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2018-10-23 10:30 651閱讀次數(shù)

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• elisa樣本處理和要求介紹

  DL-氫氯賴氨酸技術(shù)說(shuō)明級(jí)別：BR含量：≥99.0%DL-氫氯賴氨酸技術(shù)說(shuō)明性狀：白色或類白色結(jié)晶性粉末用途：生化研究保存：RT，避光DL-氫氯賴氨酸技術(shù)說(shuō)明英文名稱：DL-LysineHCL；DL-2,6-Diaminohexanoicacidmonohydrochloride；DL-Lysinemonohydrochloride其他名稱：DL-2，6-二氨基己酸鹽；DL-氫氯賴氨酸CAS號(hào)：70-53-1C6H14N2O2?HC1=182.65DL-氫氯賴氨酸技術(shù)說(shuō)明人抗EB病毒抗體elisa技術(shù),人EBV/elisa步驟說(shuō)明人可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA試劑盒中性粒細(xì)胞趨化蛋白2elisa技術(shù),大鼠NAP-2/CXCL7/elisa步驟說(shuō)明豚鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1elisa步驟說(shuō)明書(shū),(TGF-β1)elisa定量分析小鼠結(jié)蛋白elisa步驟說(shuō)明書(shū),小鼠Deselisa定量分析人丙酮酸激酶elisa技術(shù),人PK/elisa步驟說(shuō)明免疫球蛋白Aelisa步驟說(shuō)明書(shū),大鼠IgAelisa定量分析人甲狀腺過(guò)氧化物酶elisa技術(shù),人TPO/elisa步驟說(shuō)明人抗甲型肝炎病毒IgG抗體elisa步驟說(shuō)明書(shū),人anti-HAVelisa定量分析蘇云金芽孢桿菌蛋白elisa技術(shù),(BT)elisa步驟說(shuō)明小鼠神經(jīng)肽Yelisa技術(shù),小鼠NP-Y/elisa步驟說(shuō)明人胰島素樣生長(zhǎng)因子1elisa技術(shù),人IGF-1/elisa步驟說(shuō)明[詳細(xì)]

  2018-10-23 10:30

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• elisa樣本處理要求

  elisa樣本處理要求：廣銳生物-國(guó)內(nèi)高、優(yōu)Elisa試劑盒供應(yīng)商1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。2Elisa試劑盒樣本處理要求5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。elisa樣本處理要求人唾液酸elisa步驟說(shuō)明書(shū),人SAelisa原理肝脂酶elisa技術(shù),大鼠HL/elisa步驟說(shuō)明人軍團(tuán)菌抗體IgGelisa技術(shù),人LPAb-IgG/elisa步驟說(shuō)明人葉酸elisa步驟說(shuō)明書(shū),人FAelisa原理小鼠催乳素elisa步驟說(shuō)明書(shū),小鼠PRLelisa原理小鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)elisa試劑盒多巴胺D1受體elisa步驟說(shuō)明書(shū),大鼠D1Relisa原理人顆粒溶素elisa技術(shù),人granulysin/elisa步驟說(shuō)明大鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)elisa試劑盒人抗核糖體P蛋白抗體elisa步驟說(shuō)明書(shū),人ARPA/Rib-Pelisa原理人腺苷酸環(huán)化酶1elisa技術(shù),人AC-1/elisa步驟說(shuō)明小鼠白介素2可溶性受體β鏈elisa步驟說(shuō)明書(shū),小鼠IL-2sRβelisa原理人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶elisa步驟說(shuō)明書(shū),人TPelisa原理人纖溶酶/纖維蛋白溶酶elisa步驟說(shuō)明書(shū),人PL/Fbnelisa原理elisa樣本處理要求[詳細(xì)]

  2018-10-23 10:30

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 樣本處理及要求植物ELISA試劑盒

  樣本處理及要求植物ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2015-04-21 00:00

  實(shí)驗(yàn)操作

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• 大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子試劑盒樣本處理及要求

  大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子試劑盒樣本處理及要求[詳細(xì)]

  2015-02-28 00:00

  報(bào)價(jià)單

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• 白細(xì)胞介素8（IL-8）elisa樣本處理方法

  白細(xì)胞介素8（IL-8）elisa樣本處理方法廣銳生物-國(guó)內(nèi)高、優(yōu)Elisa試劑盒供應(yīng)商樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。白細(xì)胞介素8（IL-8）elisa樣本處理方法雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中兔白細(xì)胞介素8（IL-8）水平。用純化的兔白細(xì)胞介素8（IL-8）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入白細(xì)胞介素8（IL-8），再與HRP標(biāo)記的白細(xì)胞介素8（IL-8）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞介素8（IL-8）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中兔白細(xì)胞介素8（IL-8）濃度。白細(xì)胞介素8（IL-8）elisa樣本處理方法[詳細(xì)]

  2018-10-23 10:30

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 油質(zhì)結(jié)果分析及處理要求

  油質(zhì)結(jié)果分析及處理要求[詳細(xì)]

  2013-07-02 00:00

  課件

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• 白帶樣本前處理

  白帶樣本前處理[詳細(xì)]

  2024-09-28 00:15

  應(yīng)用文章

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• 大鼠內(nèi)皮型NO合酶ELISA試劑盒樣本處理

  大鼠內(nèi)皮型NO合酶ELISA試劑盒樣本處理[詳細(xì)]

  2015-03-25 00:00

  實(shí)驗(yàn)操作

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• 導(dǎo)尿管表面潤(rùn)滑性處理方法和摩擦系數(shù)測(cè)試方法介紹

  導(dǎo)尿管表面潤(rùn)滑性處理方法和摩擦系數(shù)測(cè)試方法介紹[詳細(xì)]

  2024-09-16 18:47

  操作手冊(cè)

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• 快速檢測(cè)樣本前處理

  1．粉碎用絞肉機(jī)、磨粉機(jī)、糧谷粉碎機(jī)等將塊狀的或顆粒較大的動(dòng)植物樣本細(xì)化的過(guò)程。目的是增大樣本表面積，有利于待測(cè)組分的提取。2．提取是使待測(cè)組分與樣品分離的過(guò)程。提取的方法較多，有靜置法、勻漿法、振蕩提取法、專用裝置提取法等?，F(xiàn)將常用的提取方法簡(jiǎn)要介紹如下。組織搗碎法是食品檢測(cè)中Z常用的一種提取方法，將經(jīng)粉碎的樣品與等量或數(shù)倍于其體積的溶劑混合，通過(guò)高速旋轉(zhuǎn)的葉片（100[）（]r／min）將樣本中的待測(cè)組分與溶劑有充分的接觸機(jī)會(huì)，使待測(cè)組分被提取出來(lái)。該方法提取效率高。使用的主要設(shè)備有高速組織搗碎機(jī)、組織勻漿機(jī)、高速均質(zhì)器等。在AOAc農(nóng)藥殘留量分析中幾乎都采用組織搗碎法提取，每次提取的時(shí)間約為3～5min，次數(shù)1～2次。在本操作過(guò)程中，需要注意以下事項(xiàng)：試樣和溶劑的總體積不應(yīng)該超過(guò)搗碎缽容積的2／3，以免內(nèi)容物濺出；搗碎機(jī)的旋轉(zhuǎn)速度，一般是先慢后快；整個(gè)操作要在通風(fēng)良好的環(huán)境下進(jìn)行。索氏提取法也是食品檢測(cè)中Z常用的提取方法之一。此法通過(guò)專用裝置索氏提取器提取待測(cè)組分，提取效率高，操作簡(jiǎn)便，但提取時(shí)間長(zhǎng)。采用索氏提取法時(shí)，應(yīng)充分考慮待測(cè)組分的熱穩(wěn)定性。振蕩法在食品檢測(cè)中也較為常用。即將裝有試樣和提取溶劑的具塞容器，放在振蕩機(jī)上，進(jìn)行往返振蕩或旋轉(zhuǎn)振蕩，使容器內(nèi)的提取溶劑與試樣充分接觸，以深入到樣本組織內(nèi)部提取待測(cè)組分。一般情況下，振蕩10~30min，重復(fù)提取2～3次。據(jù)報(bào)道，振蕩法與組織搗碎法和索氏提取法的提取效率相當(dāng)。日本的食品分析方法中幾乎都采用振蕩法。超臨界流體萃取儀、強(qiáng)化溶劑萃取儀是近二十年來(lái)發(fā)展起來(lái)的提取技術(shù)。另外還有一些輔助手段，如超聲波輔助提取、微波輔助提取等。3．凈化經(jīng)過(guò)提取的待測(cè)組分，提取物中通常含有與該組分結(jié)構(gòu)相似的雜質(zhì)，將待測(cè)組分與雜質(zhì)分離的過(guò)程，稱為凈化。該步驟是樣本前處理的技術(shù)難點(diǎn)，也是關(guān)系到檢測(cè)結(jié)果的真實(shí)性及檢測(cè)方法可靠性的重要步驟。主要方法有固相萃取法、液一液分配法、化學(xué)處理法、掃集共蒸餾法、低溫冷凍凈化法、前置色譜柱凈化法等。固相萃取法是目前應(yīng)用Z多的凈化方法之一，通過(guò)吸附柱、分配柱、凝膠滲透柱、薄層板等實(shí)現(xiàn)，其原理是樣本的待測(cè)組分在層析柱中吸附劑上被吸附與被解吸的反復(fù)過(guò)程。常用的吸附劑有佛羅里硅土、氧化鋁、活性炭、硅膠、氧化鎂和纖維素等。液一液分配法也是一種十分常用的凈化方法，其原理是利用待測(cè)組分在一組互不相溶的溶劑對(duì)內(nèi)的分配系數(shù)不同，通過(guò)反復(fù)多次分配，使待測(cè)組分與雜質(zhì)分離，以達(dá)到凈化目的。常用的溶劑對(duì)有乙腈提取液的正已烷分配、乙腈提取液的分配、丙酮提取液的石油醚分配、丙酮提取液的二氯甲烷分配等。4．濃縮由于凈化過(guò)程所引入的溶劑，可能會(huì)降低待測(cè)組分的濃度或不適宜直接進(jìn)樣，需要去除部分或全部溶劑及進(jìn)行溶劑轉(zhuǎn)換，此過(guò)程為濃縮或富集。主要通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器蒸干或惰性氣體（如氮?dú)猓┐蹈沙ト軇?a href="/doc/detail_9d1812e5e5a90bff.html" target="_blank">[詳細(xì)]

  2018-09-11 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 動(dòng)物組織樣本的前處理

  動(dòng)物組織樣本的前處理[詳細(xì)]

  2024-10-08 05:23

  安裝說(shuō)明

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• 植物組織樣本的前處理

  植物組織樣本的前處理[詳細(xì)]

  2024-10-08 05:23

  實(shí)驗(yàn)操作

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• 連接器規(guī)范和測(cè)試要求

  接器和要求接器依照其品功能和使用境，要求分四大部分1.要求2.械要求3.境要求4.保要求具體可以下載附件毫克儀器提供成套連接器檢測(cè)設(shè)備：連接器插拔力試驗(yàn)機(jī)，插拔壽命試驗(yàn)機(jī)，高低溫試驗(yàn)箱，平整度測(cè)試儀，截面分析儀等[詳細(xì)]

  2018-09-26 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 快速檢測(cè)樣本前處理.pdf

  快速檢測(cè)樣本前處理.pdf[詳細(xì)]

  2008-12-30 00:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 產(chǎn)品樣本＿機(jī)器人樣品處理技術(shù)

  產(chǎn)品樣本＿機(jī)器人樣品處理技術(shù)[詳細(xì)]

  2003-11-05 00:00

  標(biāo)準(zhǔn)

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• 人ASD試劑盒樣本處理方法

  人雄烯二酮(ASD)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒實(shí)驗(yàn)?zāi)康模罕驹噭┖袃H供研究使用，用于測(cè)定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中雄烯二酮(ASD)的含量。DrugNamesGenericName：HumanAndrostenedione(ASD)ELISAKit.PurposeThiskitallowsforthedeterminationofASDconcentrationsinHumanserum,bloodplasma,andotherbiologicalfluids.樣本處理方法：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。Specimenrequirementsserum-coagulationatroomtemperature10-20mins，centrifugation20-minatthespeedof2000-3000r.p.m.removesupernatant,Ifprecipitationappeared,Centrifugalagain.plasma-usesuitedEDTAorcitrateplasmaasananticoagulant,mix10-20mins,centrifugation20-minatthespeedof2000-3000r.p.m.removesupernatant,Ifprecipitationappeared,Centrifugalagain.Urine-collectsueasterilecontainer,centrifugation20-minatthespeedof2000-3000r.p.m.removesupernatant,Ifprecipitationappeared,Centrifugalagain.TheOperationofHydrothoraxandcerebrospinalfluidReferencetoit.cellculturesupernatant-detectsecretorycomponents,collectsueasterilecontainer,centrifugation20-minatthespeedof2000-3000r.p.m.removesupernatant,detectthecompositionofcells,DilutcellsuspensionwithPBS（PH7.2-7.4）,Cellconcentrationreached1million/ml,repeatedfreeze-thawcycles,damagecellsandreleaseofintracellularcomponents,centrifugation20-minatthespeedof2000-3000r.p.m.removesupernatant,Ifprecipitationappeared,Centrifugalagain.Tissuesamples-Aftercuttingsamples,checktheweight,addPBS（PH7.2-7.4）,Rapidlyfrozenwithliquidnitrogen,maintainsamplesat2-8℃aftermelting,addPBS（PH7.4）,HomogenizedbyhandorGrinders,centrifugation20-minatthespeedof2000-3000r.p.m.removesupernatant.extractassoonaspossibleafterSpecimencollection,andaccordingtotherelevantliterature,and首ldbeexperimentassoonaspossibleaftertheextraction.Ifitcan’t,specimencanbekeptin-20℃topreserve,Avoidrepeatedfreeze-thawcycles.Can’tdetectthesamplewhichcontainNaN3,becauseNaN3inhibitsHRPactive.上海華壹生物科技有限公司ShanghaiHuaYiBio-technologyCo.,Ltd電話：021-24209195，021-24209192，13661674336[詳細(xì)]

  2018-11-15 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• ELISA試劑盒檢測(cè)樣本的原理和步驟

  ELISA試劑盒檢測(cè)樣本的原理和步驟標(biāo)本：細(xì)胞液、體液以及組織勻漿使用說(shuō)明書(shū)產(chǎn)品編號(hào)：E01H0019本試劑盒僅供科研使用，不得用于臨床及診斷使用！預(yù)期應(yīng)用ELISA試劑盒定量檢測(cè)人細(xì)胞液、體液以及組織勻漿中8羥基脫氧鳥(niǎo)苷的含量。自備物品1.酶標(biāo)儀（盡量提前預(yù)熱）2.微量加液器、吸頭3.蒸餾水或去離子水以及濾紙樣本的采集及保存一般的生物標(biāo)本包括有：血液、體液、內(nèi)臟器官、糞便、胃液、活檢組織、組織提取液、天然孔分泌物及各種表達(dá)系統(tǒng)的表達(dá)產(chǎn)物等一般為無(wú)菌操作，低溫保存（-80℃、液氮）一．如果采集的實(shí)質(zhì)器官則要求：1、器官實(shí)質(zhì)不能太小2、以采集實(shí)質(zhì)性病灶區(qū)為佳：如淋巴結(jié)、心臟、非、肺、脾以及腸管等病毒、病菌聚集的地方為佳3、同一病例裝入同一容器，并做好標(biāo)記4、應(yīng)在0-8℃的低溫儲(chǔ)存和運(yùn)輸5、實(shí)質(zhì)性器官的處理：5.1、取實(shí)質(zhì)性器官約0.5mg左右，充分剪碎或研磨5.2、加入約500ul的PBS/生理鹽水，充分混勻5.3、離心5000rmpx10min，去上清5.4、-20℃保存，作為待檢標(biāo)本（切勿反復(fù)凍融）二．體液（常見(jiàn)的包括血清、血漿、唾液以及尿液等）的處理方式1、血液包括血漿和血清它們的主要區(qū)別就是：血清凝血而血漿不凝血，所以它們的處理方式也就不一樣1.1、采集血漿時(shí)一般不加抗凝劑（主要為枸櫞酸鹽和檸檬酸鹽），采集后立即離心800-1000rmpx5min分離，取上清，-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?.2、如要采集血清，一般要加入總體積1%的抗凝劑，采集后先室溫或4℃靜置半小時(shí)后，800-1000rmpx5min分離，取上清，-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?、胃液和唾液的采集方式一般現(xiàn)采現(xiàn)用，但是一般飯后半小時(shí)內(nèi)不易采集，因?yàn)閯傔M(jìn)食的唾液中富含豐富的唾液淀粉酶，**的采集的時(shí)間時(shí)空腹采集；3、尿液的采集方式基本和唾液一樣的，即現(xiàn)采現(xiàn)用，但是一般隔夜尿不采集；4、組織提取液如肺泡灌洗液等，采集后離心分離，800-1000rmpx5min，取上清，-20℃或4℃保存?zhèn)溆?；三．糞便以及天然孔排泄物：采集后一般現(xiàn)用PBS/生理鹽水溶解，充分混勻，800-1000rmpx5min分離，取上清，-20℃或4℃保存?zhèn)溆?；四．活檢組織一般進(jìn)行穿刺檢測(cè)，Z常見(jiàn)的就是肝活檢，像病毒性肝炎、脂肪肝、各種類型的肝硬化等進(jìn)行活檢簡(jiǎn)單方便、準(zhǔn)確。三、表達(dá)產(chǎn)物的檢測(cè)（一）真核表達(dá)產(chǎn)物1、細(xì)胞上清（分泌性蛋白）1.2、貼壁細(xì)胞或半貼壁，直接將細(xì)胞培養(yǎng)上清吸出，10000rmpx10min，取上清，-20℃或4℃保存，作為標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，如有需要可進(jìn)行透析或純化處理；1.2、不貼壁細(xì)胞，將培養(yǎng)基和細(xì)胞轉(zhuǎn)移至10ml離心管，500-800rmpx10min，吸取上清至另一10ml離心管中，10000rmpx10min，-20℃或4℃保存，作為標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，如有需要可進(jìn)行透析或純化處理；2、細(xì)胞裂解物（非分泌性蛋白）2.1、貼壁細(xì)胞或半貼壁，直接將細(xì)胞培養(yǎng)上清吸出，然后用001MPBS（pH7.4）將細(xì)胞吹下至10ml離心管，500-800rmpx10min，棄上清，沉淀轉(zhuǎn)移至1.5ml離心管中，DDW重懸，置冰水浴中用超聲波裂解儀進(jìn)行裂解，10000rmpx10min，取上清，-20℃或4℃保存，作為標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，如有需要可進(jìn)行透析或純化處理；2.2、不貼壁細(xì)胞，將培養(yǎng)基和細(xì)胞轉(zhuǎn)移至10ml離心管，500-800rmpx10min，棄上清，沉淀移至另一10ml離心管中，0.01MPBS（pH7.4）重懸，500-800rmpx10min，棄上清，沉淀移至1.5ml離心管中，DDW重懸，置冰水浴中用超聲波裂解儀進(jìn)行裂解，10000rmpx10min，取上清，-20℃或4℃保存，作為標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，如有需要可進(jìn)行透析或純化處理；（二）原核（大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)）表達(dá)產(chǎn)物1、表達(dá)上清（非融合性蛋白）直接將培養(yǎng)物和上清吸出，10000rmpx10min，取上清，-20℃或4℃保存，作為標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，如有需要可進(jìn)行透析或純化處理；2、菌體裂解物（融合性蛋白）直接將培養(yǎng)物和上清吸出，10000rmpx10min，棄上清，沉淀用PBS洗一遍，500-800rmpx10min，棄上清，DDW重懸沉淀，冰水浴中用超聲波裂解儀進(jìn)行裂解，10000rmpx10min，取上清，-20℃或4℃保存，作為標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，如有需要可進(jìn)行透析或純化處理；ELISA試劑盒注意事項(xiàng)1.試劑準(zhǔn)備：所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫，使用后請(qǐng)立即按照說(shuō)明書(shū)要求保存。實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。2．加樣：加樣時(shí)，要控制加樣速度，避免**孔與Z后一孔之見(jiàn)的時(shí)間間隔過(guò)大，否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間，從而影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性；一般加樣時(shí)間控制在10分鐘內(nèi)，如果樣本數(shù)量過(guò)多，可使用多道移液器。3.孵育：樣品要在密閉的容器內(nèi)進(jìn)行孵育，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。4.洗滌：洗滌過(guò)程中反應(yīng)孔中的殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指痕跡，避免影響Z后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。5.反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化（比如，10分鐘左右），如果顏色較深，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。6.建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量如樣品濃度過(guò)高，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。7.建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，SY幾個(gè)標(biāo)本），如果對(duì)本試劑盒有任何疑問(wèn)，可和所購(gòu)經(jīng)銷商聯(lián)系，如果因運(yùn)輸過(guò)程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。操作步驟1.取出試劑盒，于室溫（20-25℃）放置15-30分鐘。實(shí)驗(yàn)過(guò)程應(yīng)在室溫（20-25℃）內(nèi)進(jìn)行。2.取出酶標(biāo)板，按照標(biāo)準(zhǔn)品的次序分別加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中。3.空白微孔中加入50μl的樣品，空白對(duì)照加入50μl的蒸餾水；4.在樣品孔中加入10μl的生物素；（不含空白對(duì)照孔,切忌：生物素只加樣品孔?。?.在各孔中加入100μl的酶標(biāo)記溶液；（不含空白對(duì)照孔）6.將酶標(biāo)板用封口膠密封后，37℃孵育反應(yīng)1小時(shí)；（在孵育箱中保持穩(wěn)定的溫度與濕度）7.充分清洗酶標(biāo)板3-5次，保持各孔有充足的水壓；（濃縮洗滌液以1：100的比例與蒸餾水稀釋）8.酶標(biāo)板洗滌后用吸水紙徹底拍干；9.各孔加入顯色劑A、B液各50μl；（不含空白對(duì)照孔）10.20-25℃下避光反應(yīng)15分鐘；11.各孔加入50μl終止液，終止反應(yīng)；ELISA試劑盒結(jié)果判斷1.30分鐘內(nèi)在波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值；2.以O(shè)D值為縱坐標(biāo)，以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)，繪制曲線圖；3.根據(jù)樣品的OD值查找對(duì)應(yīng)的濃度范圍；4.敏感度：0.1ng/ml[詳細(xì)]

  2018-09-14 10:01

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