本文由 研域（上海）化學試劑有限公司 整理匯編

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• 酶聯(lián)免疫吸附檢測法（ELISA）測定植物激素含量

  酶聯(lián)免疫吸附檢測法（ELISA）測定植物激素含量一、原理植物激素（planthormone）免疫定量主要有放射免疫分析（RIA）和酶聯(lián)吸附免疫分析（ELISA），由于前者操作上欠安全等原因，目前常采用后一種類型。在ELISA中，抗原抗體反應的檢測依靠酶標記物來實現(xiàn)，常用的酶有辣根過氧化物酶和堿性磷酸酯酶。酶可直接標記激素分子，稱為酶標植物激素，也可標記于第二抗體（識別抗激素抗體Fc片段的抗體或金黃色葡萄球菌A蛋白），稱為酶標二抗。這兩類標記物分別用于固相抗體型和固相抗原型ELISA。A.固相抗體型ELISA：將抗激素的單克隆抗體（Mab）與已吸附于固相載體上的兔抗鼠Ig抗體（RAMIG）結合，然后加入激素標準品或待測樣品，使其與固相化的Mab結合，再加入辣根過氧化物酶（HRP）標記激素（酶標激素）。通過測定酶標激素的被結合量，可換算出未知樣品中激素的數(shù)量。B.固相抗原型ELISA：將“激素-蛋白”復合物（該蛋白應不同于免疫原中的載體蛋白）包被于固相載體，加入待測激素（樣品或標準品）和抗IAA多克隆抗體（Pab）反應，進行競爭反應。然后讓HRP標記羊抗兔Ig抗體（HRP-GARIG）與結合在固相上的Pab反應，通過測定與固相結合的酶量，換算出未知樣品中激素的含量。二、材料、儀器設備及試劑（一）材料：高等植物、真菌、藻類等組織或器官。（二）儀器設備：1.酶聯(lián)免疫檢測儀；2.高速冷凍離心機；3.恒溫箱；4.連續(xù)進樣器；5.渦旋儀；6.96孔微孔板；7.離心管；8.研缽或勻漿器；9.試管。（三）試劑1.洗滌緩沖液：0.01mol/LpH7.4磷酸緩沖液（PBS），含0.05％Tween-0；2.RAMIG溶液，或“激素-蛋白”復合物；3.0.1％封閉蛋白（該蛋白應不同于免疫原中的載體蛋白）；4.抗激素Mab，或Pab；5.激素標準品母液，及參比系列溶液（按雙倍或四倍系列稀釋）；6.HRP標記激素，或HRP-GARIG；7.鄰苯二胺（OPD）基質液：5mgOPD溶于12.5ml0.01mol/LpH5.0PBS，用前加入30％H2O212.5μl。三、實驗步驟固相抗體型elisa。1.用方陣法滴定選擇各反應物Z適工作濃度；2.將100μlRAMIG溶液包被聚苯乙烯反應板微孔，4℃濕盒，12h；3.棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗滌3次，甩干；4.加入100μl抗激素Mab溶液，37℃70min；[詳細]

  2018-09-14 10:01

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• 酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測霉菌毒素

  酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測霉菌毒素[詳細]

  2024-09-15 13:40

  標準

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• 白介素6（IL6）檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫吸附試驗法）

  白介素6（IL6）檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫吸附試驗法）[詳細]

  2018-10-01 10:01

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• 白介素8（IL8）檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫吸附試驗法）

  白介素8（IL8）檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫吸附試驗法）[詳細]

  2018-10-01 10:01

  產品樣冊

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• 植物激素脫落酸（ABA）ELISA 檢測試劑盒說明書

  植物激素脫落酸（ABA）ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用試驗原理：植物激素脫落酸（ABA）ELISA檢測試劑盒ABA試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知ABA濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將ABA和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中ABA的濃度呈比例關系。試劑盒內容及其配制：植物激素脫落酸（ABA）ELISA檢測試劑盒試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品：40nmol/L1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進行稀稀空白對照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標準品稀釋緩沖液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素標記的抗ABA抗體1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說明書進行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型標本稀釋液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自備材料蒸餾水。加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項:植物激素脫落酸（ABA）ELISA檢測試劑盒試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法:植物激素脫落酸（ABA）ELISA檢測試劑盒血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：40nmol/L（6號標準品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。20nmol/L（5號標準品）100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液10nmol/L（4號標準品）100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液5.0nmol/L（3號標準品）100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液2.5nmol/L（2號標準品）100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液1.25nmol/L（1號標準品）100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0nmol/L（空白對照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。操作步驟:植物激素脫落酸（ABA）ELISA檢測試劑盒使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內。加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案:植物激素脫落酸（ABA）ELISA檢測試劑盒標準品濃度（nmol/L）A4040樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B2020樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C1010樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D5.05.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E2.52.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F1.251.25樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標準品以上的結果為非線性的，根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結果。試劑盒性能：植物激素脫落酸（ABA）ELISA檢測試劑盒1.靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細胞因子反應。3.重復性：板內、板間變異系數(shù)均小于10%。結果判斷與分析:植物激素脫落酸（ABA）ELISA檢測試劑盒1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的ABA標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的ABA含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍：0-40nmol/L4、敏感度：0.1nmol/L[詳細]

  2018-09-27 10:00

  產品樣冊

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• 酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA） 全套解決方案

  酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA） 全套解決方案[詳細]

  2024-09-16 12:05

  專利

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• 植物激素脫落酸(ABA)ELISA試劑盒

  植物激素脫落酸(ABA)ELISA試劑盒[詳細]

  2015-04-22 00:00

  應用文章

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• 植物激素脫落酸(ABA)ELISA Kit

  植物激素脫落酸(ABA)ELISA Kit[詳細]

  2024-09-30 18:00

  應用文章

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• GBT 17480-2008 飼料中黃曲霉毒素B1的測定酶聯(lián)免疫吸附法

  本標準規(guī)定了飼料中黃曲霉毒素B1的酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）方法。本標準適用于各種飼料原料、配合飼料及濃縮飼料中黃曲霉毒素B1的測定。本標準檢出限為0.1μg/kg。新光智源AIC80基于液相色譜法，采用目前國際Zxian極n的黃曲霉毒素專用熒光檢測器，可準確檢測糧油、食品、酒水、油脂等產品中黃曲霉毒素B1,B2，G1，G2，M1含量，具有準確、可靠、快速、易操作等優(yōu)點。[詳細]

  2018-08-17 10:00

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• 士鋒生物酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）操作要點

  士鋒生物酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）操作要點[詳細]

  2014-01-14 00:00

  其它

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• 酶聯(lián)免疫吸附試驗C1q測定法

  1原理包被于塑料板上的固相凝聚IgG與酶聯(lián)C1q的結合受標本中免疫復合物的YZ，是一種競爭性YZ試驗。為避免標本中內源C1q的干擾，應預先用IgG免疫吸附劑將其除去。2材料（1）聚苯乙烯反應板，酶聯(lián)免疫檢測儀。（2）免疫吸附劑系結合有IgG的纖維素。取纖維素（5%，pH值105）與溴化*一起室溫反應10min，用01mol/L碳酸氫鈉緩沖液（pH值80）充分洗滌。再與IgG一起于4℃下作用18h（20ml緩沖液中含3g纖維素和100mgIgG）。制備物用27mol/L甘氨酸緩沖液（pH值80）配成20%（W/V）懸液，貯于4℃。（3）酶聯(lián)C1q用戊二醛法將辣根過氧化物酶標記C1q，再經超濾AmiconXM200濾膜）分離貯于－20℃。（4）其他試劑002mol/LTrisHCl緩沖液（pH值90）；02mol/LTrisHCl緩沖液（pH值7.4），以及含005%Tween20的同一緩沖液；02mol/LEDTA（pH值76）；酶底物溶液和中止液。3方法（1）包被凝聚IgG取經002mol/LTrisHCl緩沖液（pH值90）透析過夜的凝聚IgG（100μg/ml），加入聚苯乙烯板孔內，每孔100μl，37℃包被30min后，用緩沖液洗3次（第1次、第3次用02mol/LTrisHCl緩沖液（pH值74）；第2次用含005%Tween20的同一緩沖液）,真空干燥，貯于4℃。（2）取血清標本50μl，加入02mol/LEDTA（pH值76）50μl，室溫作用10min，使內源C1q游離，然后加入IgG免疫吸附劑500μl，室溫振蕩20min，再以500r/min離心5min，得到1∶10稀釋的上清液。（3）取已包被凝聚IgG的塑料反應板，每孔中加入上述上清液90μl，酶聯(lián)C1q10μl（1∶100～200稀釋液），室溫下反應20min，然后用含02mol/LNaCl，005%Tween20的02mol/LTrisHCl緩沖液（pH值74）洗3次，再加入100μl底物溶液（pH值60、01mol/L磷酸鹽枸櫞酸鹽緩沖液50ml中，加入鄰苯二胺20mg，30%（W/V）過氧化氫10μl），室溫放30min，加入2mol/L硫酸50μl中止反應，于492nm讀取吸光值。如果定量，可用凝聚IgG制作標準曲線，測出免疫復合物的相對含量。上海恒遠主營產品/服務:ELISA試劑盒,免疫組化試劑盒，放免試劑盒，標準品，血清，抗體，培養(yǎng)基，細胞，生物試劑，實驗耗材等歡迎聯(lián)系，聯(lián)系電話：021-60515410,18221290082！[詳細]

  2018-11-15 10:03

  產品樣冊

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• Folin-酚試劑法（Lowry法）測定蛋白質含量

  Folin-酚試劑法（Lowry法）測定蛋白質含量[詳細]

  2024-09-28 11:58

  安裝說明

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• ELISA法檢測絲蟲抗體

  上海金穗生物公司是一家專業(yè)經營生物試劑、標準品、試劑耗材的公司，生物引擎在廣大用戶的幫助和支持下，經過不懈的努力，已成為國內生命科學領域產品的主要供應商之一，主要經營ELISA試劑盒、細胞、血清、抗體、金標試劑盒、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗等產品，產品暢銷國內大部分地區(qū)，銷售額逐年穩(wěn)步提高。上海金穗生物公司擁有雄厚的實力、合理的價格和優(yōu)良的服務，能夠及時解決和滿足客戶的各方面的需求，公司的服務和業(yè)務網絡遍及全國，在同行獲得一致好評。www.shjsbio.com[詳細]

  2024-09-29 23:29

  產品樣冊

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• 鐵合金-碳含量的測定-氣體容量法

  鐵合金-碳含量的測定-氣體容量法[詳細]

  2024-09-20 21:10

  標準

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• 高效毛細管電泳-紫外檢測法分離測定氮基酸的含量

  GX毛細管電泳-紫外檢測法分離測定氮基酸的含量[詳細]

  2024-09-12 18:28

  產品樣冊

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• 高效毛細管電泳_紫外檢測法分離測定氮基酸的含量

  GX毛細管電泳_紫外檢測法分離測定氮基酸的含量[詳細]

  2024-10-01 11:26

  實驗操作

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• 植物激素脫落酸（ABA）說明書.pdf

  植物激素脫落酸（ABA）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T10μg/L-300μg/L使用目的：本試劑盒用于測定植物組織、細胞及相關液體樣本中激素脫落酸（ABA）含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中植物激素脫落酸（ABA）水平。用純化的植物激素脫落酸（ABA）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入植物激素脫落酸（ABA），再與HRP標記的植物激素脫落酸（ABA）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物激素脫落酸（ABA）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中植物激素脫落酸（ABA）濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品（600μg/L）0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。300μg/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液150μg/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液75μg/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液37.5μg/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液18.75μg/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。11.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。操作程序總結：計算以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。注意事項1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月上海恒遠生物科技有限公司，專業(yè)生產代理“植物激素脫落酸（ABA）試劑盒”，質量保證，值得信賴！如果你想了解更多關于該試劑盒的詳細信息，歡迎來電來函！[詳細]

  2018-11-15 10:03

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• 植物激素定量分析用標樣

  植物激素定量分析用標樣[詳細]

  2024-09-20 15:39

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• 折光率法蜂蜜中水分的含量測定

  折光率法蜂蜜中水分的含量測定[詳細]

  2014-05-05 00:00

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• 電位法快速測定制劑中安乃近含量

  本文通過瑞士萬通電位滴定儀，報告了用電位法測定制劑中安乃近含量的方法。以鉑作電極,用自動電位計滴定,RSD在0.09%～0.25%之間,與使用《中華人民共和國獸藥典》2000年版中安乃近注射液含量測定方法的測定結果一致。此方法簡單、快速、準確而且自動化程度高。[詳細]

  2018-08-17 10:00

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