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人激素敏感性脂肪酶(HSL)ELISA Kit說明書
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本文由 上海希美化學(xué)有限公司 整理匯編
2014-08-25 00:00 459閱讀次數(shù)
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人激素敏感性脂肪酶(HSL)ELISA Kit說明書
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人激素敏感性脂肪酶(HSL)ELISA Kit說明書
- 人激素敏感性脂肪酶(HSL)ELISA Kit說明書[詳細(xì)]
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2014-08-25 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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豬激素敏感性脂肪酶(HSL)ELISA試劑盒
- 豬激素敏感性脂肪酶(HSL)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2015-07-15 00:00
選購指南
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人激素敏感脂肪酶(HSL)ELISA試劑盒說明書
- 人激素敏感脂肪酶(HSL)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人HSL單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的HSL與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人HSL,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液,在450nm處測(cè)OD值,HSL濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中HSL濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):10ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。正常標(biāo)本測(cè)定前用標(biāo)本稀釋液至少作1:20稀釋(取10ul,加標(biāo)本稀釋液190ul,稀釋20倍)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)HSL含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的HSL檢測(cè)濃度小于15pg/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人HSL。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人甲狀旁腺激素(PTH)ELISA Kit說明書
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2014-09-02 00:00
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操作手冊(cè)
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2014-09-02 00:00
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期刊論文
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褪黑激素ELISA Kit使用說明書
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4褪黑激素ELISAELISAKit使用說明書(德國(guó)IBL:RE54021)1、應(yīng)用范圍此試劑盒可用于人血清和血漿中褪黑激素的體外定量檢測(cè)。2、前言說明松果體因其在光周期現(xiàn)象中的重要作用,已經(jīng)被人們認(rèn)為是神經(jīng)內(nèi)分泌的傳感器。松果體主要分泌的激素是:N-乙酰-5-甲氧色胺和褪黑激素,褪黑激素一般是由色氨酸合成而來的。血漿褪黑激素的濃度可在夜間達(dá)到Z高。褪黑激素特有的波動(dòng)變化可以反映出一些關(guān)于時(shí)間變化的信息,如夜晚的長(zhǎng)短。褪黑激素的分泌會(huì)受到神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)。交感神經(jīng)系統(tǒng)在調(diào)節(jié)褪黑激素分泌方面發(fā)揮有重要作用,它主要是通過釋放去甲腎上腺素來調(diào)節(jié)的。據(jù)報(bào)道,褪黑激素分泌方式和水平的變化與人的一些生理狀態(tài)一致,如:失眠、時(shí)差感、情緒低落、壓力大、精神分裂癥、丘腦下部性閉經(jīng)、妊娠、神經(jīng)想食欲缺乏、某些癌癥、免疫系統(tǒng)紊亂和青春期性成熟的影響。大多數(shù)循環(huán)褪黑激素都可在肝內(nèi)代謝成6-羥基褪黑激素,之后變成6-硫酸褪黑激素而隨尿液排除。尿液中6-羥基褪黑激素硫酸鹽的濃度與血液中褪黑激素的總水平有很好的相關(guān)性。3、實(shí)驗(yàn)原理此ELISA試劑盒利用的是競(jìng)爭(zhēng)法的原理。生物素和非生物素標(biāo)記的抗原競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合包被板上有限的抗體結(jié)合位點(diǎn)。生物素抗原結(jié)合到抗體上的量與樣品中抗原的量成反比。系統(tǒng)達(dá)到平衡后,洗板除去游離的生物素抗原,結(jié)合到抗體上的生物素抗原可以用抗生物素堿性磷酸酶標(biāo)記物和對(duì)硝基苯磷酸底物檢測(cè)出來。用已知的標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)據(jù)做一條標(biāo)準(zhǔn)曲線,將未知樣品的酶活性與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較就可以定量出未知樣品的量。4、儲(chǔ)存與穩(wěn)定性試劑盒必須在2-8℃的環(huán)境下運(yùn)輸和儲(chǔ)存,避免太陽直射。樣品的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性及試劑準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述,如果將包被板密封并儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下時(shí),試劑在有效期內(nèi)穩(wěn)定。用甲醇洗提后的提取柱可用于其它樣品的提取或儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下。提取柱可重復(fù)使用4次。5、樣品的采集與儲(chǔ)存血清,血漿(EDTA,肝素)按照靜脈穿刺的常規(guī)注意事項(xiàng)采集樣品,血液樣品自采集到實(shí)驗(yàn)時(shí)都必須保證其化學(xué)完整性。不要使用明顯溶血、黃疸和脂血樣品。混濁的樣品應(yīng)當(dāng)在實(shí)驗(yàn)開始前離心以除去所有的顆粒性物質(zhì)。儲(chǔ)存2-8℃≤-20℃≤-70℃避免太陽直射,避免反復(fù)凍融。穩(wěn)定性24小時(shí)3個(gè)月1年6、試劑盒成分?jǐn)?shù)量標(biāo)記成分1×12×8MTP包被板,可拆,微孔中包被了抗兔IgG(羊,多克隆)。3×2mlBIOTINLYO褪黑激素生物素,凍干,內(nèi)含穩(wěn)定劑。3×2mlANTISERUMLYO褪黑激素硫酸鹽抗血清,凍干粉,內(nèi)含抗血清(兔,多克隆)和穩(wěn)定劑。1×250ulENZCONJCONC酶聯(lián)物,80倍濃縮,內(nèi)含堿性磷酸酶標(biāo)記的抗生物素抗體(羊)、Tris緩沖液和穩(wěn)定劑。1×6×2mlCALA-FLYO標(biāo)準(zhǔn)品A-F,凍干粉,內(nèi)含穩(wěn)定劑,提取濃度請(qǐng)見試劑瓶標(biāo)簽或QC質(zhì)控品。1×2×2mlCONTROL1+2LYO質(zhì)控品1+2,凍干粉,內(nèi)含穩(wěn)定劑,濃度/可接受范圍請(qǐng)見試劑瓶標(biāo)簽。1×50mlASSAYBUFCONC檢測(cè)緩沖液,10倍濃縮,內(nèi)含磷酸緩沖液、吐溫和穩(wěn)定劑。1×9×PNPPSUBSPNPP底物片,密封于鋁鉑金屬袋中,內(nèi)含對(duì)硝基苯硫酸鹽。1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液,即用,內(nèi)含二乙醇氨和水。1×15mlPNPPSTOPPNPP終止液,即用,內(nèi)含1M的NaOH和0.25M的EDTA。2×10EXTRCOL提取柱,即用,C18RP,1m3/100mg。另需提取柱可從IBL定夠(編號(hào):KEME761)3×FOIL粘性金屬板7、實(shí)驗(yàn)所需器材但試劑盒不提供1)移液器,體積:50;500ul2)試管(12×75mm)3)軌道振蕩器(400-600rpm)4)旋渦混合器5)帶儲(chǔ)器的8道移液器6)洗滌瓶,自動(dòng)或半自動(dòng)洗板機(jī)7)離心機(jī)(冷凍離心機(jī)更適宜):200-500×g,也可選用多頭抽真空裝置(例如:Mallinekrodt-Baker或Waters)。8)甲醇(HPLC級(jí))9)蒸發(fā)離心機(jī)10)可在405nm處讀數(shù)的酶標(biāo)儀(參考波長(zhǎng)600-650nm)11)蒸餾水或去離子水12)吸水紙、取樣吸頭和計(jì)時(shí)器8、實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備說明注意用于96人份檢測(cè)色試劑盒成分可分成3次進(jìn)行。下列所述體積為檢測(cè)32人份時(shí)所需要的量。8.1凍干或濃縮成分的準(zhǔn)備稀釋/溶解成分稀釋劑比例備注儲(chǔ)存穩(wěn)定性15ml檢測(cè)緩沖液150ml雙蒸水1:102-8℃4周標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品2.0ml雙蒸水靜置15min,混合時(shí)避免氣泡≤-20℃直至有效期褪黑激素生物素2.0ml蒸餾水靜置15min,混合時(shí)避免氣泡臨時(shí)配置,只能使用一次褪黑激素抗血清2.0ml蒸餾水靜置15min,混合時(shí)避免氣泡70ul酶聯(lián)物5.6ml已稀釋的檢測(cè)緩沖液1:813PNPP底物片8mlPNPP底物緩沖液10ml未稀釋甲醇100ml蒸餾水10%(v/v)如果溶液的需要量比較大,應(yīng)該將試管內(nèi)的溶液混合.避免反復(fù)凍融。8.2樣品的稀釋如果懷疑樣品中的褪黑激素濃度比Z高標(biāo)準(zhǔn)品的高,必須將樣品在提取步驟前用檢測(cè)緩沖液進(jìn)行進(jìn)一步的稀釋。8.3樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的提?。ㄌ崛≈┌凑沾瞬襟E進(jìn)行提取,提取量大約為90-1**%。為了避免柱子堵塞,提取樣品前將樣品過濾或離心一下。注意每份樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品都必須提取,提取必須提前進(jìn)行。干燥的提取物(甲醇蒸發(fā)后)可在2-8℃或-20℃下儲(chǔ)存24個(gè)小時(shí)。用甲醇洗提后,提取柱就可以用于下一份樣品的提取或是存放到2-8℃的環(huán)境下。提取柱可以反復(fù)使用4次。如果是重復(fù)使用,在再次從A.1開始(柱的調(diào)制)。A、標(biāo)準(zhǔn)版本:離心與蒸發(fā)離心步驟1.柱的調(diào)制1將提取柱放到聚苯乙烯或玻璃試管中(12×75mm)。2在提取柱中加入2×1ml的甲醇(未稀釋的),200g離心1min使溶劑通過提取柱,棄取洗出液。3向提取柱中加入2×1ml的蒸餾水,200g離心1min使溶劑通過提取柱,棄取洗出液。4為了避免柱子變干,請(qǐng)立即提取樣品。2.樣品提取5將提取柱放到相應(yīng)的標(biāo)記聚苯乙烯或玻璃試管中(12×75mm)。6向提取柱中加入0.5ml標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品,200g離心1min使溶劑通過提取柱,棄取洗出液。3、洗滌7向提取柱中加入2×1ml的10%甲醇(蒸餾水稀釋),500g離心1min使溶劑通過提取柱,棄取洗出液。4、提取物的洗脫8將提取柱放到新的標(biāo)記聚苯乙烯或玻璃試管中(12×75mm)9向提取柱中加入1ml未稀釋的甲醇,200g離心1min使溶劑通過提取柱。10將提取柱從試管中移出,避免液滴還停留在柱子中。將柱子用于下一份樣品的提取或存放于2-8℃的環(huán)境下。提取柱可重復(fù)使用四次。5.提取物的蒸發(fā)和重新配置11用蒸發(fā)離心機(jī)將甲醇蒸發(fā)掉。12用0.15ml的蒸餾水重新稀釋配置樣品13旋渦混和1分鐘,并立即檢測(cè)樣品。B、選擇性版本:用多頭抽真空裝置代替離心機(jī)提取步驟仍然按照A1-5進(jìn)行,柱子不變。用真空和≤5ml/min的流速使溶劑通過柱子。樣品和提取物用≤2ml/min的流速。用蒸發(fā)離心機(jī)或氮?dú)庹舭l(fā)干燥溶劑。9、實(shí)驗(yàn)步驟1將提取好的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品分別50ul加入到相應(yīng)的微孔中。2在每一微孔中加入50ul褪黑激素生物素。3在每一微孔內(nèi)加入50ul褪黑激素抗血清。4蓋板,輕輕震板,2-8℃下溫育14-20小時(shí)。5移去粘性金屬板,棄取孔內(nèi)反應(yīng)液,每孔用250ul稀釋好的檢測(cè)緩沖液洗板3次,吸水紙上拍干以除出殘余液體。6在每一微孔中加入150ul臨時(shí)配置好的酶聯(lián)物。7蓋板,室溫(18-25℃)軌道振蕩器上(500rpm)溫育120min。8大約在溫育結(jié)束10分鐘前準(zhǔn)備好PNPP底物液。9移去粘性金屬板,棄取孔內(nèi)反應(yīng)液,每孔用250ul稀釋好的檢測(cè)緩沖液洗板3次,吸水紙上拍干以除出殘余液體。10如果有8道移液器,請(qǐng)用8道移液器加底物液和終止液,加底物液和終止液的時(shí)間間隔應(yīng)當(dāng)相同。使用主動(dòng)置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。11在每一微孔中加入200ul臨時(shí)配置好的PNPP底物液。12室溫(18-25℃)軌道振蕩器上(500rpm)溫育20-40min。13在每一微孔中加入50ulPNPP終止液,輕輕震板以使溶液混合均勻。14加終止液后60min內(nèi)在405nm處讀取OD值。(參考波長(zhǎng):600-650nm)10、結(jié)果計(jì)算在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上或自動(dòng)計(jì)算的方法,以標(biāo)準(zhǔn)品的OD值(Y軸,線性)對(duì)其濃度(X軸,對(duì)數(shù))做一條標(biāo)準(zhǔn)曲線。使用三次回歸、四參數(shù)或雙對(duì)數(shù)曲線方程可以得到更好的標(biāo)準(zhǔn)曲線。在推算標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí),應(yīng)當(dāng)充分利用好每一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)值(明顯逸出的數(shù)值應(yīng)當(dāng)被忽略,再使用更加合理的數(shù)值代替它)。樣品的濃度可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線上直接讀取。從坐標(biāo)紙上讀取結(jié)果時(shí)應(yīng)當(dāng)把起始的稀釋倍數(shù)考慮進(jìn)去。將稀釋了的樣品結(jié)果乘以稀釋因子即可得到其相應(yīng)的結(jié)果。樣品中抗體濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品的樣品,應(yīng)當(dāng)按實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備說明所述的方法進(jìn)行稀釋,并重新檢測(cè)。轉(zhuǎn)換系數(shù):褪黑激素(pg/ml)×4.30=pmol/l典型標(biāo)準(zhǔn)曲線(例子:不能用來定量)標(biāo)準(zhǔn)品褪黑激素(pg/ml)平均OD值OD/ODmax(%)A0.01.517100B3.01.38391.1C101.21480.1D300.86757.1E1000.43428.6F3000.26017.111、期望值實(shí)驗(yàn)結(jié)果不能當(dāng)作確定ZL結(jié)果的**因素,疾病的判斷還應(yīng)當(dāng)與其它臨床觀察和診斷檢測(cè)相結(jié)合。對(duì)明顯健康的一組人群進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn),人體內(nèi)的褪黑激素水平有著明顯的生理周期變化,褪黑激素白天的水平很低,而晚上的水平則很高,而且個(gè)體之間的差異也很大。此外,褪黑激素的水平也與年齡有關(guān)系,其Z高濃度是在嬰兒(3歲)樣品中發(fā)現(xiàn)的。對(duì)6個(gè)明顯健康獻(xiàn)血者的褪黑激素生理周期進(jìn)行研究。褪黑激素大概在白天下午四點(diǎn)Zdi,其平均值是4.6pg/ml;早晨4點(diǎn)達(dá)到**,平均值為77.5pg/ml。健康個(gè)體之間的褪黑激素Z高值差異很大,建議每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都確定自己實(shí)驗(yàn)室的正常值范圍。本譯文僅供參考,詳情請(qǐng)以原文為準(zhǔn)。ZGdu家總代理:深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司辦公地址:深圳市蛇口太子路18號(hào)海景廣場(chǎng)11C研發(fā)ZX:深圳市蛇口沿山路10號(hào)6層電話:0755-26814430,26680196郵政編碼:518067免費(fèi)電話:800-8306296傳真:0755-26814431[詳細(xì)]
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2018-11-14 10:00
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褪黑激素硫酸鹽ELISA Kit使用說明書
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4褪黑激素硫酸鹽ELISAKit使用說明書(德國(guó)IBL:RE54031)1、應(yīng)用范圍此試劑盒可用于人尿液中褪黑激素硫酸鹽(又叫6-羥基褪黑激素硫酸鹽和6-硫酸褪黑激素)的體外定量檢測(cè)。2、前言說明松果體因其在光周期現(xiàn)象中的重要作用,已經(jīng)被人們認(rèn)為是神經(jīng)內(nèi)分泌的傳感器。松果體主要分泌的激素是:N-乙酰-5-甲氧色胺和褪黑激素,褪黑激素一般是由色氨酸合成而來的。血漿褪黑激素的濃度可在夜間達(dá)到**。褪黑激素特有的波動(dòng)變化可以反映出一些關(guān)于時(shí)間變化的信息,如夜晚的長(zhǎng)短。褪黑激素的分泌會(huì)受到神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)。交感神經(jīng)系統(tǒng)在調(diào)節(jié)褪黑激素分泌方面發(fā)揮有重要作用,它主要是通過釋放去甲腎上腺素來調(diào)節(jié)的。據(jù)報(bào)道,褪黑激素分泌方式和水平的變化與人的一些生理狀態(tài)一致,如:失眠、時(shí)差感、情緒低落、壓力大、精神分裂癥、丘腦下部性閉經(jīng)、妊娠、神經(jīng)想食欲缺乏、某些癌癥、免疫系統(tǒng)紊亂和青春期性成熟的影響。大多數(shù)循環(huán)褪黑激素都可在肝內(nèi)代謝成6-羥基褪黑激素,之后變成6-硫酸褪黑激素而隨尿液排除。尿液中6-羥基褪黑激素硫酸鹽的濃度與血液中褪黑激素的總水平有很好的相關(guān)性。3、實(shí)驗(yàn)原理此ELISA試劑盒利用的是競(jìng)爭(zhēng)法的原理。樣品中未知量的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合到包被在微孔中的抗體結(jié)合位點(diǎn)上。溫育后洗板以終止競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)。加入底物液后,溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與樣品中抗原的量成反比。樣品的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線上直接獲取。4、儲(chǔ)存與穩(wěn)定性試劑盒必須在2-8℃的環(huán)境下運(yùn)輸和儲(chǔ)存,避免太陽直射。樣品的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性及試劑準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。如果將包被板密封并儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下時(shí),試劑在有效期內(nèi)穩(wěn)定。5、樣品的采集與儲(chǔ)存尿液實(shí)驗(yàn)必須使用自然產(chǎn)生的尿液,也可使用24小時(shí)內(nèi)產(chǎn)生的尿液。收集病人24小時(shí)內(nèi)產(chǎn)生的尿液,將它加入到含10-15ml6NHCl防腐劑的容器中。為了計(jì)算結(jié)果,請(qǐng)確定尿液的總體積。實(shí)驗(yàn)開始前請(qǐng)先將樣品離心。儲(chǔ)存2-8℃2-8℃避免太陽直射,避免反復(fù)凍融穩(wěn)定性4天15年6、試劑盒成分?jǐn)?shù)量標(biāo)記成分1×12×8MTP包被板,可拆,微孔中包被了抗兔IgG(羊,多克隆)。1×5mlANTISERUM褪黑激素硫酸鹽抗血清,即用,內(nèi)含:兔抗血清、Tris緩沖液和0.01%的硫柳汞1×0.2mlENZCONJCONC酶聯(lián)物,40倍濃縮,內(nèi)含過氧酶標(biāo)記的褪黑激素硫酸鹽、Tris緩沖液和1%的硫柳汞。1×7×0.1mlCALA-G標(biāo)準(zhǔn)品A-G,0;1.7;5.2;15.6;46.7;140;420ng/mL0;5.2;15.9;47.6;142;427;1281nmol/L。即用,內(nèi)含褪黑激素硫酸鹽、Tris緩沖液和0.01%的硫柳汞。1×2×0.1mlCONTROL1+2質(zhì)控品1+2,即用,內(nèi)含0.02%的;硫柳汞。具體濃度及可允許范圍請(qǐng)見試劑瓶標(biāo)簽。1×60mlASSAYBUFCONC檢測(cè)緩沖液,紅色,即用,內(nèi)含Tris緩沖液、BSA和0.01%的硫柳汞。1×50mlWASHBUFCONC洗滌液,20倍濃縮,內(nèi)含磷酸緩沖液、吐溫和0.1%的硫柳汞。1×0.9mlTMBSUBSCONCTMB底物液,31倍濃縮,內(nèi)含TMB、緩沖液和穩(wěn)定劑。1×27mlTMB緩沖液TMB底物緩沖液,儲(chǔ)存時(shí)避免太陽直射,即用,內(nèi)含H2O2、檸檬酸鹽緩沖液和穩(wěn)定劑。1×12mlTMBSTOPTMB終止液,即用,1M的H2SO4。3×FOIL粘性金屬板7、實(shí)驗(yàn)所需器材但試劑盒不提供1)移液器,體積:10;50;100;1000ul2)試管(12×75mm)3)試管架4)振蕩器(500rpm)5)旋渦混合器(500rpm)6)帶儲(chǔ)器的8道移液器7)洗滌瓶,自動(dòng)或半自動(dòng)洗板機(jī)8)酶標(biāo)儀(參考波長(zhǎng):600-650nm)9)蒸餾水或去離子水10)吸水紙、取樣吸頭和計(jì)時(shí)器8、實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備說明8.1凍干或濃縮成分的準(zhǔn)備稀釋/溶解成分稀釋劑比例備注儲(chǔ)存穩(wěn)定性15ml洗滌液300ml雙蒸水1:2018-25℃將晶體溶解掉2-8℃4周50ul酶聯(lián)物2ml檢測(cè)緩沖液1:41臨時(shí)配置,只能使用一次18-25℃30min300ulTMB底物液9mlTMB底物緩沖液1:31臨時(shí)配置,只能使用一次18-25℃10min8.2標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和病人尿液樣品的稀釋1將標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和病人尿液樣品分別10ul加入到聚苯乙烯或聚丙烯或玻璃試管中,避免太陽直射。2在每一試管中加入500ul檢測(cè)緩沖液,旋渦混合。褪黑激素硫酸鹽濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品濃度的樣品必須用檢測(cè)緩沖液進(jìn)行進(jìn)一步的稀釋。9、實(shí)驗(yàn)步驟1將已稀釋好的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和病人樣品分別50ul加入到相應(yīng)的微孔中。2在每一微孔中加入50ul臨時(shí)配置好的酶聯(lián)物。3在每一微孔內(nèi)加入50ul褪黑激素硫酸鹽抗血清。4蓋板,室溫(18-25℃)包被板振蕩器(500rpm)溫育2小時(shí)。5在溫育快要結(jié)束的10分鐘前,請(qǐng)將TMB底物液準(zhǔn)備好。6移去粘性金屬板,棄取孔內(nèi)反應(yīng)液,每孔用250ul稀釋好的洗滌液洗板4次,吸水紙上拍干以除出殘余液體。7如果可以的話,請(qǐng)用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液的時(shí)間間隔應(yīng)當(dāng)相同,使用8在每一微孔中加入200ulTMB底物液。9室溫(18-25℃)包被板振蕩器(500rpm)溫育30min。10在每一微孔中加入100ulTMB終止液,輕請(qǐng)振板以混合溶液。11加終止液后60min內(nèi)在450nm處讀取OD值。10、期望值實(shí)驗(yàn)結(jié)果不能當(dāng)作確定ZL結(jié)果的**因素,疾病的判斷還應(yīng)當(dāng)與其它臨床觀察和診斷檢測(cè)相結(jié)合。以下為明顯正常人群褪黑激素硫酸鹽的正常值:年齡數(shù)目褪黑激素硫酸鹽24小時(shí)尿液(ug)夜間尿液(ug/h)平均值90%的比例平均值90%的比例20-352636.815.6-58.12.80.9-5.636-501729.69.9-52.92.10.6-3.651-651620.412.3-32.81.50.9-2.5>1615.87.5-32.71.00.3-2.3建議每個(gè)實(shí)驗(yàn)室讀確定自己的正常值范圍本譯文僅供參考,詳情請(qǐng)以原文為準(zhǔn)。ZGdu家總代理:深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司辦公地址:深圳市蛇口太子路18號(hào)海景廣場(chǎng)11C研發(fā)ZX:深圳市蛇口沿山路10號(hào)6層電話:0755-26814430,26680196郵政編碼:518067免費(fèi)電話:800-8306296傳真:0755-26814431[詳細(xì)]
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2018-11-14 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人黑色素ELISA Kit說明書
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2014-08-21 00:00
安裝說明
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人內(nèi)皮脂肪酶E(EL)ELISA試劑盒說明書
- 人內(nèi)皮脂肪酶E(EL)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人EL單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的EL與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人EL,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液,在450nm處測(cè)OD值,EL濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中EL濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):72ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.3ml蒸餾水混勻,配成240ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,每管加入標(biāo)本稀釋液300ul。在**管中加入240ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品120、60、30、15、7.5、3.75、1.875、0ng/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)EL含量即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的EL檢測(cè)濃度小于1ng/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人EL。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:01
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2014-08-22 00:00
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2014-08-22 00:00
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2014-08-21 00:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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