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人NADPH氧化酶1elisa試劑盒使用方法
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本文由 上海易利生物科技有限公司 整理匯編
2018-12-30 10:00 202閱讀次數(shù)
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本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T0.3μmol/L-16μmol/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中的NADPH氧化酶1(NOX1)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人NADPH氧化酶1(NOX1)水平。用純化的人的NADPH氧化酶1(NOX1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入NADPH氧化酶1(NOX1),再與HRP標(biāo)記的NADPH氧化酶1(NOX1)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的NADPH氧化酶1(NOX1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人NADPH氧化酶1(NOX1)濃度。
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人NADPH氧化酶1elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T0.3μmol/L-16μmol/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中的NADPH氧化酶1(NOX1)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人NADPH氧化酶1(NOX1)水平。用純化的人的NADPH氧化酶1(NOX1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入NADPH氧化酶1(NOX1),再與HRP標(biāo)記的NADPH氧化酶1(NOX1)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的NADPH氧化酶1(NOX1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人NADPH氧化酶1(NOX1)濃度。[詳細(xì)]
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2018-12-30 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人NADPH氧化酶elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T0.3U/L8U/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中NADPH氧化酶(NADPH-oxidase)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人NADPH氧化酶(NADPH-oxidase)水平。用純化的人NADPH氧化酶(NADPH-oxidase)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入NADPH氧化酶(NADPH-oxidase),再與HRP標(biāo)記的NADPH氧化酶(NADPH-oxidase)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的NADPH氧化酶(NADPH-oxidase)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人NADPH氧化酶(NADPH-oxidase)濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠 NADPH氧化酶酶聯(lián)免疫分析(ELISA)
- www.biokanu.com大鼠NADPH氧化酶酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本試劑盒僅供研究使用。藥品名稱:通用名:大鼠NADPH氧化酶酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用目的:本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中NADPH氧化酶含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠NADPH氧化酶水平。用純化的大鼠NADPH氧化酶抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入NADPH氧化酶,再與HRP標(biāo)記的NADPH氧化酶抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的NADPH氧化酶呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠NADPH氧化酶濃度。試劑盒組成120倍濃縮洗滌液30ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(9U/ml)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說(shuō)明書(shū)1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為6U/ml,4U/ml,2U/ml,1U/ml,0.5U/ml)。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。檢測(cè)范圍:0.1U/ml-8U/ml規(guī)格:96人份/盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)胞NADPH氧化酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒
- 主要用途細(xì)胞NADPH氧化酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用化學(xué)發(fā)光分子光澤精受到NADPH氧化酶催化產(chǎn)生的超氧陰離子O2-的還原,然后在其還原過(guò)程中釋放能量,由此測(cè)定樣品中特異性氧化還原酶(oxidoreductase)的活性,即采用發(fā)光探測(cè)儀(Luminometer)測(cè)定其相對(duì)冷光單位(RLU)的變化,以此進(jìn)行測(cè)算酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種細(xì)胞樣品(動(dòng)物或人體)還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NADPH氧化酶)的特異活性檢測(cè)。用于免疫、血液研究、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測(cè)敏感。技術(shù)背景NADPH氧化酶,通常稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(reducednicotinamideadeninedinucleotidephosphateoxidase;NADPHoxidase;EC1.6.3.1)或還原型輔酶II氧化酶,是機(jī)體防御機(jī)制中的重要元素。NADPH氧化酶由6個(gè)亞體構(gòu)成:RhoGTP酶(Rhoguanosinetriphosphatase)和5個(gè)phox(吞噬細(xì)胞氧化酶;phagocyticoxidase)。其中主要包含細(xì)胞膜嵌合蛋白質(zhì)分子(gp91phox、p22phox、flavocytochromeb558等),以及位在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的蛋白質(zhì)分子(p47phox、p67phox、p40phox、Rac1、Rac2等)。其Z特征性的酶活性是超氧化物歧化酶敏感的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶。細(xì)胞膜上的NADPH氧化酶被激活,將還原型輔酶Ⅱ(NADPH)轉(zhuǎn)變?yōu)檠趸洼o酶Ⅱ(NADP),氧分子則獲得電子形成超氧陰離子O2-,由O2-又可生成H2O2和OH-。其超氧陰離子產(chǎn)物具有殺死微生物的功能。NADPH氧化酶異常將導(dǎo)致慢性肉芽腫?。–hronicGranulomatousDisease;CGD)。基于底物NADPH,受到NADPH氧化酶的催化作用,產(chǎn)生超氧陰離子O2-,進(jìn)而超氧陰離子將化學(xué)發(fā)光分子光澤精(lucigenin)還原,并釋放能量,通過(guò)發(fā)光探測(cè)儀(Luminometer;470nm波長(zhǎng))檢測(cè),來(lái)測(cè)定NADPH氧化酶的活性。其反應(yīng)方式為:[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激酶1elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T7.5pmol/L-240pmol/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激酶1(Rock-1)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激酶1(Rock-1)水平。用純化的人Rock-1抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入Rock-1,再與HRP標(biāo)記的Rock-1抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人Rock-1呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人Rock-1濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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組織NADPH氧化酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 組織NADPH氧化酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2015-01-21 00:00
選購(gòu)指南
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細(xì)胞NADPH氧化酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 細(xì)胞NADPH氧化酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2015-01-07 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
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大鼠二胺氧化酶(DAO)試劑盒使用方法
- 檢測(cè)范圍:96T25IU/L-800IU/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中二胺氧化酶(DAO)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠二胺氧化酶(DAO)水平。用純化的大鼠二胺氧化酶(DAO)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入大鼠二胺氧化酶(DAO),再與HRP標(biāo)記的二胺氧化酶(DAO)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的二胺氧化酶(DAO)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠二胺氧化酶(DAO)濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
- 人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2015-04-22 00:00
操作手冊(cè)
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大鼠二胺氧化酶(DAO)elisa試劑盒使用方法
- 大鼠二胺氧化酶(DAO)elisa試劑盒使用方法[詳細(xì)]
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2024-09-28 17:40
專利
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人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA試劑盒
- 人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-28 14:24
標(biāo)準(zhǔn)
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人β防御素-1ELISA 檢測(cè)試劑盒檢測(cè)報(bào)告
- 人(Human)β防御素-1(β-defensins-1)ELISA檢測(cè)試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿試驗(yàn)原理:β-defensins-1試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知β-defensins-1濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將β-defensins-1和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中β-defensins-1的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品:800pg/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀稀空白對(duì)照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標(biāo)記的抗β-defensins-1抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標(biāo)本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。人(Human)β防御素-1(β-defensins-1)ELISA檢測(cè)試劑盒安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。2.實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項(xiàng)1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。9.按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液5、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備1.標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋?xiě)?yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:800pg/ml(6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。400pg/ml(5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液200pg/ml(4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100pg/ml(3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50pg/ml(2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25pg/ml(1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0pg/ml(空白對(duì)照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。人(Human)β防御素-1(β-defensins-1)ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。9.在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。建議使用的實(shí)驗(yàn)方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度(pg/ml)A800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F2525樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。人(Human)β防御素-1(β-defensins-1)ELISA檢測(cè)試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的β-defensins-1標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的β-defensins-1含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/ml[詳細(xì)]
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2018-09-19 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人(sICAM-1)說(shuō)明書(shū),人可溶性細(xì)胞間粘附分子1Elisa試劑盒
- 人(sICAM-1)說(shuō)明書(shū),人可溶性細(xì)胞間粘附分子1Elisa試劑盒雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)水平。用純化的人sICAM-1抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1),再與HRP標(biāo)記的羊抗人抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)濃度。人(sICAM-1)說(shuō)明書(shū),人可溶性細(xì)胞間粘附分子1Elisa試劑盒操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為360ng/L,240ng/L,120ng/L,60ng/L,30ng/L)。加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。人(sICAM-1)說(shuō)明書(shū),人可溶性細(xì)胞間粘附分子1Elisa試劑盒人β2糖蛋白1抗體IgA/G/M含量(β2-GP1IgA/G/M)ELISA試劑盒步驟Rabbitanti-glycoproteinantibody,GPELISAKit96T/48T,HumanEpinephrine/Adrenaline,EPIELISAKit96T/48T,察氏瓊脂,250g培養(yǎng)基察氏瓊脂價(jià)格Ratovariancancermarker-CA125ELISAKit96T/48T,RatPlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptorα,PDGFsR-αELISAkit96T/48T,小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M復(fù)孔(β2-GP1IgA/G/M)夾心ELISA檢測(cè)試劑盒Humanleukocyteexastase,HLEELISAKit96T/48T,Humancholineacetylase,CHAcELISAKit96T/48T,HumanLipoarabinomannan,LAMELISAKit96T/48T,人中期因子檢測(cè)復(fù)孔(MK)ELISA試劑盒品牌Mousetumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,TRAILR3ELISAKit96T/48T,HumanHepatitisCvirusIgG,HCV-IgGELISAKit96T/48T,高鹽察氏瓊脂,250g培養(yǎng)基高鹽察氏瓊脂價(jià)格RatCaspase-9,Casp-9ELISAKit96T/48T,Humannonsmallcelllungcancer/LungtumorAntigen,LTAELISAKit96T/48T,HumanATP-bindingcassettetransporterA1,ABCA1ELISAKit96T/48T,Humanalpha-fetoproteinLensculinarisagglutiin2,AFP-L2ELISAKit96T/48T,豬載脂蛋白B100復(fù)孔(apo-B100)夾心ELISA檢測(cè)試劑盒犬乙酰膽堿受體抗體檢測(cè)復(fù)孔(AChRab)ELISA試劑盒品牌HumanVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor,vaspinELISAKit96T/48T,人腎病蛋白檢測(cè)原理(nephrin)ELISA試劑盒步驟RatphosphatidylinositolantibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISAKit96T/48T,小鼠細(xì)胞周期素D1檢測(cè)原理(Cyclin-D1)夾心ELISA檢測(cè)試劑盒小鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽復(fù)孔(PⅢNT)夾心ELISA檢測(cè)試劑盒馬鈴薯浸出粉,BR培養(yǎng)基馬鈴薯浸出粉價(jià)格MousehepatitisBvirussurfaceantigen,HBsAgELISAKit96T/48T,RabbitComplement4,C4ELISAKit96T/48T,人抗卵巢抗體檢測(cè)原理(AOAb)ELISA試劑盒步驟人(sICAM-1)說(shuō)明書(shū),人可溶性細(xì)胞間粘附分子1Elisa試劑盒[詳細(xì)]
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2018-10-23 10:30
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人谷胱甘肽過(guò)氧化酶(GSH-Px)檢測(cè)試劑盒
- 人谷胱甘肽過(guò)氧化酶(GSH-Px)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2015-03-17 00:00
其它
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人血紅素氧化酶(HO-1)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 人血紅素氧化酶(HO-1)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人HO-1(Thrombopoietin)單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的HO-1與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人HO-1,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液,在450nm處測(cè)OD值,HO-1濃度與OD值成正比,可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中HO-1濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):40ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成40ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,每管加入標(biāo)本稀釋液300ul。在**管中加入40ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品20、10、5、2.5、1.25、0.625、0.312、0ng/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)HO-1含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的HO-1檢測(cè)濃度小于0.16ng/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人HO-1。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于10%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人HLA-DPB1elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T0.8pg/ml-35pg/ml使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中HLA-DPB1含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人HLA-DPB1水平。用純化的人HLA-DPB1抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入HLA-DPB1,再與HRP標(biāo)記的HLA-DPB1抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的HLA-DPB1呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人HLA-DPB1濃度。[詳細(xì)]
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2018-09-19 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人GQ1b-Abelisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T3.5pg/ml-200pg/ml使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中GQ1b-Ab含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中人GQ1b-Ab水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入GQ1b-Ab,再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的GQ1b-Ab呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人GQ1b-Ab濃度。[詳細(xì)]
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2018-09-19 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人MACROD1elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T1.2pg/ml-40pg/ml使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中MACROD1含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人MACROD1水平。用純化的人MACROD1抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入MACROD1,再與HRP標(biāo)記的MACROD1抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的MACROD1呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人MACROD1濃度。[詳細(xì)]
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2018-09-19 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人Ephrin-B2elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T12pg/ml-480pg/ml使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中Ephrin-B2(EFNB2)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人Ephrin-B2(EFNB2)水平。用純化的人Ephrin-B2(EFNB2)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入Ephrin-B2(EFNB2),再與HRP標(biāo)記的Ephrin-B2(EFNB2)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的Ephrin-B2(EFNB2)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人Ephrin-B2(EFNB2)濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人DCCelisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T22pg/ml-800pg/ml使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中DCC含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人DCC水平。用純化的人DCC抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入DCC,再與HRP標(biāo)記的DCC抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的DCC呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人DCC濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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