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重組結(jié)核分枝桿菌Mr 38 000蛋白的表達(dá)純化和鑒定
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本文由 上海高創(chuàng)化學(xué)科技有限公司 整理匯編
2013-11-02 00:00 519閱讀次數(shù)
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重組結(jié)核分枝桿菌Mr 38 000蛋白的表達(dá)純化和鑒定
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重組結(jié)核分枝桿菌Mr 38 000蛋白的表達(dá)純化和鑒定- 重組結(jié)核分枝桿菌Mr 38 000蛋白的表達(dá)純化和鑒定[詳細(xì)]
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2013-11-02 00:00
選購(gòu)指南
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- 猴結(jié)核分枝桿菌抗體IgGELISA試劑盒
- 猴結(jié)核分枝桿菌抗體IgG(M.tuberculosis-IgG)ELISA試劑盒使用目的：本試劑盒用于測(cè)定猴血清、血漿及相關(guān)液體樣本中結(jié)核分枝桿菌抗體IgG(M.tuberculosis-IgG)表達(dá)。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中猴結(jié)核分枝桿菌抗體IgG(M.tuberculosis-IgG)表達(dá)。用純化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可與樣品中結(jié)核分枝桿菌抗體IgG(M.tuberculosis-IgG)相結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合，形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），與CUTOFF值相比較，從而判定標(biāo)本中猴結(jié)核分枝桿菌抗體IgG(M.tuberculosis-IgG)的存在與否。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8陽(yáng)性對(duì)照0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9陰性對(duì)照0.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說(shuō)明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照2孔、陽(yáng)性對(duì)照2孔、空白對(duì)照1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）加樣：分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照50l。然后在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液40l，然后再加待測(cè)樣品10l。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50l，空白孔除外。溫育：操作同3。洗滌：操作同5。顯色：每孔先加入顯色劑A50l，再加入顯色劑B50l，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.終止：每孔加終止液50l，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié)：計(jì)算和結(jié)果判定：試驗(yàn)有效性：陽(yáng)性對(duì)照孔平均值≥1.00;陰性對(duì)照平均值≤0.10臨界值（CUTOFF）計(jì)算：臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15陰性判定：樣品OD值<臨界值（CUTOFF）者為結(jié)核分枝桿菌抗體IgG(M.tuberculosis-IgG)陰性陽(yáng)性判定：樣品OD值≥臨界值（CUTOFF）者為結(jié)核分枝桿菌抗體IgG(M.tuberculosis-IgG)陽(yáng)性。注意事項(xiàng)1．操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行，本試劑不同批號(hào)組分不得混用。2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。3．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。4．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5．底物請(qǐng)避光保存。6．試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)，使用雙波長(zhǎng)檢測(cè)時(shí)，參考波長(zhǎng)為630nm7．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為2M的硫酸，使用時(shí)必須注意安全。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-11-15 10:03
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人結(jié)核分枝桿菌抗體（M.tuberculosis Ab）檢測(cè)試劑盒- 人結(jié)核分枝桿菌抗體（M.tuberculosis Ab）檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2015-03-06 00:00
課件
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- 幽門螺桿菌CagA蛋白的純化與鑒定
- 幽門螺桿菌CagA蛋白的純化與鑒定[詳細(xì)]
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2013-04-22 00:00
其它
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- 幽門螺桿菌CagA蛋白的純化與鑒定
- 幽門螺桿菌CagA蛋白的純化與鑒定[詳細(xì)]
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2012-07-18 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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- 人副結(jié)核分枝桿菌抗體(M.pt Ab)檢測(cè)試劑盒
- 人副結(jié)核分枝桿菌抗體(M.pt Ab)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-28 13:28
應(yīng)用文章
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- 質(zhì)粒DNA的分離、純化和鑒定概述
- 質(zhì)粒DNA的分離、純化和鑒定概述[詳細(xì)]
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2009-03-31 00:00
其它
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PCR酶切法重組子的篩選和鑒定- PCR酶切法重組子的篩選和鑒定[詳細(xì)]
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2016-07-18 00:00
課件
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- 質(zhì)粒DNA的分離、純化和鑒定概述二
- 質(zhì)粒DNA的分離、純化和鑒定概述二[詳細(xì)]
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2009-03-31 00:00
課件
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- 產(chǎn)品應(yīng)用（38）多任務(wù)動(dòng)力學(xué)檢測(cè)功能可監(jiān)測(cè)IPTG誘導(dǎo)細(xì)胞蛋白表達(dá)和其生長(zhǎng)狀態(tài)
- 在一段時(shí)間內(nèi)同時(shí)檢測(cè)幾種不同信號(hào)的輸出尤其在研究蛋白或化合物對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)或基因表達(dá)作用方面很有幫助。[詳細(xì)]
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2021-02-24 15:35
應(yīng)用文章
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- 天然和重組蛋白受體結(jié)合動(dòng)力學(xué)的區(qū)別
- 在藥物開發(fā)漫長(zhǎng)而艱巨的過(guò)程中，涉及通過(guò)確定候選藥物對(duì)細(xì)胞靶標(biāo)的親和力和相互作用的動(dòng)力學(xué)來(lái)篩選候選藥物的多種方法，其中包括標(biāo)記和無(wú)標(biāo)記，如表面等離子體共振 （SPR）、生物層干涉測(cè)量法 （BLI），石英晶體微量天平（QCM）和表面聲波 （SAW）用于從細(xì)胞中提取或重組表達(dá)的分離蛋白的動(dòng)力學(xué)研究。這些技術(shù)需要將分離的蛋白質(zhì)固定在傳感器表面上，以便其與待測(cè)溶液中的分析物相互作用。 但是這可能會(huì)引入不確定性，例如天然構(gòu)象的變化，這可能會(huì)改變表達(dá)蛋白的結(jié)構(gòu)和行為。此外，由于各種基于細(xì)胞的異質(zhì)因素，例如細(xì)胞表型和生長(zhǎng)周期、膜剛性以及鄰近的蛋白質(zhì)影響，分離受體的結(jié)合動(dòng)力學(xué)可能與其天然細(xì)胞內(nèi)對(duì)應(yīng)物的結(jié)合動(dòng)力學(xué)大不相同。天然和分離受體之間的這些生理差異及其對(duì)受體功能的潛在影響，使得基于細(xì)胞的動(dòng)力學(xué)相互作用分析方法更具藥理學(xué)相關(guān)性和生物學(xué)意義。可以使用多種方法來(lái)測(cè)量與天然細(xì)胞內(nèi)受體的結(jié)合動(dòng)力學(xué)，例如表面等離子體共振顯微鏡（SPRM）， 配體示蹤劑 （LT）和石英晶體微量天平（QCM）。然而，SPRM是目前僅有的單細(xì)胞分辨率的技術(shù)，因此使其能夠直接解決細(xì)胞異質(zhì)性問(wèn)題。
[詳細(xì)]
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2024-09-21 14:20
其它
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- BT產(chǎn)品應(yīng)用（32）快速GX地篩選高表達(dá)重組蛋白的哺乳動(dòng)物細(xì)胞
- ClonePix系統(tǒng)的技術(shù)可以挑選出高表達(dá)分泌蛋白的細(xì)胞。借助熒光偶聯(lián)抗體，通過(guò)熒光成像和精密的機(jī)械設(shè)計(jì)篩選并挑取分泌表達(dá)單體蛋白的CHO細(xì)胞和HEK293細(xì)胞可以顯著提升工作效率，精簡(jiǎn)工作流程，ZZ獲得高表達(dá)目標(biāo)蛋白的優(yōu)質(zhì)細(xì)胞株。[詳細(xì)]
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2024-09-18 18:09
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- SEC-MALS技術(shù)表征重組蛋白分子量和聚集水平
- SEC-MALS技術(shù)表征重組蛋白分子量和聚集水平[詳細(xì)]
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2021-07-01 11:47
應(yīng)用文章
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- AN_23012_LSMS_藥物_重組蛋白的HCP定性和定量分析方法思考
- 重組蛋白類藥物由遺傳修飾的原核或真核宿主細(xì)胞培養(yǎng)/發(fā)酵產(chǎn)生。[詳細(xì)]
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2025-08-12 14:40
產(chǎn)品樣冊(cè)
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- GX表達(dá)與蛋白制備
- GX表達(dá)與蛋白制備[詳細(xì)]
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2015-04-02 00:00
操作手冊(cè)
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- 重組CHO細(xì)胞分離及蛋白回收
- 重組CHO細(xì)胞分離及蛋白回收[詳細(xì)]
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2013-08-14 00:00
課件
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- BT產(chǎn)品應(yīng)用（1）重組蛋白藥物
- BT產(chǎn)品應(yīng)用（1）重組蛋白藥物[詳細(xì)]
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2021-02-03 11:23
應(yīng)用文章
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- 固相合成胸腺五肽的分離純化與鑒定
- 固相合成胸腺五肽的分離純化與鑒定[詳細(xì)]
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2024-09-16 07:42
期刊論文
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- mTOR和eIF4E蛋白在大腸癌組織中的表達(dá)及臨床意義
- mTOR和eIF4E蛋白在大腸癌組織中的表達(dá)及臨床意義[詳細(xì)]
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2013-11-02 00:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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- 無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒宣傳
- 無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒特點(diǎn)介紹[詳細(xì)]
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2024-09-12 18:29
產(chǎn)品樣冊(cè)
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