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預(yù)測細胞毒性新方法
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本文由 美谷分子儀器(上海)有限公司 整理匯編
2021-02-19 13:57 445閱讀次數(shù)
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在體外快速的、GX的、可靠的早期預(yù)測毒性對藥物研發(fā)、減少藥物臨床試驗風(fēng)險至關(guān)重要。利用現(xiàn)代生命科學(xué)的新進展,建立和應(yīng)用新藥臨床前安全性評價和毒理學(xué)機制研究的新技術(shù)、新方法和新模型成為當(dāng)今國際新藥研發(fā)的新趨勢。
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預(yù)測細胞毒性新方法
- 在體外快速的、GX的、可靠的早期預(yù)測毒性對藥物研發(fā)、減少藥物臨床試驗風(fēng)險至關(guān)重要。利用現(xiàn)代生命科學(xué)的新進展,建立和應(yīng)用新藥臨床前安全性評價和毒理學(xué)機制研究的新技術(shù)、新方法和新模型成為當(dāng)今國際新藥研發(fā)的新趨勢。[詳細]
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2021-02-19 13:57
應(yīng)用文章
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細胞趨化實驗新方法(二)--實時觀察細胞動態(tài)
- 細胞趨化實驗新方法(二)--實時觀察細胞動態(tài)[詳細]
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2016-04-26 00:00
產(chǎn)品樣冊
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細胞趨化實驗新方法:可實時觀察細胞動態(tài)
- 細胞趨化實驗新方法:可實時觀察細胞動態(tài)[詳細]
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2016-04-26 00:00
報價單
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CCK-8|細胞增殖、細胞毒性試劑盒|參數(shù)說明
- CCK-8|細胞增殖、細胞毒性試劑盒相關(guān)資料產(chǎn)品簡介:CellCountingKit-8(CCK-8試劑盒)是由同仁化學(xué)研究所(Do極ndo)開發(fā)的檢測細胞增殖、細胞毒性的試劑盒,為MTT法的替代方法,試劑盒中采用自己開發(fā)的水溶性四唑鹽-WST-8,在美國,歐洲等國家地區(qū)均持有ZL,同仁化學(xué)研究所于2006年在ZG獲得了WST-8的注冊商標(biāo)。CCK-8法與普通的MTT法相比,具有顯著特點:★靈敏度高,數(shù)據(jù)可靠,重現(xiàn)性好★操作簡便,省時省力★水溶性,不需要換液,尤其適合于懸浮細胞★無需放射性同位素和有機溶劑,對細胞毒性低★為1瓶溶液,毋需預(yù)制,即開即用★適合于高通量藥物篩選CCK-8用途:藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗CCK-8試劑盒在國內(nèi)知名科研院所、ZD大學(xué)、三甲醫(yī)院被廣泛應(yīng)用,國際認可度高,使用CCK-8發(fā)表的中外文獻達600多篇,其中截止08年底SCI影響因子IF>10分的論文有37篇,Z高IF26.5分[HeterozygositywithrespecttoZfp148causescompletelossoffetalgermcellsduringmouseembryogenesis,NatureGenetics33,172-176(01Feb2003)]CCK-8試劑與MTT等方法靈敏度比較CCK-8試劑盒特價促銷CCK-8試劑盒特價促銷專業(yè)生化試劑生產(chǎn)商|專業(yè)分子試劑供應(yīng)商特價850【021-54100800】產(chǎn)品明細:CCK-8試劑盒利用了同仁化學(xué)研究所(Do極ndo)開發(fā)的四唑鹽WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),它在電子載體1-MethoxyPMS存在的情況下能夠被還原成水溶性的甲染料。CCK-8溶液可以直接加入到細胞樣品中;不需要預(yù)配各種成分。CCK-8法是用于測定細胞增殖或細胞毒性試驗中活細胞數(shù)目的一種高靈敏度,無放射性的比色檢測法。CCK-8被細胞內(nèi)脫氫酶生物還原后生成的橙色甲染料能夠溶解在組織培養(yǎng)基中,生成的甲量與活細胞數(shù)量成正比。WST-8法檢測細胞增殖、細胞毒性實驗的靈敏度比其它四唑鹽如MTT,XTT,MTS或WST-1高。由于CCK-8溶液相當(dāng)穩(wěn)定,并且對細胞沒有毒性,因此可以長時間孵育。CCK-8檢測步驟1.向各孔中加入100μl細胞懸液。a)2.在37℃下預(yù)孵育培養(yǎng)板。b)3.向各孔中加入各濃度的待測溶液c)10μl。4.37℃下孵育。5.向各孔中加入10μl的CCK-8溶液d)。6.37℃下孵育1-4小時。e)7.測定450nm處的OD值。a)使用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基制備50,000-100,000個/ml的細胞懸液。b)建議使用CO2培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng)。c)使用培養(yǎng)基或PBS來制備溶液。d)如果待測溶液有還原性,測定不含細胞,但含有CCK-8的待測溶液在450nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入CCK-8,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的100μl培養(yǎng)基和10μlCCK-8進行檢測。e)白細胞可能需要培養(yǎng)較長時間。CCK-8試劑盒特價促銷CCK-8試劑盒特價促銷專業(yè)生化試劑生產(chǎn)商專業(yè)分子試劑供應(yīng)商特價【021-54100800】優(yōu)質(zhì)試劑!質(zhì)量放心!價格Zdi!為ZG生物產(chǎn)業(yè)做貢獻歡迎新老客戶咨詢[詳細]
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2018-09-02 10:00
產(chǎn)品樣冊
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Agilent xCELLigence 實時細胞分析:檢測病毒介導(dǎo)的細胞致病性的新方法
- Agilent xCELLigence 實時細胞分析:檢測病毒介導(dǎo)的細胞致病性的新方法[詳細]
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2024-09-21 13:21
應(yīng)用文章
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使用自動細胞成像系統(tǒng)進行細胞毒性評價和細胞活死測定
- 細胞活 / 死測定被廣泛應(yīng)用于各種研究領(lǐng)域,包括各種化合物的細胞毒性作用、實驗處理或基因表達變化的研究。[詳細]
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2024-09-11 18:18
應(yīng)用文章
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使用誘導(dǎo)多能干細胞來源細胞的毒性測定
- 藥物導(dǎo)致的器官毒性是藥物進入市場失敗的重要原因。所以,對藥物安全及藥物效果的高度預(yù)測是改善藥物開發(fā)和減少候選藥物損失至關(guān)重要的一環(huán)。人類誘導(dǎo)多能干細胞(iPSC)來源的肝細胞和神經(jīng)元所展現(xiàn)的典型特征與成熟細胞的代謝特點,是用于早期藥物開發(fā)的高通量篩選的理想材料。[詳細]
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2021-02-19 13:57
應(yīng)用文章
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傷口愈合/細胞劃痕實驗新方法-如何劃出筆直均一的劃痕
- 傷口愈合/細胞劃痕實驗新方法-如何劃出筆直均一的劃痕[詳細]
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2016-04-26 00:00
應(yīng)用文章
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人細胞毒性T淋巴細胞相關(guān)抗原4elisa定量試劑盒
- 人細胞毒性T淋巴細胞相關(guān)抗原4elisa定量試劑盒年終火力全開,我們提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測,對收集后及時進行檢測,其適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型,價格優(yōu)惠,質(zhì)量保證,Zda限度的節(jié)省實驗經(jīng)費。英文學(xué)名:HumancytotoxicTlymphocyteassociatedantigen4,CTLA-4ELISAKit科研名稱:人細胞毒性T淋巴細胞相關(guān)抗原4(CTLA-4)ELISA檢測試劑盒操作原理:細胞毒性T淋巴細胞相關(guān)抗原4(cytotoxicTlymphocyteantigen-4CTLA-4)是表達于淋巴細胞表面的與免疫信號傳遞相關(guān)的免疫球蛋白超家族競爭性的與B7結(jié)合。當(dāng)CTLA-4與其配體B7結(jié)合后CD28便失去與B7結(jié)合傳遞刺激性信號的機會T細胞的活化受到Y(jié)ZT細胞殺傷腫瘤細胞的功能便會降低。CTLA-4基因多態(tài)性通過多種方式影響其蛋白分子的表達與多種疾病的發(fā)SF展相關(guān)。E-(Hu)(12)-06674人Syndecan-3/(SDC3)ELISA檢測,英文名:SDC3ELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06675人s腺苷同型半胱氨酸(SAH)ELISA檢測,英文名:S-adenosylhomocysteine,SAHELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06676人TARDNA結(jié)合蛋白43(TARDBP/TDP43)ELISA檢測,英文名:TARDBPELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06677人TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)ELISA檢測,英文名:TIEG1ELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06678人TH糖蛋白(THP)ELISA檢測,英文名:THPELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06679人Toll樣受體1(TLR1)ELISA檢測,英文名:TLR1ELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06680人Toll樣受體3(TLR3)ELISA檢測,英文名:TLR3ELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06681人Toll樣受體4(TLR4)ELISA檢測,英文名:TLR4ELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06682人Toll樣受體5(TLR5)ELISA檢測,英文名:TLR5ELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06683人Toll樣受體6(TLR6)ELISA檢測,英文名:TLR6ELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06684人Toll樣受體7(TLR7)ELISA檢測,英文名:TLR7ELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06685人Toll作用蛋白(TOLLIP)ELISA檢測,英文名:TOLLIPELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06686人Traf2結(jié)合蛋白(T2BP)ELISA檢測,英文名:T2BPELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06687人Trem樣轉(zhuǎn)錄因子1(TREML1)ELISA檢測,英文名:TREML1ELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06688人T淋巴細胞白血病病毒Ⅰ/II(HTLV-Ⅰ/II)抗體ELISA檢測,英文名:HTLV-Ⅰ/IIantibodyELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06689人T細胞表面糖蛋白CD1a(CD1A)ELISA檢測,英文名:CD1AELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06690人U1小核核糖核蛋白A(SNRPA)ELISA檢測,英文名:SNRPAELISAkit,規(guī)格:48T/96T[詳細]
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2018-09-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細胞品質(zhì)、藥效和毒性評價的定制性服務(wù)
- 細胞品質(zhì)、藥效和毒性評價的定制性服務(wù)[詳細]
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2024-09-14 19:10
應(yīng)用文章
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干細胞培養(yǎng)新方法
- 現(xiàn)有人類胚胎干細胞的培養(yǎng)和誘導(dǎo)分化,都離不開動物源培養(yǎng)基,比如從實驗鼠身上分離出來的結(jié)締組織細胞和牛胚胎血清等。選擇Zyou化的細胞培養(yǎng)基對于ES的研究及臨床應(yīng)用是至關(guān)重要的。胚胎干細胞(ES)是一種永生化細胞因子,在適宜培養(yǎng)條件下具有的自我更新能力并維持未分化狀態(tài)、高端粒酶活性、正常核型、胚胎表面標(biāo)志及多潛能轉(zhuǎn)錄因子的表達,如SSEA、OCT-4、Nanog等。ES被認為可以提供一種理想的生物學(xué)平臺,用于多方面的科學(xué)研究與臨床應(yīng)用,如藥物篩選平臺的建立、細胞發(fā)育與分化的分子調(diào)節(jié)機制研究、基因靶向敲除動物模型的構(gòu)建、組織工程種子細胞及基因ZL載體的建立、細胞ZL及再生醫(yī)學(xué)等。以往研究表明,基質(zhì)表面的化學(xué)和物理特性,比如粗糙度、硬度、對水的親和力等對干細胞生長有影響。研究人員創(chuàng)造了500種特性不同的聚合物并在上面培養(yǎng)干細胞,分析每個聚合物上面細胞的生長狀況。他們發(fā)現(xiàn),基質(zhì)表面疏水性對細胞生長有個**范圍,而表面糙度和硬度則沒有太多影響。此外,他們調(diào)整**聚合物的組成為:高比例的丙烯酸酯,外面包裹玻連蛋白。多能干細胞培養(yǎng)目前存在一些問題,比如如何培養(yǎng)足夠量的多功能干細胞,如何能避免培養(yǎng)人類干細胞的材料發(fā)生免疫反應(yīng)。在培養(yǎng)人類干細胞的材料方面,近期來自麻省理工的研究人員發(fā)明了一種合成性基質(zhì),這種基質(zhì)沒有外來動物材料,能夠使干細胞至少三個月保持活性并自我繁殖。而且,該合成性基質(zhì)S次使得單細胞能夠形成細胞集落。這一成果公布在NatureMaterials雜志上。應(yīng)用這種新的培養(yǎng)基質(zhì),研究人員成功實現(xiàn)了人類胚胎干細胞持續(xù)三個月的生長和分裂,并獲得了大量的細胞。他們將進一步研究,爭取將這種培養(yǎng)基質(zhì)應(yīng)用到其它類細胞另外針對如何能夠培養(yǎng)足夠量的多功能干細胞呢?來自俄亥俄州立大學(xué)研究人員研制出一種大批量生產(chǎn)胚胎干細胞(mass-producingembryonicstemcells)的新方法。用傳統(tǒng)的實驗室方法生產(chǎn)干細胞不僅價格高,Z主要的是不能滿足日益增長的對人類胚胎干細胞的需要。研究人員在一種生物反應(yīng)器(bioreactor)中培養(yǎng)小鼠胚胎干細胞。細胞數(shù)量在15天內(nèi)擴增了193倍,實驗尾期的細胞密度反應(yīng)器中的細胞數(shù)是用實驗室傳統(tǒng)方法得到的10-100倍,也就意味著多出數(shù)億的干細胞。并且檢測結(jié)果顯示,bioreactor中的干細胞未分化程度更高,壽命更長。這種類型的大批量生產(chǎn)因為需要更少的設(shè)備和管理,因此干細胞生產(chǎn)成本降低了80%。實驗過程中,研究人員分別在flask中(傳統(tǒng)細胞培養(yǎng)方法)和bioreactor中的標(biāo)準高聚物螺紋上培養(yǎng)小鼠干細胞。用flask和用bioreactor培養(yǎng)干細胞的不同之處在于:細胞在bioreactor中能夠向三維空間生長,而在flask的底部平面上只能向二維平面上生長。bioreactor培養(yǎng)的細胞相對于flask培養(yǎng)的細胞壽命長,因為細胞有更多的空間。研究人員使用的bioreactor實際上是一種組織生長設(shè)備(tissue-growingdevice),能夠用于培養(yǎng)成人干細胞,并且能夠使研究人員對培養(yǎng)過程中的每個胚胎干細胞進行緊密跟蹤。新型bioreactor有兩個格室(chamber),一個格室內(nèi)包含可以支持干細胞生長的高聚物螺紋,一個格室內(nèi)含有液態(tài)培養(yǎng)基。這種液態(tài)培養(yǎng)基能夠向干細胞傳遞炎癥因子,維持干細胞未分化狀態(tài)。研究人員以兩種蛋白為指標(biāo)檢測flask和bioreactor得到的細胞(蛋白的出現(xiàn)標(biāo)志干細胞還沒有分化)。檢測結(jié)果顯示,用bioreactor培養(yǎng)的細胞94%呈陽性,用flask培養(yǎng)的細胞85%呈陽性。除此之外,以色列耶路撒冷哈達薩大學(xué)的研究人員開發(fā)出一種新的干細胞培養(yǎng)基,能讓干細胞在更長時間內(nèi)不分化。這項研究成果發(fā)表在《NatureBiotechnology》上。為了保持hESC存活且具有多能性,研究人員通常在滋養(yǎng)層細胞(也就是一層小鼠胚胎成纖維細胞)上培養(yǎng),或者在微載體上成簇培養(yǎng)。但是在這些基質(zhì)上培養(yǎng)干細胞是相當(dāng)昂貴的,而且培養(yǎng)物不能在很長時間內(nèi)保持未分化狀態(tài),盡管所有必需的生長因子都存在。為了驗證他們的理論,研究小組定制了培養(yǎng)基。他們在Neurobasal培養(yǎng)基中加入了血清替代物,還加入了干細胞生長所需的蛋白,包括細胞外基質(zhì)組分、神經(jīng)營養(yǎng)因子、成纖維細胞生長因子2和活化素A。研究人員在常規(guī)的無血清培養(yǎng)基和定制培養(yǎng)基中培養(yǎng)了hESC。三個星期之后,定制培養(yǎng)基中存在更多的未分化hESC細胞。研究人員分析hESC簇分化成神經(jīng)細胞,他們一直在使用Invitrogen的Neurobasal培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基能夠在無滋養(yǎng)層的條件下長時間維持神經(jīng)細胞的生長和正常表型。在研究過程中,研究人員注意到并非所有細胞都分化了。他們懷疑是培養(yǎng)基的選擇導(dǎo)致了這種現(xiàn)象,于是他們開始集中精力研究培養(yǎng)基如何促進干細胞生長并YZ分化。使用這種新的培養(yǎng)基,研究小組檢驗了三種不同的hESC系。他們利用熒光激活細胞分選(FACS)在7周和20周后分析了培養(yǎng)物,發(fā)現(xiàn)90%的細胞仍維持多能性。這項突破為在計算機化的自動系統(tǒng)中大規(guī)模擴增胚胎干細胞創(chuàng)造了可能性。此外,通過改變培養(yǎng)條件,還可能進一步指導(dǎo)干細胞長成特定的細胞類型,用于研究或病人的移植。[詳細]
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2018-10-03 10:00
產(chǎn)品樣冊
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毒性分析儀
- DeltaToxII便攜式毒性及生物污染物檢測DeltaToxII是一款簡單快捷且靈敏度極高的便攜式水質(zhì)檢測儀,專門為篩查急性毒性及三磷酸腺苷(ATP)而設(shè)計。DeltaToxII使用生物熒光技術(shù),對飲用水污染及化學(xué)品進入水體等造成的緊急事件進行快速毒性檢測。DeltaToxII是使用Microtox技術(shù)進行毒性測定的便攜儀器。病原微生物和有毒化學(xué)品為兩大類產(chǎn)生毒性的物質(zhì),DeltaToxII對這兩類物質(zhì)具有廣泛又靈敏快速的檢測能力。這兩類物質(zhì)可通過意外事故或者人為手段對飲用水或者污水造成污染。DeltaToxII對急性毒性和ATP的檢測能力使它成為全程評估受污染事件影響的飲用水水質(zhì)的理想工具。檢測未知污染物的綜合影響(協(xié)同效應(yīng))對超過2700種簡單或復(fù)雜化合物有響應(yīng)五分鐘得到結(jié)果(不包括樣品的預(yù)處理時間)與HPC(異養(yǎng)菌平板計數(shù))方法有極好的相關(guān)性性價比高完全便攜水體中微生物檢測限-100cfu/mLDeltaToxII可在給水系統(tǒng)或工業(yè)廢水系統(tǒng)任何地點采樣測試,尤其適用于遠離分析設(shè)施的地點,如水庫,儲水箱,自然水體及任何難以到達的地方。飲用水及廢水中的化學(xué)污染DeltaToxII是業(yè)界領(lǐng)xian的MicrotoxM500型測試儀(用于實驗室測試)的便攜版。DeltaToxII的測試快速,簡捷,使用樣本量少,經(jīng)濟實用。測試結(jié)果與使用其它生物體,如魚,蝦,大型蚤等進行生物檢測的結(jié)果具有良好的相關(guān)性。DeltaToxII被廣泛用于檢測水的毒性是否與其用途相符,以及檢測廢水處理廠排出水的毒性。DeltaToxII測試的特性使它極為適合用作飲用水監(jiān)管,在飲用水管網(wǎng),重要取水點等進行監(jiān)測。它可以快速檢測出飲用水中毒性的變化,對于保證大型活動的供水安全起到至關(guān)重要的作用。自1984年的亞特蘭大奧運會以來,所有歷屆夏季奧運會都采用了Microtox技術(shù)監(jiān)測水質(zhì)。在工業(yè)及城市廢水處理中,DeltaToxII幫助確保達到廢水處理標(biāo)準,檢測進水的毒性,確定處理效率。飲用水的微生物污染DeltaToxII可以快速地評估飲用水樣品中的微生物濃度至100cfu/ml,且不需要對樣品進行過濾或培養(yǎng)。幾分鐘就可得到結(jié)果,而且與HPC方法得到的結(jié)果相關(guān)性良好。DeltaToxII對微生物毒性有極好的響應(yīng)度,被廣泛用于需要快速測定生物毒性的各個領(lǐng)域。DELTATOXII的配置外觀尺寸20cmx18cmx10cm(8”x7”x4”)重量1kg(2.2lbs)電源內(nèi)置鋰電池,或標(biāo)準直流電源(15Vdc@4amps)儀器操作溫度0°C-40°C試劑使用溫度10°C-28°C動態(tài)測量范圍1to6千萬計數(shù)(大約)CE認證是顯示屏背光LCD,8行x20字符/行數(shù)據(jù)端口USB數(shù)據(jù)存儲6.5KB(大約600個讀數(shù))數(shù)據(jù)處理機內(nèi)處理或下載到電腦;內(nèi)置軟件提示操作步驟,記錄光強讀數(shù),自動計算毒性值供即時查看測SY生物試劑凍干菌(Vibriofischeri)生物試劑保存冷凍,-15°Cto-25°C水合2小時(室溫)ATP試劑保存冷藏測試模式毒性測試(Q-Tox和B-Tox模式)及ATP測量模式測試時間1-60分鐘測試標(biāo)準測量指定與樣品接觸時間后試劑的光輸出結(jié)果顯示毒性測試:百分比光損失,或百分比光增加ATP測試:光子數(shù)重復(fù)性(精度)Q-Tox和B-Tox:<20%變異系數(shù)光子數(shù):計數(shù)范圍06千萬光子數(shù)過程簡述DeltaToxII執(zhí)行雙重功能:毒性測試和確定微生物污染。DeltaToxII使用自然界中存在的發(fā)光菌(Vibriofischeri)進行毒性測試。這種細菌在正常的新陳代謝過程中伴隨發(fā)光。如果置于有毒環(huán)境中,它們的細胞呼吸過程受到影響,造成發(fā)光量的減弱。DeltaToxII的發(fā)光檢測器測量發(fā)光菌暴露在有毒環(huán)境之前和之后的發(fā)光量,發(fā)光量的減少程度對應(yīng)了毒性的強弱。所有的生物體都合成ATP作為它們的主要能量來源。樣品中ATP的含量直接表征了所含的生物量。ATP與特定的熒光素/熒光素酶發(fā)生反應(yīng)。自然界中螢火蟲的尾部含有這種酶,把ATP轉(zhuǎn)化為光能。在反應(yīng)過程中,每個ATP分子會產(chǎn)生一個光子。DeltaToxII可以很極ng確地測量反應(yīng)過程的光輸出,從而確定ATP的含量,進而確定相對應(yīng)的生物量。[詳細]
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2018-11-24 10:00
產(chǎn)品樣冊
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產(chǎn)品應(yīng)用(91)細胞毒性:在SpectraMax L化學(xué)發(fā)光微孔板讀板機上用Lonza ViaLight Plus和ToxiLight檢測試劑盒進行細胞毒性檢測
- 生物發(fā)光細胞毒性檢測能提供更高的檢測限、速度和準確性, 已有文獻證實(Crouch et al., 1993)。[詳細]
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2021-02-26 12:28
應(yīng)用文章
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熱休克蛋白70減輕帕金森病細胞模型中-突觸核蛋白毒性的
- 熱休克蛋白70減輕帕金森病細胞模型中-突觸核蛋白毒性的[詳細]
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2013-11-21 00:00
實驗操作
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小鼠細胞毒性T淋巴細胞相關(guān)抗原4 (CTLA-4)ELISA試劑盒
- 小鼠細胞毒性T淋巴細胞相關(guān)抗原4(CTLA-4)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗小鼠CTLA-4單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準品和樣品中的CTLA-4與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗小鼠CTLA-4,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,CTLA-4濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準曲線求出標(biāo)本中CTLA-4濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準品(Standards):30ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、尿液等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清可能需要稀釋,請先做預(yù)實驗,以確定稀釋倍數(shù)。2.標(biāo)準品液配制:使用前加入3ml蒸餾水混勻,配成10ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入10ng/ml的標(biāo)準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)CTLA-4含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的CTLA-4檢測濃度小于8pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的小鼠CTLA-4。不與小鼠其它細胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于11%。注意事項1.以上標(biāo)準孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
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下一級毒性篩選: 從單一通道到整體細胞行為
- 許多先導(dǎo)化合物在后期階段失效藥物的開發(fā)過程主要由對肝臟、心臟或其他器官。因此,設(shè)備早期檢測可能的細胞毒性對發(fā)展過程的高度評價要求。特別是離子通道是一類重要的藥物靶點用于體外藥理學(xué)分析。
高通量篩選(HTS)分析作為自動電生理貼片鉗位和阻抗分析允許用于測定a的藥物作用全細胞水平,人工雙細胞水平為。提供一個健壯的環(huán)境評估單個離子通道分子。我們在此報告心肌細胞96a系統(tǒng)提供電氣的組合阻抗譜(EIS)以及a的電場電位(EFP)讀數(shù)不同細胞的網(wǎng)絡(luò),比如iPS心肌細胞或肝細胞樣細胞毒性作用是什么利用參照化合物,如多非利特(對iPS心肌細胞)或撲熱息痛(對肝細胞樣細胞)。此外,我們提出了溫度依賴的激活或失活不同瞬時受體電位(TRP)
通道采用平面貼片夾緊我們的HTS平臺和SyncroPatch 384PE以及單通道級別的ZG分辨率在我們Z近推出的OM裝置上。[詳細]
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2021-09-01 13:51
應(yīng)用文章
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自然殺傷細胞活性和抗體依賴性細胞介導(dǎo)的細胞毒性的實時無標(biāo)記檢測
- 自然殺傷細胞活性和抗體依賴性細胞介導(dǎo)的細胞毒性的實時無標(biāo)記檢測[詳細]
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2024-09-27 23:57
應(yīng)用文章
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預(yù)測沉降/穩(wěn)定性問題
- 預(yù)測沉降/穩(wěn)定性問題[詳細]
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2007-11-06 00:00
實驗操作
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硬度深度分布測試新方法
- 硬度深度分布測試新方法[詳細]
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2024-09-12 18:29
課件
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