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CCK-8|細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性試劑盒|參數(shù)說明
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CCK-8|細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性試劑盒相關(guān)資料產(chǎn)品簡介:CellCountingKit-8(CCK-8試劑盒)是由同仁化學(xué)研究所(Do極ndo)開發(fā)的檢測細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性的試劑盒,為MTT法的替代方法,試劑盒中采用自己開發(fā)的水溶性四唑鹽-WST-8,在美國,歐洲等國家地區(qū)均持有ZL,同仁化學(xué)研究所于2006年在ZG獲得了WST-8的注冊商標(biāo)。CCK-8法與普通的MTT法相比,具有顯著特點:★靈敏度高,數(shù)據(jù)可靠,重現(xiàn)性好★操作簡便,省時省力★水溶性,不需要換液,尤其適合于懸浮細(xì)胞★無需放射性同位素和有機(jī)溶劑,對細(xì)胞毒性低★為1瓶溶液,毋需預(yù)制,即開即用★適合于高通量藥物篩選CCK-8用途:藥物篩選、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗CCK-8試劑盒在國內(nèi)知名科研院所、ZD大學(xué)、三甲醫(yī)院被廣泛應(yīng)用,國際認(rèn)可度高,使用CCK-8發(fā)表的中外文獻(xiàn)達(dá)600多篇,其中截止08年底SCI影響因子IF>10分的論文有37篇,Z高IF26.5分[HeterozygositywithrespecttoZfp148causescompletelossoffetalgermcellsduringmouseembryogenesis,NatureGenetics33,172-176(01Feb2003)]CCK-8試劑與MTT等方法靈敏度比較CCK-8試劑盒特價促銷CCK-8試劑盒特價促銷專業(yè)生化試劑生產(chǎn)商|專業(yè)分子試劑供應(yīng)商特價850【021-54100800】產(chǎn)品明細(xì):CCK-8試劑盒利用了同仁化學(xué)研究所(Do極ndo)開發(fā)的四唑鹽WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),它在電子載體1-MethoxyPMS存在的情況下能夠被還原成水溶性的甲染料。CCK-8溶液可以直接加入到細(xì)胞樣品中;不需要預(yù)配各種成分。CCK-8法是用于測定細(xì)胞增殖或細(xì)胞毒性試驗中活細(xì)胞數(shù)目的一種高靈敏度,無放射性的比色檢測法。CCK-8被細(xì)胞內(nèi)脫氫酶生物還原后生成的橙色甲染料能夠溶解在組織培養(yǎng)基中,生成的甲量與活細(xì)胞數(shù)量成正比。WST-8法檢測細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性實驗的靈敏度比其它四唑鹽如MTT,XTT,MTS或WST-1高。由于CCK-8溶液相當(dāng)穩(wěn)定,并且對細(xì)胞沒有毒性,因此可以長時間孵育。CCK-8檢測步驟1.向各孔中加入100μl細(xì)胞懸液。a)2.在37℃下預(yù)孵育培養(yǎng)板。b)3.向各孔中加入各濃度的待測溶液c)10μl。4.37℃下孵育。5.向各孔中加入10μl的CCK-8溶液d)。6.37℃下孵育1-4小時。e)7.測定450nm處的OD值。a)使用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基制備50,000-100,000個/ml的細(xì)胞懸液。b)建議使用CO2培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng)。c)使用培養(yǎng)基或PBS來制備溶液。d)如果待測溶液有還原性,測定不含細(xì)胞,但含有CCK-8的待測溶液在450nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入CCK-8,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的100μl培養(yǎng)基和10μlCCK-8進(jìn)行檢測。e)白細(xì)胞可能需要培養(yǎng)較長時間。CCK-8試劑盒特價促銷CCK-8試劑盒特價促銷專業(yè)生化試劑生產(chǎn)商專業(yè)分子試劑供應(yīng)商特價【021-54100800】優(yōu)質(zhì)試劑!質(zhì)量放心!價格Zdi!為ZG生物產(chǎn)業(yè)做貢獻(xiàn)歡迎新老客戶咨詢
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CCK-8|細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性試劑盒|參數(shù)說明
- CCK-8|細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性試劑盒相關(guān)資料產(chǎn)品簡介:CellCountingKit-8(CCK-8試劑盒)是由同仁化學(xué)研究所(Do極ndo)開發(fā)的檢測細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性的試劑盒,為MTT法的替代方法,試劑盒中采用自己開發(fā)的水溶性四唑鹽-WST-8,在美國,歐洲等國家地區(qū)均持有ZL,同仁化學(xué)研究所于2006年在ZG獲得了WST-8的注冊商標(biāo)。CCK-8法與普通的MTT法相比,具有顯著特點:★靈敏度高,數(shù)據(jù)可靠,重現(xiàn)性好★操作簡便,省時省力★水溶性,不需要換液,尤其適合于懸浮細(xì)胞★無需放射性同位素和有機(jī)溶劑,對細(xì)胞毒性低★為1瓶溶液,毋需預(yù)制,即開即用★適合于高通量藥物篩選CCK-8用途:藥物篩選、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗CCK-8試劑盒在國內(nèi)知名科研院所、ZD大學(xué)、三甲醫(yī)院被廣泛應(yīng)用,國際認(rèn)可度高,使用CCK-8發(fā)表的中外文獻(xiàn)達(dá)600多篇,其中截止08年底SCI影響因子IF>10分的論文有37篇,Z高IF26.5分[HeterozygositywithrespecttoZfp148causescompletelossoffetalgermcellsduringmouseembryogenesis,NatureGenetics33,172-176(01Feb2003)]CCK-8試劑與MTT等方法靈敏度比較CCK-8試劑盒特價促銷CCK-8試劑盒特價促銷專業(yè)生化試劑生產(chǎn)商|專業(yè)分子試劑供應(yīng)商特價850【021-54100800】產(chǎn)品明細(xì):CCK-8試劑盒利用了同仁化學(xué)研究所(Do極ndo)開發(fā)的四唑鹽WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),它在電子載體1-MethoxyPMS存在的情況下能夠被還原成水溶性的甲染料。CCK-8溶液可以直接加入到細(xì)胞樣品中;不需要預(yù)配各種成分。CCK-8法是用于測定細(xì)胞增殖或細(xì)胞毒性試驗中活細(xì)胞數(shù)目的一種高靈敏度,無放射性的比色檢測法。CCK-8被細(xì)胞內(nèi)脫氫酶生物還原后生成的橙色甲染料能夠溶解在組織培養(yǎng)基中,生成的甲量與活細(xì)胞數(shù)量成正比。WST-8法檢測細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性實驗的靈敏度比其它四唑鹽如MTT,XTT,MTS或WST-1高。由于CCK-8溶液相當(dāng)穩(wěn)定,并且對細(xì)胞沒有毒性,因此可以長時間孵育。CCK-8檢測步驟1.向各孔中加入100μl細(xì)胞懸液。a)2.在37℃下預(yù)孵育培養(yǎng)板。b)3.向各孔中加入各濃度的待測溶液c)10μl。4.37℃下孵育。5.向各孔中加入10μl的CCK-8溶液d)。6.37℃下孵育1-4小時。e)7.測定450nm處的OD值。a)使用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基制備50,000-100,000個/ml的細(xì)胞懸液。b)建議使用CO2培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng)。c)使用培養(yǎng)基或PBS來制備溶液。d)如果待測溶液有還原性,測定不含細(xì)胞,但含有CCK-8的待測溶液在450nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入CCK-8,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的100μl培養(yǎng)基和10μlCCK-8進(jìn)行檢測。e)白細(xì)胞可能需要培養(yǎng)較長時間。CCK-8試劑盒特價促銷CCK-8試劑盒特價促銷專業(yè)生化試劑生產(chǎn)商專業(yè)分子試劑供應(yīng)商特價【021-54100800】優(yōu)質(zhì)試劑!質(zhì)量放心!價格Zdi!為ZG生物產(chǎn)業(yè)做貢獻(xiàn)歡迎新老客戶咨詢[詳細(xì)]
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2018-09-02 10:00
產(chǎn)品樣冊
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CCK-8試劑盒說明書
- CCK-8試劑盒 WST-8 細(xì)胞增殖 細(xì)胞毒性,是一種基于WST-8的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。
WST-8屬于MTT的升級產(chǎn)品,能在電子載體1-甲氧基PMS的作用下被還原成水溶性甲臜產(chǎn)物,生成的甲臜量與活細(xì)胞數(shù)量成正比,因此顏色的深淺與細(xì)胞的增殖成正比,與細(xì)胞毒性成反比。使用酶標(biāo)儀在450mM波長處測定OD值,可以反映活細(xì)胞數(shù)量。
[詳細(xì)]
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2024-09-12 18:32
實驗操作
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CCK-8試劑盒操作常見問題
- CCK-8試劑盒特價促銷產(chǎn)品簡介:CellCountingKit-8(CCK-8試劑盒)是由同仁化學(xué)研究所(Do極ndo)開發(fā)的檢測細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性的試劑盒,為MTT法的替代方法,試劑盒中采用自己開發(fā)的水溶性四唑鹽-WST-8,在美國,歐洲等國家地區(qū)均持有ZL,同仁化學(xué)研究所于2006年在ZG獲得了WST-8的注冊商標(biāo)。CCK-8法與普通的MTT法相比,具有顯著特點:★靈敏度高,數(shù)據(jù)可靠,重現(xiàn)性好★操作簡便,省時省力★水溶性,不需要換液,尤其適合于懸浮細(xì)胞★無需放射性同位素和有機(jī)溶劑,對細(xì)胞毒性低★為1瓶溶液,毋需預(yù)制,即開即用★適合于高通量藥物篩選CCK-8用途:藥物篩選、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗CCK-8試劑盒在國內(nèi)知名科研院所、ZD大學(xué)、三甲醫(yī)院被廣泛應(yīng)用,國際認(rèn)可度高,使用CCK-8發(fā)表的中外文獻(xiàn)達(dá)600多篇,其中截止08年底SCI影響因子IF>10分的論文有37篇,Z高IF26.5分[HeterozygositywithrespecttoZfp148causescompletelossoffetalgermcellsduringmouseembryogenesis,NatureGenetics33,172-176(01Feb2003)]CCK-8試劑與MTT等方法靈敏度比較CCK-8試劑盒特價促銷CCK-8試劑盒特價促銷專業(yè)生化試劑生產(chǎn)商|專業(yè)分子試劑供應(yīng)商特價850【021-54100800】產(chǎn)品明細(xì):CCK-8試劑盒利用了同仁化學(xué)研究所(Do極ndo)開發(fā)的四唑鹽WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),它在電子載體1-MethoxyPMS存在的情況下能夠被還原成水溶性的甲染料。CCK-8溶液可以直接加入到細(xì)胞樣品中;不需要預(yù)配各種成分。CCK-8法是用于測定細(xì)胞增殖或細(xì)胞毒性試驗中活細(xì)胞數(shù)目的一種高靈敏度,無放射性的比色檢測法。CCK-8被細(xì)胞內(nèi)脫氫酶生物還原后生成的橙色甲染料能夠溶解在組織培養(yǎng)基中,生成的甲量與活細(xì)胞數(shù)量成正比。WST-8法檢測細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性實驗的靈敏度比其它四唑鹽如MTT,XTT,MTS或WST-1高。由于CCK-8溶液相當(dāng)穩(wěn)定,并且對細(xì)胞沒有毒性,因此可以長時間孵育。CCK-8檢測步驟1.向各孔中加入100μl細(xì)胞懸液。a)2.在37℃下預(yù)孵育培養(yǎng)板。b)3.向各孔中加入各濃度的待測溶液c)10μl。4.37℃下孵育。5.向各孔中加入10μl的CCK-8溶液d)。6.37℃下孵育1-4小時。e)7.測定450nm處的OD值。a)使用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基制備50,000-100,000個/ml的細(xì)胞懸液。b)建議使用CO2培養(yǎng)箱過夜預(yù)培養(yǎng)。c)使用培養(yǎng)基或PBS來制備溶液。d)如果待測溶液有還原性,測定不含細(xì)胞,但含有CCK-8的待測溶液在450nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入CCK-8,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的100μl培養(yǎng)基和10μlCCK-8進(jìn)行檢測。e)白細(xì)胞可能需要培養(yǎng)較長時間。CCK-8試劑盒特價促銷CCK-8試劑盒特價促銷專業(yè)生化試劑生產(chǎn)商專業(yè)分子試劑供應(yīng)商特價【021-54100800】優(yōu)質(zhì)試劑!質(zhì)量放心!價格Zdi!為ZG生物產(chǎn)業(yè)做貢獻(xiàn)歡迎新老客戶咨詢[詳細(xì)]
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2018-09-02 10:00
產(chǎn)品樣冊
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預(yù)測細(xì)胞毒性新方法
- 在體外快速的、GX的、可靠的早期預(yù)測毒性對藥物研發(fā)、減少藥物臨床試驗風(fēng)險至關(guān)重要。利用現(xiàn)代生命科學(xué)的新進(jìn)展,建立和應(yīng)用新藥臨床前安全性評價和毒理學(xué)機(jī)制研究的新技術(shù)、新方法和新模型成為當(dāng)今國際新藥研發(fā)的新趨勢。[詳細(xì)]
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2021-02-19 13:57
應(yīng)用文章
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人細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4elisa定量試劑盒
- 人細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4elisa定量試劑盒年終火力全開,我們提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測,對收集后及時進(jìn)行檢測,其適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型,價格優(yōu)惠,質(zhì)量保證,Zda限度的節(jié)省實驗經(jīng)費。英文學(xué)名:HumancytotoxicTlymphocyteassociatedantigen4,CTLA-4ELISAKit科研名稱:人細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4(CTLA-4)ELISA檢測試劑盒操作原理:細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4(cytotoxicTlymphocyteantigen-4CTLA-4)是表達(dá)于淋巴細(xì)胞表面的與免疫信號傳遞相關(guān)的免疫球蛋白超家族競爭性的與B7結(jié)合。當(dāng)CTLA-4與其配體B7結(jié)合后CD28便失去與B7結(jié)合傳遞刺激性信號的機(jī)會T細(xì)胞的活化受到Y(jié)ZT細(xì)胞殺傷腫瘤細(xì)胞的功能便會降低。CTLA-4基因多態(tài)性通過多種方式影響其蛋白分子的表達(dá)與多種疾病的發(fā)SF展相關(guān)。E-(Hu)(12)-06674人Syndecan-3/(SDC3)ELISA檢測,英文名:SDC3ELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06675人s腺苷同型半胱氨酸(SAH)ELISA檢測,英文名:S-adenosylhomocysteine,SAHELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06676人TARDNA結(jié)合蛋白43(TARDBP/TDP43)ELISA檢測,英文名:TARDBPELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06677人TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)ELISA檢測,英文名:TIEG1ELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06678人TH糖蛋白(THP)ELISA檢測,英文名:THPELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06679人Toll樣受體1(TLR1)ELISA檢測,英文名:TLR1ELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06680人Toll樣受體3(TLR3)ELISA檢測,英文名:TLR3ELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06681人Toll樣受體4(TLR4)ELISA檢測,英文名:TLR4ELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06682人Toll樣受體5(TLR5)ELISA檢測,英文名:TLR5ELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06683人Toll樣受體6(TLR6)ELISA檢測,英文名:TLR6ELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06684人Toll樣受體7(TLR7)ELISA檢測,英文名:TLR7ELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06685人Toll作用蛋白(TOLLIP)ELISA檢測,英文名:TOLLIPELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06686人Traf2結(jié)合蛋白(T2BP)ELISA檢測,英文名:T2BPELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06687人Trem樣轉(zhuǎn)錄因子1(TREML1)ELISA檢測,英文名:TREML1ELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06688人T淋巴細(xì)胞白血病病毒Ⅰ/II(HTLV-Ⅰ/II)抗體ELISA檢測,英文名:HTLV-Ⅰ/IIantibodyELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06689人T細(xì)胞表面糖蛋白CD1a(CD1A)ELISA檢測,英文名:CD1AELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(12)-06690人U1小核核糖核蛋白A(SNRPA)ELISA檢測,英文名:SNRPAELISAkit,規(guī)格:48T/96T[詳細(xì)]
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2018-09-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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磷酸化細(xì)胞外信號試劑盒檢測說明
- 磷酸化細(xì)胞外信號試劑盒檢測說明酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T5pmol/L-150pmol/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)水平。用純化的人磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK),再與HRP標(biāo)記的磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(240pmol/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。120pmol/L5號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液60pmol/L4號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液30pmol/L3號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液15pmol/L2號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液7.5pmol/L1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié):計算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細(xì)]
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2018-10-09 10:00
產(chǎn)品樣冊
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小鼠細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4 (CTLA-4)ELISA試劑盒
- 小鼠細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4(CTLA-4)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗小鼠CTLA-4單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的CTLA-4與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗小鼠CTLA-4,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,CTLA-4濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中CTLA-4濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):30ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、尿液等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清可能需要稀釋,請先做預(yù)實驗,以確定稀釋倍數(shù)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入3ml蒸餾水混勻,配成10ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入10ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)CTLA-4含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的CTLA-4檢測濃度小于8pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的小鼠CTLA-4。不與小鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于11%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
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T細(xì)胞增殖實驗操作流程
- T細(xì)胞增殖實驗操作流程[詳細(xì)]
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2018-10-20 10:00
產(chǎn)品樣冊
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培養(yǎng)細(xì)胞增殖過程注意事項
- 培養(yǎng)細(xì)胞增殖過程注意事項體內(nèi)細(xì)胞生長在動態(tài)平衡環(huán)境中,而組織培養(yǎng)細(xì)胞的生存環(huán)境是培養(yǎng)瓶、皿或其它容器,生存空間和營養(yǎng)是有限的。當(dāng)細(xì)胞增殖達(dá)到一定密度后,則需要分離出一部分細(xì)胞和更新營養(yǎng)液,否則將影響細(xì)胞的繼續(xù)生存,這一過程叫傳代。每次傳代以后,細(xì)胞的生長和增殖過程都會受一定的影響。另外,很多細(xì)胞特別是正常細(xì)胞,在體外的生存也不是無限的,存在著一個發(fā)展過程。所有這一切,使組織細(xì)胞在培養(yǎng)中有著一系列與體內(nèi)不同的生存特點。根據(jù)培養(yǎng)過程中是否需要分割培養(yǎng)物進(jìn)行再培養(yǎng)而將細(xì)胞培養(yǎng)分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)。一、原代培養(yǎng)(一)過程原代培養(yǎng)的基本過程包括取材、培養(yǎng)材料的制備、接種及培養(yǎng)等步驟。原代培養(yǎng)的方法很多,基本和Z常用的是組織塊培養(yǎng)法和分離細(xì)胞法。1、組織塊培養(yǎng)法(1)基本操作過程1)、用培養(yǎng)液濕潤所取組織材料,并用鋒利的眼科剪將附在其上的脂肪和結(jié)締組織去除干凈。再用平衡液(PBS)或Hanks液漂洗;用鋒利的眼科彎剪將組織塊剪成小塊;再用PBS或Hanks液漂洗多次,直至液體不渾濁、無油滴、清亮為止。2)、用濕潤的吸管吸取切碎的組織塊,清清吹到培養(yǎng)瓶皿中,并將其按一定間距均勻放在培養(yǎng)瓶底壁上,量不要過多,要將組織塊切面貼在培養(yǎng)瓶底壁上;3)、將培養(yǎng)瓶翻轉(zhuǎn),使瓶底朝上,在種植了組織塊一側(cè)的對側(cè)面加足培養(yǎng)液,勿使組織塊與培養(yǎng)液接觸,塞緊瓶塞;4)、將種植了組織塊的一側(cè)朝上,靜置于37℃培養(yǎng)箱中;待組織塊貼壁1h到3h后翻瓶,使貼壁的組織塊浸沒與培養(yǎng)液中,靜置;5)、每隔2到3天更換一次培養(yǎng)液,或者根據(jù)培養(yǎng)瓶種顏色的變化確定換液時間。2、注意事項1)、組織塊接種后的前3天,從組織塊向外遷徙的細(xì)胞數(shù)很少,組織塊的黏附不牢固,在觀察和移動的過程中,注意不要引起液體的振蕩。要避免經(jīng)常翻動和振動,否則組織塊不易附著于瓶壁上或附著后也會脫落飄起。2)、加入的培養(yǎng)液不宜過多,避免浸泡的組織塊受輕微的波動而脫落下來。3)、用組織塊培養(yǎng)時,要及時觀察,當(dāng)細(xì)胞向外遷徙出來后要注意記錄并去除漂浮的組織塊和殘留的細(xì)胞,因為已漂浮的組織塊和那些細(xì)胞碎片已經(jīng)死亡,它們產(chǎn)生的有毒物質(zhì)會影響原代細(xì)胞的生長,要及時清除。[詳細(xì)]
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2024-10-03 20:19
產(chǎn)品樣冊
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壓縮機(jī)參數(shù)說明
- 壓縮機(jī)參數(shù)說明[詳細(xì)]
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2024-09-14 09:06
課件
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人膽囊收縮素8(CCK-8)試劑盒說明書
- 人膽囊收縮素8(CCK-8)試劑盒說明書[詳細(xì)]
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2015-04-30 00:00
期刊論文
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大鼠膽囊收縮素(CCK-8)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠膽囊收縮素(CCK-8)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠CCK-8單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的CCK-8與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠CCK-8,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,CCK-8濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中CCK-8濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):80ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成80ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,每管加入標(biāo)本稀釋液300ul。在**管中加入80ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品40、20、10、5、2.5、1.25、0.625、0ng/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)CCK-8含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的CCK-8檢測濃度小于0.3ng/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠CCK-8。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人膽囊收縮素(CCK-8)ELISA試劑盒說明書
- 人膽囊收縮素(CCK-8)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人CCK-8單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的CCK-8與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人CCK-8,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,CCK-8濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中CCK-8濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):80ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成80ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,每管加入標(biāo)本稀釋液300ul。在**管中加入80ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品40、20、10、5、2.5、1.25、0.625、0ng/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)CCK-8含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的CCK-8檢測濃度小于0.3ng/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人CCK-8。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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小鼠細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4 (CTLA-4)ELISA試劑盒說明書
- 小鼠細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4(CTLA-4)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗小鼠CTLA-4單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的CTLA-4與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗小鼠CTLA-4,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,CTLA-4濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中CTLA-4濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):30ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、尿液等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清可能需要稀釋,請先做預(yù)實驗,以確定稀釋倍數(shù)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入3ml蒸餾水混勻,配成10ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入10ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)CTLA-4含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的CTLA-4檢測濃度小于8pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的小鼠CTLA-4。不與小鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于11%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4 (CTLA-4)ELISA試劑盒說明書
- 人細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4(CTLA-4)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人CTLA-4單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的CTLA-4與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人CTLA-4,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,CTLA-4濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中CTLA-4濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):5ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、尿液等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿作1:10稀釋(取20ul,加標(biāo)本稀釋液180ul,稀釋10倍)。尿液2倍稀釋(取100ul,加標(biāo)本稀釋液100ul,稀釋2倍)后檢測。細(xì)胞培養(yǎng)上清可以不做稀釋直接檢測。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成10ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入10ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)CTLA-4含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的CTLA-4檢測濃度小于8pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人CTLA-4。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于11%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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重組人角質(zhì)細(xì)胞生長因子異構(gòu)體YZ兔角膜基質(zhì)細(xì)胞增殖分
- 重組人角質(zhì)細(xì)胞生長因子異構(gòu)體YZ兔角膜基質(zhì)細(xì)胞增殖分[詳細(xì)]
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2012-07-12 00:00
安裝說明
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產(chǎn)品應(yīng)用(91)細(xì)胞毒性:在SpectraMax L化學(xué)發(fā)光微孔板讀板機(jī)上用Lonza ViaLight Plus和ToxiLight檢測試劑盒進(jìn)行細(xì)胞毒性檢測
- 生物發(fā)光細(xì)胞毒性檢測能提供更高的檢測限、速度和準(zhǔn)確性, 已有文獻(xiàn)證實(Crouch et al., 1993)。[詳細(xì)]
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2021-02-26 12:28
應(yīng)用文章
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實時監(jiān)測細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期
- 生物研究和藥物發(fā)現(xiàn)越來越需要擴(kuò)大基于細(xì)胞的檢測方法的多樣性和復(fù)雜性?;罴?xì)胞檢測可以實時監(jiān)測細(xì)胞反應(yīng),并提供關(guān)于化合物治LX果和生物復(fù)雜性的重要見解。[詳細(xì)]
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2021-02-20 09:53
應(yīng)用文章
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實時監(jiān)測細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期
- 實時監(jiān)測細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期[詳細(xì)]
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2024-09-11 17:49
應(yīng)用文章
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大鼠膽囊收縮素八肽(CCK-8)檢測試劑盒
- 大鼠膽囊收縮素八肽(CCK-8)檢測試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-28 15:43
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