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人甲狀旁腺激素(PTH)ELISA Kit說明書
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本文由 上海希美化學(xué)有限公司 整理匯編
2014-09-02 00:00 647閱讀次數(shù)
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人甲狀旁腺激素(PTH)ELISA Kit說明書
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人甲狀旁腺激素(PTH)ELISA Kit說明書
- 人甲狀旁腺激素(PTH)ELISA Kit說明書[詳細(xì)]
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2014-09-02 00:00
期刊論文
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人甲狀旁腺激素1-34(PTH 1-34)抗體ELISA kit說明書
- 人甲狀旁腺激素1-34(PTH 1-34)抗體ELISA kit說明書[詳細(xì)]
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2014-09-02 00:00
期刊論文
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雞甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒說明書
- 檢測(cè)試劑盒ELISA的應(yīng)用ELISA法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測(cè)定抗體,而且也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大,可概括四個(gè)方面:ELISA試驗(yàn)原理:試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。關(guān)鍵詞:ELISA試劑盒天津,北京生化鑒定試劑盒價(jià)格,北京酶聯(lián)免疫試劑盒經(jīng)銷商,北京大鼠ELISA試劑盒,北京綿羊ELISA試劑盒,北京ELISA試劑盒供應(yīng)商,北京免疫組化試劑盒說明書,ELISA北京,北京ELISA試劑盒價(jià)格,北京酶聯(lián)免疫試劑盒供貨商,北京酶聯(lián)免疫試劑盒經(jīng)銷商,北京酶聯(lián)免疫試劑盒供應(yīng)商種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。ELISA的樣本實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的樣本,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。液體類標(biāo)本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等??筛爬ㄋ膫€(gè)方面:1、免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。2、研究抗酶抗體的合成。3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。4、定量檢測(cè)體液中抗原或抗體成份。[詳細(xì)]
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2018-09-19 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人甲狀旁腺激素(PTH)酶聯(lián)免疫分析
- 人甲狀旁腺激素(PTH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T2.5ng/L-80ng/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中甲狀旁腺激素(PTH)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人甲狀旁腺激素(PTH)水平。用純化的人甲狀旁腺激素(PTH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入甲狀旁腺激素(PTH),再與HRP標(biāo)記的甲狀旁腺激素(PTH)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的甲狀旁腺激素(PTH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人甲狀旁腺激素(PTH)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(160ng/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。[詳細(xì)]
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2018-09-19 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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雞甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒
- 雞甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-13 00:00
課件
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大鼠甲狀旁腺激素(PTH) ELISA試劑盒
- 大鼠甲狀旁腺激素(PTH) ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-29 04:49
期刊論文
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人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA Kit說明書
- 人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA Kit說明書[詳細(xì)]
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2014-09-02 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
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人甲狀旁腺激素(I-PTH)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com人甲狀旁腺激素(I-PTH)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人I-PTH單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的I-PTH與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人I-PTH,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測(cè)OD值,I-PTH濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中I-PTH濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):40ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入2ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)I-PTH含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的I-PTH檢測(cè)濃度小于16pg/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人I-PTH。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于12%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠C端甲狀旁腺激素PTH檢測(cè)試劑盒
- RatPTHELISAKitINTENDEDUSERatPTHELISAKitintendedforresearchuseonlyinthedeterminationofratCTerminalPTHinserum,plasmaorcellculturemedia.RatPTHELISAKitINTRODUCTIONRatintactparathyroidhormone(PTH)isan84aminoacidpolypeptideproducedbytheparathyroidglandwithitsbiologicalactivityresidingintheN-Terminalregionofthepeptide.PTHplaysanimportantroleinmaintainingtheconcentrationofionizedcalciumwithinthelimitsneededtoachievenormalmetabolicfunctions.Whenserumcalciumlevelsaredecreasedtheparathyroidglandincreasessecretionfromskeletalreservesintothecirculation.WhenlevelsofserumcalciumareincreasedthesecretionofPTHisreduced.[詳細(xì)]
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2024-09-29 11:22
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人甲狀旁腺激素(I-PTH)ELISA試劑盒簡(jiǎn)介
- 人甲狀旁腺激素(I-PTH)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人I-PTH單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的I-PTH與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人I-PTH,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測(cè)OD值,I-PTH濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中I-PTH濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):40ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入2ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)I-PTH含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的I-PTH檢測(cè)濃度小于16pg/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人I-PTH。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于12%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-02 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人激素敏感性脂肪酶(HSL)ELISA Kit說明書
- 人激素敏感性脂肪酶(HSL)ELISA Kit說明書[詳細(xì)]
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2014-08-25 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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人黑色素濃縮激素(MCH)ELISA kit說明書
- 人黑色素濃縮激素(MCH)ELISA kit說明書[詳細(xì)]
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2014-08-21 00:00
操作手冊(cè)
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人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白ELISA 檢測(cè)試劑盒
- 人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白ELISA 檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2016-01-20 00:00
期刊論文
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人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒
- 人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-28 01:24
標(biāo)準(zhǔn)
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人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白ELISA 檢測(cè)試劑盒試劑盒
- 人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒試劑盒試驗(yàn)原理:PTHrP試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知PTHrP濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將PTHrP和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中PTHrP的濃度呈比例關(guān)系。人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒試劑盒內(nèi)容及其配制自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。2.實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項(xiàng)1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。9.按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒試劑盒試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的PTHrP標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的PTHrP含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍:0-400nmol/L4、敏感度:1.0nmol/L[詳細(xì)]
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2018-09-19 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人(Human)甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白ELISA 檢測(cè)試劑盒
- 試驗(yàn)原理:PTHrP試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知PTHrP濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將PTHrP和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中PTHrP的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品:400nmol/L1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進(jìn)行稀稀空白對(duì)照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標(biāo)記的抗PTHrP抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進(jìn)行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型人(Human)甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。2.實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。人(Human)甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒操作注意事項(xiàng)1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。9.按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備1.標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:400nmol/L(6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。200nmol/L(5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100nmol/L(4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50nmol/L(3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25nmol/L(2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液12.5nmol/L(1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0nmol/L(空白對(duì)照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。9.在450nm波長處測(cè)定各孔的OD值。建議使用的實(shí)驗(yàn)方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度(nmol/L)A400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E2525樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F12.512.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的PTHrP標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的PTHrP含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍:0-400nmol/L4、敏感度:1.0nmol/L[詳細(xì)]
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2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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褪黑激素ELISA Kit使用說明書
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4褪黑激素ELISAELISAKit使用說明書(德國IBL:RE54021)1、應(yīng)用范圍此試劑盒可用于人血清和血漿中褪黑激素的體外定量檢測(cè)。2、前言說明松果體因其在光周期現(xiàn)象中的重要作用,已經(jīng)被人們認(rèn)為是神經(jīng)內(nèi)分泌的傳感器。松果體主要分泌的激素是:N-乙酰-5-甲氧色胺和褪黑激素,褪黑激素一般是由色氨酸合成而來的。血漿褪黑激素的濃度可在夜間達(dá)到Z高。褪黑激素特有的波動(dòng)變化可以反映出一些關(guān)于時(shí)間變化的信息,如夜晚的長短。褪黑激素的分泌會(huì)受到神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)。交感神經(jīng)系統(tǒng)在調(diào)節(jié)褪黑激素分泌方面發(fā)揮有重要作用,它主要是通過釋放去甲腎上腺素來調(diào)節(jié)的。據(jù)報(bào)道,褪黑激素分泌方式和水平的變化與人的一些生理狀態(tài)一致,如:失眠、時(shí)差感、情緒低落、壓力大、精神分裂癥、丘腦下部性閉經(jīng)、妊娠、神經(jīng)想食欲缺乏、某些癌癥、免疫系統(tǒng)紊亂和青春期性成熟的影響。大多數(shù)循環(huán)褪黑激素都可在肝內(nèi)代謝成6-羥基褪黑激素,之后變成6-硫酸褪黑激素而隨尿液排除。尿液中6-羥基褪黑激素硫酸鹽的濃度與血液中褪黑激素的總水平有很好的相關(guān)性。3、實(shí)驗(yàn)原理此ELISA試劑盒利用的是競(jìng)爭(zhēng)法的原理。生物素和非生物素標(biāo)記的抗原競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合包被板上有限的抗體結(jié)合位點(diǎn)。生物素抗原結(jié)合到抗體上的量與樣品中抗原的量成反比。系統(tǒng)達(dá)到平衡后,洗板除去游離的生物素抗原,結(jié)合到抗體上的生物素抗原可以用抗生物素堿性磷酸酶標(biāo)記物和對(duì)硝基苯磷酸底物檢測(cè)出來。用已知的標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)據(jù)做一條標(biāo)準(zhǔn)曲線,將未知樣品的酶活性與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較就可以定量出未知樣品的量。4、儲(chǔ)存與穩(wěn)定性試劑盒必須在2-8℃的環(huán)境下運(yùn)輸和儲(chǔ)存,避免太陽直射。樣品的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性及試劑準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述,如果將包被板密封并儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下時(shí),試劑在有效期內(nèi)穩(wěn)定。用甲醇洗提后的提取柱可用于其它樣品的提取或儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下。提取柱可重復(fù)使用4次。5、樣品的采集與儲(chǔ)存血清,血漿(EDTA,肝素)按照靜脈穿刺的常規(guī)注意事項(xiàng)采集樣品,血液樣品自采集到實(shí)驗(yàn)時(shí)都必須保證其化學(xué)完整性。不要使用明顯溶血、黃疸和脂血樣品?;鞚岬臉悠窇?yīng)當(dāng)在實(shí)驗(yàn)開始前離心以除去所有的顆粒性物質(zhì)。儲(chǔ)存2-8℃≤-20℃≤-70℃避免太陽直射,避免反復(fù)凍融。穩(wěn)定性24小時(shí)3個(gè)月1年6、試劑盒成分?jǐn)?shù)量標(biāo)記成分1×12×8MTP包被板,可拆,微孔中包被了抗兔IgG(羊,多克?。?。3×2mlBIOTINLYO褪黑激素生物素,凍干,內(nèi)含穩(wěn)定劑。3×2mlANTISERUMLYO褪黑激素硫酸鹽抗血清,凍干粉,內(nèi)含抗血清(兔,多克?。┖头€(wěn)定劑。1×250ulENZCONJCONC酶聯(lián)物,80倍濃縮,內(nèi)含堿性磷酸酶標(biāo)記的抗生物素抗體(羊)、Tris緩沖液和穩(wěn)定劑。1×6×2mlCALA-FLYO標(biāo)準(zhǔn)品A-F,凍干粉,內(nèi)含穩(wěn)定劑,提取濃度請(qǐng)見試劑瓶標(biāo)簽或QC質(zhì)控品。1×2×2mlCONTROL1+2LYO質(zhì)控品1+2,凍干粉,內(nèi)含穩(wěn)定劑,濃度/可接受范圍請(qǐng)見試劑瓶標(biāo)簽。1×50mlASSAYBUFCONC檢測(cè)緩沖液,10倍濃縮,內(nèi)含磷酸緩沖液、吐溫和穩(wěn)定劑。1×9×PNPPSUBSPNPP底物片,密封于鋁鉑金屬袋中,內(nèi)含對(duì)硝基苯硫酸鹽。1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液,即用,內(nèi)含二乙醇氨和水。1×15mlPNPPSTOPPNPP終止液,即用,內(nèi)含1M的NaOH和0.25M的EDTA。2×10EXTRCOL提取柱,即用,C18RP,1m3/100mg。另需提取柱可從IBL定夠(編號(hào):KEME761)3×FOIL粘性金屬板7、實(shí)驗(yàn)所需器材但試劑盒不提供1)移液器,體積:50;500ul2)試管(12×75mm)3)軌道振蕩器(400-600rpm)4)旋渦混合器5)帶儲(chǔ)器的8道移液器6)洗滌瓶,自動(dòng)或半自動(dòng)洗板機(jī)7)離心機(jī)(冷凍離心機(jī)更適宜):200-500×g,也可選用多頭抽真空裝置(例如:Mallinekrodt-Baker或Waters)。8)甲醇(HPLC級(jí))9)蒸發(fā)離心機(jī)10)可在405nm處讀數(shù)的酶標(biāo)儀(參考波長600-650nm)11)蒸餾水或去離子水12)吸水紙、取樣吸頭和計(jì)時(shí)器8、實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備說明注意用于96人份檢測(cè)色試劑盒成分可分成3次進(jìn)行。下列所述體積為檢測(cè)32人份時(shí)所需要的量。8.1凍干或濃縮成分的準(zhǔn)備稀釋/溶解成分稀釋劑比例備注儲(chǔ)存穩(wěn)定性15ml檢測(cè)緩沖液150ml雙蒸水1:102-8℃4周標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品2.0ml雙蒸水靜置15min,混合時(shí)避免氣泡≤-20℃直至有效期褪黑激素生物素2.0ml蒸餾水靜置15min,混合時(shí)避免氣泡臨時(shí)配置,只能使用一次褪黑激素抗血清2.0ml蒸餾水靜置15min,混合時(shí)避免氣泡70ul酶聯(lián)物5.6ml已稀釋的檢測(cè)緩沖液1:813PNPP底物片8mlPNPP底物緩沖液10ml未稀釋甲醇100ml蒸餾水10%(v/v)如果溶液的需要量比較大,應(yīng)該將試管內(nèi)的溶液混合.避免反復(fù)凍融。8.2樣品的稀釋如果懷疑樣品中的褪黑激素濃度比Z高標(biāo)準(zhǔn)品的高,必須將樣品在提取步驟前用檢測(cè)緩沖液進(jìn)行進(jìn)一步的稀釋。8.3樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的提?。ㄌ崛≈┌凑沾瞬襟E進(jìn)行提取,提取量大約為90-1**%。為了避免柱子堵塞,提取樣品前將樣品過濾或離心一下。注意每份樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品都必須提取,提取必須提前進(jìn)行。干燥的提取物(甲醇蒸發(fā)后)可在2-8℃或-20℃下儲(chǔ)存24個(gè)小時(shí)。用甲醇洗提后,提取柱就可以用于下一份樣品的提取或是存放到2-8℃的環(huán)境下。提取柱可以反復(fù)使用4次。如果是重復(fù)使用,在再次從A.1開始(柱的調(diào)制)。A、標(biāo)準(zhǔn)版本:離心與蒸發(fā)離心步驟1.柱的調(diào)制1將提取柱放到聚苯乙烯或玻璃試管中(12×75mm)。2在提取柱中加入2×1ml的甲醇(未稀釋的),200g離心1min使溶劑通過提取柱,棄取洗出液。3向提取柱中加入2×1ml的蒸餾水,200g離心1min使溶劑通過提取柱,棄取洗出液。4為了避免柱子變干,請(qǐng)立即提取樣品。2.樣品提取5將提取柱放到相應(yīng)的標(biāo)記聚苯乙烯或玻璃試管中(12×75mm)。6向提取柱中加入0.5ml標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品,200g離心1min使溶劑通過提取柱,棄取洗出液。3、洗滌7向提取柱中加入2×1ml的10%甲醇(蒸餾水稀釋),500g離心1min使溶劑通過提取柱,棄取洗出液。4、提取物的洗脫8將提取柱放到新的標(biāo)記聚苯乙烯或玻璃試管中(12×75mm)9向提取柱中加入1ml未稀釋的甲醇,200g離心1min使溶劑通過提取柱。10將提取柱從試管中移出,避免液滴還停留在柱子中。將柱子用于下一份樣品的提取或存放于2-8℃的環(huán)境下。提取柱可重復(fù)使用四次。5.提取物的蒸發(fā)和重新配置11用蒸發(fā)離心機(jī)將甲醇蒸發(fā)掉。12用0.15ml的蒸餾水重新稀釋配置樣品13旋渦混和1分鐘,并立即檢測(cè)樣品。B、選擇性版本:用多頭抽真空裝置代替離心機(jī)提取步驟仍然按照A1-5進(jìn)行,柱子不變。用真空和≤5ml/min的流速使溶劑通過柱子。樣品和提取物用≤2ml/min的流速。用蒸發(fā)離心機(jī)或氮?dú)庹舭l(fā)干燥溶劑。9、實(shí)驗(yàn)步驟1將提取好的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品分別50ul加入到相應(yīng)的微孔中。2在每一微孔中加入50ul褪黑激素生物素。3在每一微孔內(nèi)加入50ul褪黑激素抗血清。4蓋板,輕輕震板,2-8℃下溫育14-20小時(shí)。5移去粘性金屬板,棄取孔內(nèi)反應(yīng)液,每孔用250ul稀釋好的檢測(cè)緩沖液洗板3次,吸水紙上拍干以除出殘余液體。6在每一微孔中加入150ul臨時(shí)配置好的酶聯(lián)物。7蓋板,室溫(18-25℃)軌道振蕩器上(500rpm)溫育120min。8大約在溫育結(jié)束10分鐘前準(zhǔn)備好PNPP底物液。9移去粘性金屬板,棄取孔內(nèi)反應(yīng)液,每孔用250ul稀釋好的檢測(cè)緩沖液洗板3次,吸水紙上拍干以除出殘余液體。10如果有8道移液器,請(qǐng)用8道移液器加底物液和終止液,加底物液和終止液的時(shí)間間隔應(yīng)當(dāng)相同。使用主動(dòng)置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。11在每一微孔中加入200ul臨時(shí)配置好的PNPP底物液。12室溫(18-25℃)軌道振蕩器上(500rpm)溫育20-40min。13在每一微孔中加入50ulPNPP終止液,輕輕震板以使溶液混合均勻。14加終止液后60min內(nèi)在405nm處讀取OD值。(參考波長:600-650nm)10、結(jié)果計(jì)算在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上或自動(dòng)計(jì)算的方法,以標(biāo)準(zhǔn)品的OD值(Y軸,線性)對(duì)其濃度(X軸,對(duì)數(shù))做一條標(biāo)準(zhǔn)曲線。使用三次回歸、四參數(shù)或雙對(duì)數(shù)曲線方程可以得到更好的標(biāo)準(zhǔn)曲線。在推算標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí),應(yīng)當(dāng)充分利用好每一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)值(明顯逸出的數(shù)值應(yīng)當(dāng)被忽略,再使用更加合理的數(shù)值代替它)。樣品的濃度可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線上直接讀取。從坐標(biāo)紙上讀取結(jié)果時(shí)應(yīng)當(dāng)把起始的稀釋倍數(shù)考慮進(jìn)去。將稀釋了的樣品結(jié)果乘以稀釋因子即可得到其相應(yīng)的結(jié)果。樣品中抗體濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品的樣品,應(yīng)當(dāng)按實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備說明所述的方法進(jìn)行稀釋,并重新檢測(cè)。轉(zhuǎn)換系數(shù):褪黑激素(pg/ml)×4.30=pmol/l典型標(biāo)準(zhǔn)曲線(例子:不能用來定量)標(biāo)準(zhǔn)品褪黑激素(pg/ml)平均OD值OD/ODmax(%)A0.01.517100B3.01.38391.1C101.21480.1D300.86757.1E1000.43428.6F3000.26017.111、期望值實(shí)驗(yàn)結(jié)果不能當(dāng)作確定ZL結(jié)果的**因素,疾病的判斷還應(yīng)當(dāng)與其它臨床觀察和診斷檢測(cè)相結(jié)合。對(duì)明顯健康的一組人群進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn),人體內(nèi)的褪黑激素水平有著明顯的生理周期變化,褪黑激素白天的水平很低,而晚上的水平則很高,而且個(gè)體之間的差異也很大。此外,褪黑激素的水平也與年齡有關(guān)系,其Z高濃度是在嬰兒(3歲)樣品中發(fā)現(xiàn)的。對(duì)6個(gè)明顯健康獻(xiàn)血者的褪黑激素生理周期進(jìn)行研究。褪黑激素大概在白天下午四點(diǎn)Zdi,其平均值是4.6pg/ml;早晨4點(diǎn)達(dá)到**,平均值為77.5pg/ml。健康個(gè)體之間的褪黑激素Z高值差異很大,建議每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都確定自己實(shí)驗(yàn)室的正常值范圍。本譯文僅供參考,詳情請(qǐng)以原文為準(zhǔn)。ZGdu家總代理:深圳市科潤達(dá)生物工程有限公司辦公地址:深圳市蛇口太子路18號(hào)海景廣場(chǎng)11C研發(fā)ZX:深圳市蛇口沿山路10號(hào)6層電話:0755-26814430,26680196郵政編碼:518067免費(fèi)電話:800-8306296傳真:0755-26814431[詳細(xì)]
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2018-11-14 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)檢測(cè)試劑盒
- 人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-28 16:28
產(chǎn)品樣冊(cè)
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褪黑激素硫酸鹽ELISA Kit使用說明書
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4褪黑激素硫酸鹽ELISAKit使用說明書(德國IBL:RE54031)1、應(yīng)用范圍此試劑盒可用于人尿液中褪黑激素硫酸鹽(又叫6-羥基褪黑激素硫酸鹽和6-硫酸褪黑激素)的體外定量檢測(cè)。2、前言說明松果體因其在光周期現(xiàn)象中的重要作用,已經(jīng)被人們認(rèn)為是神經(jīng)內(nèi)分泌的傳感器。松果體主要分泌的激素是:N-乙酰-5-甲氧色胺和褪黑激素,褪黑激素一般是由色氨酸合成而來的。血漿褪黑激素的濃度可在夜間達(dá)到**。褪黑激素特有的波動(dòng)變化可以反映出一些關(guān)于時(shí)間變化的信息,如夜晚的長短。褪黑激素的分泌會(huì)受到神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)。交感神經(jīng)系統(tǒng)在調(diào)節(jié)褪黑激素分泌方面發(fā)揮有重要作用,它主要是通過釋放去甲腎上腺素來調(diào)節(jié)的。據(jù)報(bào)道,褪黑激素分泌方式和水平的變化與人的一些生理狀態(tài)一致,如:失眠、時(shí)差感、情緒低落、壓力大、精神分裂癥、丘腦下部性閉經(jīng)、妊娠、神經(jīng)想食欲缺乏、某些癌癥、免疫系統(tǒng)紊亂和青春期性成熟的影響。大多數(shù)循環(huán)褪黑激素都可在肝內(nèi)代謝成6-羥基褪黑激素,之后變成6-硫酸褪黑激素而隨尿液排除。尿液中6-羥基褪黑激素硫酸鹽的濃度與血液中褪黑激素的總水平有很好的相關(guān)性。3、實(shí)驗(yàn)原理此ELISA試劑盒利用的是競(jìng)爭(zhēng)法的原理。樣品中未知量的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合到包被在微孔中的抗體結(jié)合位點(diǎn)上。溫育后洗板以終止競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)。加入底物液后,溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與樣品中抗原的量成反比。樣品的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線上直接獲取。4、儲(chǔ)存與穩(wěn)定性試劑盒必須在2-8℃的環(huán)境下運(yùn)輸和儲(chǔ)存,避免太陽直射。樣品的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性及試劑準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。如果將包被板密封并儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下時(shí),試劑在有效期內(nèi)穩(wěn)定。5、樣品的采集與儲(chǔ)存尿液實(shí)驗(yàn)必須使用自然產(chǎn)生的尿液,也可使用24小時(shí)內(nèi)產(chǎn)生的尿液。收集病人24小時(shí)內(nèi)產(chǎn)生的尿液,將它加入到含10-15ml6NHCl防腐劑的容器中。為了計(jì)算結(jié)果,請(qǐng)確定尿液的總體積。實(shí)驗(yàn)開始前請(qǐng)先將樣品離心。儲(chǔ)存2-8℃2-8℃避免太陽直射,避免反復(fù)凍融穩(wěn)定性4天15年6、試劑盒成分?jǐn)?shù)量標(biāo)記成分1×12×8MTP包被板,可拆,微孔中包被了抗兔IgG(羊,多克?。?。1×5mlANTISERUM褪黑激素硫酸鹽抗血清,即用,內(nèi)含:兔抗血清、Tris緩沖液和0.01%的硫柳汞1×0.2mlENZCONJCONC酶聯(lián)物,40倍濃縮,內(nèi)含過氧酶標(biāo)記的褪黑激素硫酸鹽、Tris緩沖液和1%的硫柳汞。1×7×0.1mlCALA-G標(biāo)準(zhǔn)品A-G,0;1.7;5.2;15.6;46.7;140;420ng/mL0;5.2;15.9;47.6;142;427;1281nmol/L。即用,內(nèi)含褪黑激素硫酸鹽、Tris緩沖液和0.01%的硫柳汞。1×2×0.1mlCONTROL1+2質(zhì)控品1+2,即用,內(nèi)含0.02%的;硫柳汞。具體濃度及可允許范圍請(qǐng)見試劑瓶標(biāo)簽。1×60mlASSAYBUFCONC檢測(cè)緩沖液,紅色,即用,內(nèi)含Tris緩沖液、BSA和0.01%的硫柳汞。1×50mlWASHBUFCONC洗滌液,20倍濃縮,內(nèi)含磷酸緩沖液、吐溫和0.1%的硫柳汞。1×0.9mlTMBSUBSCONCTMB底物液,31倍濃縮,內(nèi)含TMB、緩沖液和穩(wěn)定劑。1×27mlTMB緩沖液TMB底物緩沖液,儲(chǔ)存時(shí)避免太陽直射,即用,內(nèi)含H2O2、檸檬酸鹽緩沖液和穩(wěn)定劑。1×12mlTMBSTOPTMB終止液,即用,1M的H2SO4。3×FOIL粘性金屬板7、實(shí)驗(yàn)所需器材但試劑盒不提供1)移液器,體積:10;50;100;1000ul2)試管(12×75mm)3)試管架4)振蕩器(500rpm)5)旋渦混合器(500rpm)6)帶儲(chǔ)器的8道移液器7)洗滌瓶,自動(dòng)或半自動(dòng)洗板機(jī)8)酶標(biāo)儀(參考波長:600-650nm)9)蒸餾水或去離子水10)吸水紙、取樣吸頭和計(jì)時(shí)器8、實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備說明8.1凍干或濃縮成分的準(zhǔn)備稀釋/溶解成分稀釋劑比例備注儲(chǔ)存穩(wěn)定性15ml洗滌液300ml雙蒸水1:2018-25℃將晶體溶解掉2-8℃4周50ul酶聯(lián)物2ml檢測(cè)緩沖液1:41臨時(shí)配置,只能使用一次18-25℃30min300ulTMB底物液9mlTMB底物緩沖液1:31臨時(shí)配置,只能使用一次18-25℃10min8.2標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和病人尿液樣品的稀釋1將標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和病人尿液樣品分別10ul加入到聚苯乙烯或聚丙烯或玻璃試管中,避免太陽直射。2在每一試管中加入500ul檢測(cè)緩沖液,旋渦混合。褪黑激素硫酸鹽濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品濃度的樣品必須用檢測(cè)緩沖液進(jìn)行進(jìn)一步的稀釋。9、實(shí)驗(yàn)步驟1將已稀釋好的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和病人樣品分別50ul加入到相應(yīng)的微孔中。2在每一微孔中加入50ul臨時(shí)配置好的酶聯(lián)物。3在每一微孔內(nèi)加入50ul褪黑激素硫酸鹽抗血清。4蓋板,室溫(18-25℃)包被板振蕩器(500rpm)溫育2小時(shí)。5在溫育快要結(jié)束的10分鐘前,請(qǐng)將TMB底物液準(zhǔn)備好。6移去粘性金屬板,棄取孔內(nèi)反應(yīng)液,每孔用250ul稀釋好的洗滌液洗板4次,吸水紙上拍干以除出殘余液體。7如果可以的話,請(qǐng)用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液的時(shí)間間隔應(yīng)當(dāng)相同,使用8在每一微孔中加入200ulTMB底物液。9室溫(18-25℃)包被板振蕩器(500rpm)溫育30min。10在每一微孔中加入100ulTMB終止液,輕請(qǐng)振板以混合溶液。11加終止液后60min內(nèi)在450nm處讀取OD值。10、期望值實(shí)驗(yàn)結(jié)果不能當(dāng)作確定ZL結(jié)果的**因素,疾病的判斷還應(yīng)當(dāng)與其它臨床觀察和診斷檢測(cè)相結(jié)合。以下為明顯正常人群褪黑激素硫酸鹽的正常值:年齡數(shù)目褪黑激素硫酸鹽24小時(shí)尿液(ug)夜間尿液(ug/h)平均值90%的比例平均值90%的比例20-352636.815.6-58.12.80.9-5.636-501729.69.9-52.92.10.6-3.651-651620.412.3-32.81.50.9-2.5>1615.87.5-32.71.00.3-2.3建議每個(gè)實(shí)驗(yàn)室讀確定自己的正常值范圍本譯文僅供參考,詳情請(qǐng)以原文為準(zhǔn)。ZGdu家總代理:深圳市科潤達(dá)生物工程有限公司辦公地址:深圳市蛇口太子路18號(hào)海景廣場(chǎng)11C研發(fā)ZX:深圳市蛇口沿山路10號(hào)6層電話:0755-26814430,26680196郵政編碼:518067免費(fèi)電話:800-8306296傳真:0755-26814431[詳細(xì)]
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2018-11-14 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒
- 小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-29 04:56
專利
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