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ELISA試劑盒的固相載體
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2018-11-16 10:02 1000閱讀次數(shù)
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ELISA試劑盒的固相載體ELISA試劑盒的固相載體,固相載體在ELISA測(cè)定過(guò)程中作為吸附劑和容器,不參與化學(xué)反應(yīng)??勺鱁LISA中載體的材料很多,Z常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)的性能,抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后仍保留原來(lái)的免疫學(xué)活性,加之它的價(jià)格低廉,所以被普遍采用。聚苯乙烯為塑料,可制成各種形式。ELISA載體的形狀主要有三種:微量滴定板、小珠和小試管。以微量滴定板Z為常用,專(zhuān)用于EILSA的產(chǎn)品稱(chēng)為ELISA板,國(guó)際上標(biāo)準(zhǔn)的微量滴定板為8×12的96孔式。為便于作少量標(biāo)本的檢測(cè),有制成8聯(lián)孔條或12聯(lián)孔條的,放入座架后,大小與標(biāo)準(zhǔn)ELISA板相同。ELISA板的特點(diǎn)是可以同時(shí)進(jìn)行大量標(biāo)本的檢測(cè),并可在特制的比色計(jì)上迅速讀出結(jié)果。現(xiàn)在已有多種自動(dòng)化儀器用于微量滴定板型的ELISA檢測(cè),包括加樣、洗滌、保溫、比色等步驟,對(duì)操作的標(biāo)準(zhǔn)化極為有利。聚苯乙烯經(jīng)射線照射后,其吸附性能特別是對(duì)免疫球蛋白的吸附性能增加,應(yīng)用于雙抗體夾心法可使固相上抗體量增多,但用于間接法測(cè)抗體時(shí)空白值較大。ELISA試劑盒的固相載體,良好的ELISA板應(yīng)該是吸附性能好,空白值低,孔底透明度高,各板之間、同一板各孔之間、同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于原料的不同和制作工藝的差別,各種產(chǎn)品的質(zhì)量差異很大,因此,每一批號(hào)的ELISA板在使用前須事先檢查其性能。常用的檢查方法為:以一定濃度的人IgG(一般為10ng/ml)包被ELISA板各孔,洗滌后每孔內(nèi)加入適當(dāng)稀釋度的酶標(biāo)抗人IgG抗體,保溫后洗滌,加底物顯色,終止酶反應(yīng)后,分別測(cè)每孔溶液的吸光度。控制反應(yīng)條件,使各孔讀數(shù)在吸光度0.8左右。計(jì)算全部讀數(shù)的平均值。所有單個(gè)讀數(shù)與全部讀數(shù)的均數(shù)之差,應(yīng)小于10%。ELISA試劑盒的固相載體,與聚苯乙烯類(lèi)似的塑料是聚氯乙烯。作為ELISA固相載體,聚氯乙烯的特點(diǎn)為質(zhì)軟板薄,可剪割,價(jià)廉,但光潔度不如聚苯乙烯板,孔底亦不如聚苯乙烯平整。聚氯乙烯對(duì)蛋白質(zhì)的吸附性能比聚苯乙烯高,但空白值也略高。ELISA試劑盒的固相載體,為比較不同固相在某一ELISA測(cè)定中的優(yōu)劣,可應(yīng)用如下的試驗(yàn):用其他免疫學(xué)測(cè)定方法選出一個(gè)典型的陽(yáng)性標(biāo)本和陰性標(biāo)本,將它們進(jìn)行一系列稀釋后,在不同的固相載體上按預(yù)定的ELISA操作步驟進(jìn)行測(cè)定,然后比較結(jié)果。在哪一種載體上陽(yáng)性結(jié)果與陰性結(jié)果差別Zda,這種載體就是這一ELISA測(cè)定項(xiàng)目的Z合適的固相載體。在ELISA中,用作固相載體的小珠一般為直徑0.6cm的圓珠,表面經(jīng)磨砂處理后吸附面積大大增加。ELISA板孔的吸附面積約為200mm2,小珠均為1000mm2,將近ELISA板孔的5倍。吸附面積的增大即意味著固相抗原或抗體量的增加。再者,球型小珠的表面弧度更有利于吸附的抗原決定簇或抗體結(jié)合位點(diǎn)的暴露面處于**反應(yīng)狀態(tài),因此珠式ELISA的反應(yīng)往往更為靈敏。小珠的另一特點(diǎn)是更易于使洗滌徹底,使用特殊的洗滌器,使小珠在洗滌過(guò)程中滾動(dòng)淋洗,其洗滌效果遠(yuǎn)較板孔的浸泡式為好。但由于磨砂工藝的難度較大,小珠的均一性較差。小試管作為固相載體也有較大的吸附表面,而且標(biāo)本的反應(yīng)量也相應(yīng)增加。板式及珠式ELISA的標(biāo)本量一般為100-200ul,而小試管可根據(jù)需要加大反應(yīng)體積,標(biāo)本反應(yīng)量的增加有助于試驗(yàn)敏感性的提高。小試管還可以當(dāng)作比色杯,Z后直接放入分光光度計(jì)中比色。標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品,抗體抗原,Elisa實(shí)驗(yàn),Elisa試劑盒,Elisa試劑盒價(jià)格,Elisa試劑盒說(shuō)明書(shū),Elisa試劑盒技術(shù),就在上海恒遠(yuǎn)生物,歡迎進(jìn)入公司主頁(yè)關(guān)注更多Elisa試劑盒知識(shí)及產(chǎn)品:www.shhyswsj.com
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ELISA試劑盒的固相載體
- ELISA試劑盒的固相載體ELISA試劑盒的固相載體,固相載體在ELISA測(cè)定過(guò)程中作為吸附劑和容器,不參與化學(xué)反應(yīng)??勺鱁LISA中載體的材料很多,Z常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)的性能,抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后仍保留原來(lái)的免疫學(xué)活性,加之它的價(jià)格低廉,所以被普遍采用。聚苯乙烯為塑料,可制成各種形式。ELISA載體的形狀主要有三種:微量滴定板、小珠和小試管。以微量滴定板Z為常用,專(zhuān)用于EILSA的產(chǎn)品稱(chēng)為ELISA板,國(guó)際上標(biāo)準(zhǔn)的微量滴定板為8×12的96孔式。為便于作少量標(biāo)本的檢測(cè),有制成8聯(lián)孔條或12聯(lián)孔條的,放入座架后,大小與標(biāo)準(zhǔn)ELISA板相同。ELISA板的特點(diǎn)是可以同時(shí)進(jìn)行大量標(biāo)本的檢測(cè),并可在特制的比色計(jì)上迅速讀出結(jié)果?,F(xiàn)在已有多種自動(dòng)化儀器用于微量滴定板型的ELISA檢測(cè),包括加樣、洗滌、保溫、比色等步驟,對(duì)操作的標(biāo)準(zhǔn)化極為有利。聚苯乙烯經(jīng)射線照射后,其吸附性能特別是對(duì)免疫球蛋白的吸附性能增加,應(yīng)用于雙抗體夾心法可使固相上抗體量增多,但用于間接法測(cè)抗體時(shí)空白值較大。ELISA試劑盒的固相載體,良好的ELISA板應(yīng)該是吸附性能好,空白值低,孔底透明度高,各板之間、同一板各孔之間、同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于原料的不同和制作工藝的差別,各種產(chǎn)品的質(zhì)量差異很大,因此,每一批號(hào)的ELISA板在使用前須事先檢查其性能。常用的檢查方法為:以一定濃度的人IgG(一般為10ng/ml)包被ELISA板各孔,洗滌后每孔內(nèi)加入適當(dāng)稀釋度的酶標(biāo)抗人IgG抗體,保溫后洗滌,加底物顯色,終止酶反應(yīng)后,分別測(cè)每孔溶液的吸光度??刂品磻?yīng)條件,使各孔讀數(shù)在吸光度0.8左右。計(jì)算全部讀數(shù)的平均值。所有單個(gè)讀數(shù)與全部讀數(shù)的均數(shù)之差,應(yīng)小于10%。ELISA試劑盒的固相載體,與聚苯乙烯類(lèi)似的塑料是聚氯乙烯。作為ELISA固相載體,聚氯乙烯的特點(diǎn)為質(zhì)軟板薄,可剪割,價(jià)廉,但光潔度不如聚苯乙烯板,孔底亦不如聚苯乙烯平整。聚氯乙烯對(duì)蛋白質(zhì)的吸附性能比聚苯乙烯高,但空白值也略高。ELISA試劑盒的固相載體,為比較不同固相在某一ELISA測(cè)定中的優(yōu)劣,可應(yīng)用如下的試驗(yàn):用其他免疫學(xué)測(cè)定方法選出一個(gè)典型的陽(yáng)性標(biāo)本和陰性標(biāo)本,將它們進(jìn)行一系列稀釋后,在不同的固相載體上按預(yù)定的ELISA操作步驟進(jìn)行測(cè)定,然后比較結(jié)果。在哪一種載體上陽(yáng)性結(jié)果與陰性結(jié)果差別Zda,這種載體就是這一ELISA測(cè)定項(xiàng)目的Z合適的固相載體。在ELISA中,用作固相載體的小珠一般為直徑0.6cm的圓珠,表面經(jīng)磨砂處理后吸附面積大大增加。ELISA板孔的吸附面積約為200mm2,小珠均為1000mm2,將近ELISA板孔的5倍。吸附面積的增大即意味著固相抗原或抗體量的增加。再者,球型小珠的表面弧度更有利于吸附的抗原決定簇或抗體結(jié)合位點(diǎn)的暴露面處于**反應(yīng)狀態(tài),因此珠式ELISA的反應(yīng)往往更為靈敏。小珠的另一特點(diǎn)是更易于使洗滌徹底,使用特殊的洗滌器,使小珠在洗滌過(guò)程中滾動(dòng)淋洗,其洗滌效果遠(yuǎn)較板孔的浸泡式為好。但由于磨砂工藝的難度較大,小珠的均一性較差。小試管作為固相載體也有較大的吸附表面,而且標(biāo)本的反應(yīng)量也相應(yīng)增加。板式及珠式ELISA的標(biāo)本量一般為100-200ul,而小試管可根據(jù)需要加大反應(yīng)體積,標(biāo)本反應(yīng)量的增加有助于試驗(yàn)敏感性的提高。小試管還可以當(dāng)作比色杯,Z后直接放入分光光度計(jì)中比色。標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品,抗體抗原,Elisa實(shí)驗(yàn),Elisa試劑盒,Elisa試劑盒價(jià)格,Elisa試劑盒說(shuō)明書(shū),Elisa試劑盒技術(shù),就在上海恒遠(yuǎn)生物,歡迎進(jìn)入公司主頁(yè)關(guān)注更多Elisa試劑盒知識(shí)及產(chǎn)品:www.shhyswsj.com[詳細(xì)]
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有機(jī)溶質(zhì)載體伴侶1(OSCP1)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)
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有機(jī)溶質(zhì)載體伴侶1(OSCP1)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)本試劑僅供研究使用標(biāo)本:體液有機(jī)溶質(zhì)載體伴侶1(OSCP1)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)試驗(yàn)原理:BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知BFGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將BFGF和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子ELISA檢測(cè)試劑盒洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。有機(jī)溶質(zhì)載體伴侶1(OSCP1)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。2.實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。有機(jī)溶質(zhì)載體伴侶1(OSCP1)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)操作注意事項(xiàng)1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。9.按照中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。有機(jī)溶質(zhì)載體伴侶1(OSCP1)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋?xiě)?yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋?zhuān)赫麴s水50倍稀釋。有機(jī)溶質(zhì)載體伴侶1(OSCP1)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。9.在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。局限6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)法得到極ng確的結(jié)果。有機(jī)溶質(zhì)載體伴侶1(OSCP1)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)性能1.靈敏度:Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。有機(jī)溶質(zhì)載體伴侶1(OSCP1)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的BFGF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlAMBP人α1微球蛋白/bikunin前體規(guī)格:48T/96Tα1-MG人α1微球蛋白規(guī)格:48T/96Tα1-AGP人α1酸性糖蛋白規(guī)格:48T/96TAACT人α1抗胰糜蛋白酶規(guī)格:48T/96TIFN-α/βR人α/β干擾素受體規(guī)格:48T/96TXCR1人XC趨化因子受體1規(guī)格:48T/96TTCR人T細(xì)胞受體規(guī)格:48T/96TTCGF-Ⅲ人T細(xì)胞生長(zhǎng)因子-Ⅲ規(guī)格:48T/96TLAT人T細(xì)胞活化連接蛋白規(guī)格:48T/96TTU3A人TU3A蛋白規(guī)格:48T/96TTLR-9/CD289人Toll樣受體9規(guī)格:48T/96TTHP人TH糖蛋白規(guī)格:48T/96TTIEG1人TGF-β誘導(dǎo)早期基因1規(guī)格:48T/96TTAF人TATA盒結(jié)合蛋白/TBP相關(guān)因子規(guī)格:48T/96TPIAS3人STAT3蛋白YZ分子規(guī)格:48T/96TSHC/SLP-76人SH2攜帶蛋白規(guī)格:48T/96TS-100人S100蛋白規(guī)格:48T/96TS-100B人S100B蛋白規(guī)格:48T/96TP-Selectin/CD62P人P選擇素規(guī)格:48T/96TP-cad人P鈣黏蛋白/胎盤(pán)鈣黏蛋白規(guī)格:48T/96T人preptinELISAKit,48T/96T人preptinELISAKit,48T/96T規(guī)格:48T/96T人PodocinELISAKit,48T/96T人PodocinELISAKit,48T/96T規(guī)格:48T/96TPL7人PL7抗體/抗蘇氨酰tRNA合成酶規(guī)格:48T/96TPL12/AlaRS人PL12抗體/抗丙氨酰tRNA合成酶規(guī)格:48T/96TP53人P53規(guī)格:48T/96TOJ/IleRS人OJ抗體規(guī)格:48T/96T人N-乙?;?絲氨酰-天門(mén)冬酰-賴(lài)氨酰-脯氨酸ELISAKit,48T/96T人N-乙酰基-絲氨酰-天門(mén)冬酰-賴(lài)氨酰-脯氨酸ELISAKit,48T/96T規(guī)格:48T/96TNAG人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶規(guī)格:48T/96TN-Cad人N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白規(guī)格:48T/96TN-MID-OT人N端中段骨鈣素規(guī)格:48T/96-proBNP人N端前腦鈉素規(guī)格:48T/96-proBNP人N端前腦鈉素規(guī)格:48T/96TNLR人NOD樣受體規(guī)格:48T/96TNHE3人Na+/H+交換體3規(guī)格:48T/96TPAL人L苯丙氨酸解氨酶規(guī)格:48T/96TJo1/HRS人Jo1抗體規(guī)格:48T/96TIRAP人ICE蛋白酶激活因子規(guī)格:48T/96T人H-rasELISAKit,48T/96T人H-rasELISAKit,48T/96T規(guī)格:48T/96T人H-rasELISAKit,48T/96T人H-rasELISAKit,48T/96T規(guī)格:48T/96TGAP人GTP酶活化蛋白規(guī)格:48T/96TFlt-3L人FMS樣酪氨酸激酶3配體規(guī)格:48T/96TFlt3人FMS樣酪氨酸激酶3規(guī)格:48T/96TE-Selectin/CD62E人E選擇素規(guī)格:48T/96TE-Cad人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白規(guī)格:48T/96TEJ/GlyRS人EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成酶抗體規(guī)格:48T/96TD2D人D二聚體規(guī)格:48T/96TD2D人D二聚體規(guī)格:48T/96TDBP人DNA結(jié)合蛋白規(guī)格:48T/96TDKK1人Dickkopf1規(guī)格:48T/96TCNP人C型鈉尿肽規(guī)格:48T/96TC-Peptide人C肽規(guī)格:48T/96TCRP人C反應(yīng)蛋白規(guī)格:48T/96TCP人C多肽規(guī)格:48T/96TCXCR3人CXC趨化因子受體3規(guī)格:48T/96TCXCR1人CXC趨化因子受體1規(guī)格:48T/96TCX3CR1人CX3C趨化因子受體1規(guī)格:48T/96T人c-sisELISAK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2018-10-09 10:00
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