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常用的細(xì)菌培養(yǎng)基培養(yǎng)的方法
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2024-09-29 07:30 1603閱讀次數(shù)
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常用的細(xì)菌培養(yǎng)基培養(yǎng)的方法配方一牛肉膏瓊脂培養(yǎng)基牛肉膏0.3克,蛋白胨1.0克,氯化鈉0.5克,瓊脂1.5克,水100毫升在燒杯內(nèi)加水100毫升,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化鈉,用蠟筆在燒杯外作上記號(hào)后,放在火上加熱。待燒杯內(nèi)各組分溶解后,加入瓊脂,不斷攪拌以免粘底。等瓊脂完全溶解后補(bǔ)足失水,用10%鹽酸或10%的氫氧化鈉調(diào)整pH值到7.2~7.6,分裝在各個(gè)試管里,加棉花塞,用高壓蒸汽滅菌30分鐘。配方二馬鈴薯培養(yǎng)基取新鮮牛心(除去脂肪和血管)250克,用刀細(xì)細(xì)剁成肉末后,加入500毫升蒸餾水和5克蛋白胨。在燒杯上做好記號(hào),煮沸,轉(zhuǎn)用文火燉2小時(shí)。過濾,濾出的肉末干燥處理,濾液pH值調(diào)到7.5左右。每支試管內(nèi)加入10毫升肉湯和少量碎末狀的干牛心,滅菌,備用。配方三根瘤菌培養(yǎng)基葡萄糖10克磷酸氫二鉀0.5克碳酸鈣3克硫酸鎂0.2克酵母粉0.4克瓊脂20克水1000毫升1%結(jié)晶紫溶液1毫升先把瓊脂加水煮沸溶解,然后分別加入其他組分,攪拌使溶解后,分裝,滅菌,備用。
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常用的細(xì)菌培養(yǎng)基培養(yǎng)的方法
- 常用的細(xì)菌培養(yǎng)基培養(yǎng)的方法配方一牛肉膏瓊脂培養(yǎng)基牛肉膏0.3克,蛋白胨1.0克,氯化鈉0.5克,瓊脂1.5克,水100毫升在燒杯內(nèi)加水100毫升,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化鈉,用蠟筆在燒杯外作上記號(hào)后,放在火上加熱。待燒杯內(nèi)各組分溶解后,加入瓊脂,不斷攪拌以免粘底。等瓊脂完全溶解后補(bǔ)足失水,用10%鹽酸或10%的氫氧化鈉調(diào)整pH值到7.2~7.6,分裝在各個(gè)試管里,加棉花塞,用高壓蒸汽滅菌30分鐘。配方二馬鈴薯培養(yǎng)基取新鮮牛心(除去脂肪和血管)250克,用刀細(xì)細(xì)剁成肉末后,加入500毫升蒸餾水和5克蛋白胨。在燒杯上做好記號(hào),煮沸,轉(zhuǎn)用文火燉2小時(shí)。過濾,濾出的肉末干燥處理,濾液pH值調(diào)到7.5左右。每支試管內(nèi)加入10毫升肉湯和少量碎末狀的干牛心,滅菌,備用。配方三根瘤菌培養(yǎng)基葡萄糖10克磷酸氫二鉀0.5克碳酸鈣3克硫酸鎂0.2克酵母粉0.4克瓊脂20克水1000毫升1%結(jié)晶紫溶液1毫升先把瓊脂加水煮沸溶解,然后分別加入其他組分,攪拌使溶解后,分裝,滅菌,備用。[詳細(xì)]
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2024-09-29 07:30
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細(xì)菌培養(yǎng)基
- 細(xì)菌培養(yǎng)基[詳細(xì)]
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2024-09-14 01:48
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光合細(xì)菌培養(yǎng)基生產(chǎn)方法
- 光合細(xì)菌培養(yǎng)基生產(chǎn)方法[詳細(xì)]
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2024-09-29 04:22
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2024-09-29 04:23
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2009-04-15 00:00
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細(xì)胞分離培養(yǎng)中常用的因子
- 細(xì)胞分離培養(yǎng)中常用的因子一、白血病YZ因子LIF是典型的多功能生長因子,對(duì)于細(xì)胞生長、增殖與分化有著廣泛的作用,與胚胎發(fā)育、神經(jīng)發(fā)育和造血系統(tǒng)的發(fā)育有密切的聯(lián)系,LIFZ顯著的生物學(xué)功能是YZ胚胎干細(xì)胞的分化,維持其多能性。LIF在體內(nèi)由多種細(xì)胞分泌,是MEF對(duì)ES細(xì)胞的主要作用因子,也是各種條件培養(yǎng)基中的重要成分。LIF分分泌型和基質(zhì)型兩種,分別存在于細(xì)胞外液和細(xì)胞外基質(zhì)上。二、胰島樣生長因子IGF-1與胰島素結(jié)構(gòu)功能相似,能促進(jìn)胚胎細(xì)胞DNA和蛋白質(zhì)的合成,促進(jìn)細(xì)胞增殖,增加細(xì)胞數(shù)。三、干細(xì)胞因子SCF主要由肝細(xì)胞產(chǎn)生,一部分存在于細(xì)胞膜上,另一部分存在于周圍液體中。有人認(rèn)為是干細(xì)胞生長的**調(diào)節(jié)因子,能控制胚胎發(fā)生過程中不同發(fā)育階段的蛋白,促進(jìn)干細(xì)胞分裂。四、表皮生長因子EGF是小分子多肽,主要存在于動(dòng)物尿液、乳汁、汗腺中,有很強(qiáng)的促分裂作用,能加快細(xì)胞分裂,縮短細(xì)胞周期,對(duì)ES細(xì)胞的增殖有促進(jìn)作用。五、堿性成纖維生長因子bFGF是一種多肽,廣泛分布于卵巢、睪丸、胎盤、腦垂體、下丘腦等部位,能刺激成纖維細(xì)胞和卵巢顆粒細(xì)胞等的增殖。[詳細(xì)]
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2024-10-03 20:17
產(chǎn)品樣冊(cè)
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光合細(xì)菌培養(yǎng)基生產(chǎn)過程
- 光合細(xì)菌培養(yǎng)基生產(chǎn)過程[詳細(xì)]
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2024-09-23 23:45
產(chǎn)品樣冊(cè)
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二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)細(xì)菌的YZ或滅菌
- 二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)細(xì)菌的YZ或滅菌對(duì)于細(xì)胞來說,非常理想的培養(yǎng)環(huán)境同樣也適合這些污染物的生存,培養(yǎng)箱本身是不會(huì)辨別的,而細(xì)胞培養(yǎng)中大部分時(shí)間里細(xì)胞都是位于培養(yǎng)箱內(nèi),因此二氧化碳培養(yǎng)箱體內(nèi)能否YJ或滅菌非常關(guān)鍵!病毒:由于病毒寄生生存,爆發(fā)后盡快和正常細(xì)胞隔離,丟棄處理,相對(duì)來說容易處理,對(duì)操作者威脅較大;盡管病毒污染的細(xì)胞不影響原代培養(yǎng),但生產(chǎn)疫苗是不安全的。因此,潛在病毒是細(xì)胞大量生產(chǎn)和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題。真菌(霉菌和酵母菌):真菌生長的比較慢,不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn),但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了;目前沒有好的YZ方法,包括現(xiàn)在常用的兩性霉素,一旦污染容易反復(fù)爆發(fā),尤其孢子很難殺滅。支原體:支原體污染后,因?yàn)樗鼈儾粫?huì)使細(xì)胞死亡可以與細(xì)胞長期共存,培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁,細(xì)胞無明顯變化,外觀上給人以正常感覺,實(shí)則細(xì)胞已經(jīng)受到多方面潛在影響,如引起細(xì)胞變形,影響DNA合成,YZ細(xì)胞生長等,往往被大多數(shù)實(shí)驗(yàn)者忽視。細(xì)菌:細(xì)菌污染后,培養(yǎng)基1-2天就會(huì)變色,對(duì)細(xì)胞生長影響明顯,應(yīng)迅速將污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離,滅菌后丟棄,還要用實(shí)驗(yàn)室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺(tái)。上海凱朗儀器設(shè)備廠專業(yè)生產(chǎn)鼓風(fēng)干燥箱、真空干燥箱、馬弗爐、二氧化碳培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱、電熱恒溫培養(yǎng)箱、試驗(yàn)箱、恒溫?fù)u床、水槽、水浴鍋等實(shí)驗(yàn)室設(shè)備。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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厭氧菌的培養(yǎng)方法
- 厭氧菌的培養(yǎng)方法[詳細(xì)]
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2011-05-23 00:00
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常用的層析分析方法
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2024-09-17 10:16
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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植物細(xì)胞培養(yǎng)基組成和培養(yǎng)條件
- 植物細(xì)胞培養(yǎng)基組成和培養(yǎng)條件培養(yǎng)基的組成對(duì)植物細(xì)胞的生長和代謝物質(zhì)的生產(chǎn)影響極大。典型的培養(yǎng)基有Murashige-Skoog(MS),Linsmaier-Skoog(LS),white和B5等四種。無機(jī)鹽類:在無機(jī)鹽中,磷酸根及氮源(NH4+或N03-)的含量對(duì)細(xì)胞的生長與物質(zhì)生產(chǎn)有明顯的影響。另外,一些金屬離子如Ca2+、Cu2+、Mg2+等的含量往往也有重要影響。---碳源:通常使用2―3%的蔗糖作碳源,也有使用葡萄糖或果糖。使用單糖的優(yōu)點(diǎn)是方便分析測(cè)定,且有助于細(xì)胞生長動(dòng)力學(xué)分析。植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì):植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)對(duì)植物細(xì)胞的生長和代謝物質(zhì)生產(chǎn)的影響十分大。它可分為兩大類:植物生長素類有2,4―D(二氯苯氧基乙酸)、IAA(吲哚基醋酸)、NAA(萘乙酸)等,細(xì)胞激動(dòng)素類有BA(芐基腺凜吟)、動(dòng)力精和玉米素。其他因素:植物細(xì)胞培養(yǎng)的影響因素還有培養(yǎng)系統(tǒng)內(nèi)氣相組成(CO2和乙烯含量)、前體物質(zhì)、氨基酸、維生素及誘導(dǎo)劑等。培養(yǎng)條件溫度:培養(yǎng)溫度對(duì)植物細(xì)胞生長及二次代謝產(chǎn)物生成有重要影響。通常,植物細(xì)胞培養(yǎng)采用25℃。攪拌:在搖瓶實(shí)驗(yàn)中,通常搖床的轉(zhuǎn)速取90―120r/min。pH值:通過細(xì)胞膜進(jìn)行的H+離子傳遞對(duì)細(xì)胞的生育環(huán)境、生理活性來說無疑是重要的。在培養(yǎng)過程中,通常pH作為一個(gè)重要參數(shù)被控制在一定范圍內(nèi)。植物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH值一般為5―6。通氣:通氣是細(xì)胞液體深層培養(yǎng)重要的物理化學(xué)因子。好氣培養(yǎng)系統(tǒng)的通氣與混合及攪拌是相互關(guān)聯(lián)的。對(duì)搖瓶試驗(yàn),通常500m1的三角瓶內(nèi)裝80―200m1的植物細(xì)胞培養(yǎng)液較適宜。當(dāng)然,氣液傳質(zhì)還與瓶塞的材料有關(guān)。試驗(yàn)表明,從溶氧速率考慮,以棉花塞**,微孔硅橡膠塞次之,鋁箔塞Z差。光:光對(duì)植物有著特殊的作用。光照射條件不僅通過光照周期、光的質(zhì)量(即種類、波長)而且通過光照量(光強(qiáng)度)的調(diào)節(jié)來影響植物細(xì)胞的生理特性和培養(yǎng)特性。研究表明,光調(diào)節(jié)著細(xì)胞中的關(guān)鍵酶的活性,有時(shí)光能大大促進(jìn)代謝產(chǎn)物的生成,有時(shí)卻起著阻害作用。細(xì)胞齡:在培養(yǎng)過程的不同時(shí)期,細(xì)胞的生理狀況、生長與物質(zhì)生產(chǎn)能力差異顯著。而且,使用不同細(xì)胞齡的種細(xì)胞,其后代的生長與物質(zhì)生產(chǎn)狀況也會(huì)大不一樣。通常,使用處于對(duì)數(shù)生長期后期或穩(wěn)定期前期的細(xì)胞作為接種細(xì)胞較合適。接種量:在植物細(xì)胞培養(yǎng)中,接種量也是一個(gè)影響因素。在再次培養(yǎng)中,往往取前次培養(yǎng)液的5―20%作為種液,也以接種細(xì)胞濕重為基準(zhǔn),其接種濃度為15―50g(濕細(xì)胞)/L。由于接種量對(duì)細(xì)胞產(chǎn)率及二次代謝物質(zhì)的生產(chǎn)有一定影響,故應(yīng)根據(jù)不同的培養(yǎng)對(duì)象通過試驗(yàn),確定其Zda接種量。[詳細(xì)]
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2024-10-03 20:15
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常用的模擬環(huán)境試驗(yàn)方法
- 常用的模擬環(huán)境試驗(yàn)方法[詳細(xì)]
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2011-07-25 00:00
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拉力試驗(yàn)機(jī)常用的試驗(yàn)方法
- 該文章簡單介紹了“拉力試驗(yàn)機(jī)常用的試驗(yàn)方法”[詳細(xì)]
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2018-08-18 10:00
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常用培養(yǎng)基制備、滅菌與消毒
- 常用培養(yǎng)基制備、滅菌與消毒 制備、滅菌與消毒: 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹 ×私馀囵B(yǎng)基的配制原理;掌握配制培養(yǎng)基的一般方法和步驟;了解常見滅菌、清毒基本原理及方法;掌握干熱天菌、高壓蒸汽滅菌及過濾CJ的操作方法?! 《?、實(shí)驗(yàn)原理 培養(yǎng)基是人工按一定比例配制的供微生物生長繁殖和合成代謝產(chǎn)物所需要的營養(yǎng)物質(zhì)的混合物。培養(yǎng)基的原材料可分為碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長因素和水。根據(jù)微生物的種類和實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟煌?,培養(yǎng)基也有不同的種類和配制方法?! ∨H飧嗟鞍纂伺囵B(yǎng)基是一種應(yīng)用Z廣泛和Z普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基,有時(shí)又稱為普通培養(yǎng)基。由于這種培養(yǎng)基中含有一般細(xì)胞生長繁殖所需要的Z基本的營養(yǎng)物質(zhì),所以可供微生物生長繁殖之用?! 「蔁崽炀⒏邏赫羝麥缇椒ㄖ饕峭ㄟ^升溫使蛋白質(zhì)變性從而達(dá)到殺死微生物的效果?! ∪⒃噭┡c器材 1.器材 試管、三角瓶、燒杯、量筒、玻璃棒、培養(yǎng)基、分裝器、天平、牛角匙、高壓蒸汽滅菌鍋、pH度紙、棉花、牛皮紙、記號(hào)筆、麻繩、紗布、吸管、培養(yǎng)皿、電烘箱、注射器、微孔濾膜過濾器、鑷子等?! ?.試劑牛肉膏、蛋白胨、NaCl、瓊脂 四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 1.稱量→溶化→調(diào)pH→過濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無菌檢查 2.干熱滅菌:裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物 3.高壓蒸汽滅菌:加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無菌檢查 4.過濾CJ:組裝滅菌→連接→壓濾→無菌檢查→清洗滅菌 五、關(guān)鍵步驟及注意事項(xiàng) 1.要嚴(yán)格按配方配制。 2.調(diào)pH不要過頭?! ?.干熱滅菌要注意物品不要堆放過緊,注意溫度的時(shí)間控制,70C以下放物、取物?! ?.高壓滅菌要注意物品不要過多,加熱后排除冷空氣,到時(shí)降壓回零取物?! ?.過濾CJ要注意各部件滅菌,壓濾時(shí),壓力要適當(dāng),不可太猛太快,濾膜要注意清洗保存。[詳細(xì)]
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2018-09-27 10:00
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實(shí)驗(yàn)室常用的消毒滅菌方法
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2014-09-23 00:00
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2014-07-10 00:00
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2018-09-06 10:00
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常用化肥質(zhì)量檢驗(yàn)的簡易方法
- 常用化肥質(zhì)量檢驗(yàn)的簡易方法[詳細(xì)]
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2024-09-28 05:05
專利
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