片上,鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面室溫下孵育5分鐘小心移去切片上的清理液(ReagentF)樣本染色處理操作一:標(biāo)準(zhǔn)染色小心加入1毫升韋格液(ReagentG)在切片上,鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面放進(jìn)60℃恒溫培養(yǎng)箱孵育60分鐘小心移去韋格液(ReagentG)室溫下,小心將切片置入50毫升清理液(ReagentF)中孵育2分鐘小心移去切片上的清理液(ReagentF)小心加入200微升祛色液(ReagentH)在切片上,鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面室溫下孵育5分鐘小心移去祛色液(ReagentH)室溫下,小心將切片置入50毫升清理液(ReagentF)中孵育2分鐘小心移去切片上的清理液(ReagentF)小心加入1毫升岑克液(ReagentI)在切片上,鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面放進(jìn)60℃恒溫培養(yǎng)箱孵育60分鐘小心移去岑克液(ReagentI)室溫下,小心將切片置入50毫升清理液(ReagentF)中孵育2分鐘小心移去切片上的清理液(ReagentF)小心加入200微升范氏液(ReagentJ)在切片上,鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面室溫下孵育30分鐘小心移去范氏液(ReagentJ)室溫下,小心將切片置入50毫升清理液(ReagentF)中孵育2分鐘小心移去切片上的清理液(ReagentF)小心加入200微升祛色液(ReagentH)在切片上,鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面室溫下孵育5分鐘小心移去祛色液(ReagentH)室溫下,小心將切片置入50毫升清理液(ReagentF)中孵育2分鐘小心移去切片上的清理液(ReagentF)小心加入200微升比氏液(ReagentK)在切片上,鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面室溫下孵育5分鐘(注意:可以延長(zhǎng)至15分鐘,增強(qiáng)染色效果)小心移去比氏液(ReagentK)小心加入200微升清理液(ReagentF)在切片上,鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面小心移去切片上的清理液(ReagentF)重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟29至30二次小心加入200微升酸性液(ReagentL)在切片上,鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面(注意:可以孵育15分鐘,增強(qiáng)染色效果)小心移去切片上的酸性液(ReagentL)小心加上200微升染色液(ReagentM)在切片上,鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面室溫下孵育5分鐘,避免光照(注意:可以延長(zhǎng)至15分鐘,增強(qiáng)染色效果)小心移去切片上的染色液(ReagentM)小心加上200微升修正液(ReagentN)在切片上,鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面室溫下孵育2分鐘小心移去切片上的修正液(ReagentN)室溫下,小心將切片置入50毫升清理液(ReagentF)中孵育2分鐘小心移去切片上的清理液(ReagentF)(選擇步驟)小心加上200微升脫水液B(ReagentC)在切片上,鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面(注意:如果比氏液(ReagentI)染色過(guò)深,建議使用由此步驟開(kāi)始的選擇步驟,并快速操作)(選擇步驟)小心移去切片上的脫水液B(ReagentC)(選擇步驟)小心加上200微升脫水液A(ReagentB)在切片上,鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面(選擇步驟)小心移去切片上的脫水液A(ReagentB)(選擇步驟)小心加上200微升脫蠟液(ReagentA)在切片上,鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面(選擇步驟)小心移去切片上的脫蠟液(ReagentA)放上蓋玻片或封片(中性樹(shù)脂)即刻在一般光學(xué)顯微鏡下觀(guān)察:彈性纖維――呈現(xiàn)黑色細(xì)胞核――呈現(xiàn)黑色細(xì)胞質(zhì)――呈現(xiàn)紅色肌纖維――呈現(xiàn)紅色角蛋白――呈現(xiàn)紅色膠原纖維――呈現(xiàn)藍(lán)色操作二:熱處理染色準(zhǔn)備3個(gè)50毫升燒杯或小型染色缸,分別加入50毫升清理液(ReagentF)、韋格液(ReagentG)和岑克液(ReagentI)小心放進(jìn)上述脫臘處理的切片到50毫升韋格液(ReagentG)小型染色缸里放進(jìn)微波爐(600瓦)加熱45秒小心移去切片上的韋格液(ReagentG)室溫下,小心將切片置入50毫升清理液(ReagentF)中孵育2分鐘小心移去切片上的清理液(ReagentF)小心加入200微升祛色液(ReagentH)在切片上,鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面室溫下孵育5分鐘小心移去祛色液(ReagentH)室溫下,小心將切片置入50毫升清理液(ReagentF)中孵育2分鐘小心移去切片上的清理液(ReagentF)小心將切片置入50毫升岑克液(ReagentI)小型染色缸里放進(jìn)微波爐(600瓦)加熱60秒小心移去岑克液(ReagentI)室溫下,小心將切片置入50毫升清理液(ReagentF)中孵育2分鐘小心移去切片上的清理液(ReagentF)小心加入200微升范氏液(ReagentJ)在切片上,鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面室溫下孵育30分鐘小心移去范氏液(ReagentJ)室溫下,小心將切片置入50毫升清理液(ReagentF)中孵育2分鐘小心移去切片上的清理液(ReagentF)小心加入200微升祛色液(ReagentH)在切片上,鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面室溫下孵育5分鐘小心移去祛色液(ReagentH)室溫下,小心將切片置入50毫升清理液(ReagentF)中孵育2分鐘小心移去切片上的清理液(ReagentF)小心加入200微升比氏液(ReagentK)在切片上,鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面室溫下孵育5分鐘(注意:可以延長(zhǎng)至15分鐘,增強(qiáng)染色效果)小心移去比氏液(ReagentK)小心加入200微升清理液(ReagentF)在切片上,鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面小心移去切片上的清理液(ReagentF)重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟30至31二次小心加入200微升酸性液(ReagentL)在切片上,鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面室溫下孵育10分鐘(注意:可以延長(zhǎng)至15分鐘,增強(qiáng)染色效果)小心移去切片上的酸性液(ReagentL)小心加上200微升染色液(ReagentM)在切片上,鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面室溫下孵育5分鐘,避免光照(注意:可以延長(zhǎng)至15分鐘,增強(qiáng)染色效果)小心移去切片上的染色液(ReagentM)小心加上200微升修正液(ReagentN)在切片上,鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面室溫下孵育1分鐘小心移去切片上的修正液(ReagentN)室溫下,小心將切片置入50毫升清理液(ReagentF)中孵育2分鐘小心移去切片上的清理液(ReagentF)(選擇步驟)小心加上200微升脫水液B(ReagentC)在切片上,鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面(注意:如果比氏液(ReagentI)染色過(guò)深,建議使用由此步驟開(kāi)始的選擇步驟,并快速操作)(選擇步驟)小心移去切片上的脫水液B(ReagentC)(選擇步驟)小心加上200微升脫水液A(ReagentB)在切片上,鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面(選擇步驟)小心移去切片上的脫水液A(ReagentB)(選擇步驟)小心加上200微升脫蠟液(ReagentA)在切片上,鋪滿(mǎn)整個(gè)切片樣品表面(選擇步驟)小心移去切片上的脫蠟液(ReagentA)放上蓋玻片或封片(中性樹(shù)脂)即刻在一般光學(xué)顯微鏡下觀(guān)察:彈性纖維――呈現(xiàn)黑色細(xì)胞核――呈現(xiàn)黑色細(xì)胞質(zhì)――呈現(xiàn)紅色肌纖維――呈現(xiàn)紅色角蛋白――呈現(xiàn)紅色膠原纖維――呈現(xiàn)藍(lán)色注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為50次操作操作時(shí),須戴手套試劑具有腐蝕性,注意操作安全建議使用玻璃染色缸每次更換試劑溶液時(shí),保持切片面基本晾干試劑溶液在切片表面時(shí),避免有氣泡存在,同時(shí)確保鋪滿(mǎn)切片表面整個(gè)操作,在避光狀態(tài)下進(jìn)行染色完成后,即刻進(jìn)行光學(xué)顯微鏡觀(guān)察樣品染色后保存,避免光照本公司提供系列特定組織染色試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定顯色清晰

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