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免疫熒光標(biāo)記
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本文由 上海聯(lián)碩生物科技有限公司 整理匯編
2024-09-28 07:01 1048閱讀次數(shù)
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免疫熒光標(biāo)記
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免疫熒光標(biāo)記
- 免疫熒光標(biāo)記[詳細(xì)]
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2024-09-28 07:01
產(chǎn)品樣冊
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免疫熒光標(biāo)記技術(shù)(1)
- 免疫熒光標(biāo)記技術(shù)(1)[詳細(xì)]
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2024-09-28 07:01
產(chǎn)品樣冊
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免疫熒光實(shí)驗(yàn)的幾個問題
- 免疫熒光實(shí)驗(yàn)的幾個問題[詳細(xì)]
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2015-01-08 00:00
期刊論文
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別藻藍(lán)蛋白標(biāo)記試劑盒
- 別藻藍(lán)蛋白標(biāo)記試劑盒Lightning-Linkisaonestepantibodylabe領(lǐng)kit,requiringjust30secondshands-ontime.Theantibodyiscovalentlybondedtothelabelinadirectionalandcontrolledprocessatnear-neutral.Allophycocyaninisalarge105kDafluorescentphycobiliproteincommonlyusedinFACSanalysis.Itabsorbsat650nmandemitsat662nm.[詳細(xì)]
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2024-09-29 00:10
產(chǎn)品樣冊
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辣根過氧化物酶標(biāo)記試劑盒
- 辣根過氧化物酶標(biāo)記試劑盒Immunohistochemistryexperiments-stillexperiencinghiackgroundasaresultofsecondaryantibodies?Whybothergodirect!LinkyourprimaryantibodieswithHRPusingLightning-LinktheWorld’seasiesttouseantibodylabe領(lǐng)kit,whichrequiresonly30secondshands-ontime.[詳細(xì)]
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2024-09-28 00:01
產(chǎn)品樣冊
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免疫熒光技術(shù)常見問題及分析
- 免疫熒光技術(shù)(Immunofluorescencetechnique)又稱熒光抗體技術(shù),是標(biāo)記免疫技術(shù)中發(fā)展Z早的一種。主要是利用熒光標(biāo)記的抗體與待測抗原間反應(yīng)進(jìn)行抗原或者半抗原物質(zhì)定位的技術(shù)。本文總結(jié)了免疫熒光技術(shù)常見的問題及解析。1、問:近期要做免疫熒光雙標(biāo),不知哪位有免疫熒光雙標(biāo)技術(shù)的詳細(xì)步驟及其注意事項(xiàng)?參考見解:我正在做冰凍組織切片的免疫熒光雙染。我的經(jīng)驗(yàn)是:(1)選取一抗時要來源于兩種不同的動物,我用的是來源于rabbit和rat的抗體,二抗則是不同熒光信號標(biāo)記的,我用的是donkeyanti-rabbit-FITC(綠)和donkeyanti-rat-Tex-Red(紅)。(2)我的做法是兩種一抗同時孵育,然后兩種二抗同時孵育??贵w濃度、孵育時間要仔細(xì)摸索,我感覺一抗4度孵育過夜比較好,背景比較清晰。(3)我的陽性對照用的是陽性組織切片,陰性對照則分別是家兔和大鼠的IgG,熒光標(biāo)記物對照是PBS+熒光標(biāo)記物。(4)封閉血清與二抗來源動物一致,我用的是10%的正常donkey血清。(5)其余步驟同一般免疫熒光單標(biāo)操作。2、問:用免疫熒光方法做組織切片和培養(yǎng)細(xì)胞內(nèi)的蛋白,兩者操作過程有哪些不同?參考見解:只是固定方法不同。細(xì)胞固定用甲醇,切片固定用多聚甲醛,而染色方法是一樣的。3、問:本人擬做Brdu標(biāo)記神經(jīng)干細(xì)胞免疫熒光,二抗為FITC標(biāo)記,想請教各位大俠:(1)抗體分裝和熒光顯微鏡觀察時是否一定要在暗室中進(jìn)行?(2)封片時是否用甘油緩沖液即可,還是用甘油和0.5mmol/LpH9.0-9.5的碳酸氫鹽緩沖液等量混合封片?(3)免疫酶染色中的3%過氧化氫及2N鹽酸是否還需要用?參考見解:(1)你的二抗是用FITC標(biāo)記的,為避免熒光分解,分裝及熒光顯微鏡觀察時均要避光;(2)封片**用甘油加0.5mmol/LpH9.0-9.5的碳酸氫鹽緩沖液,后者能使玻片透明;(3)關(guān)于免疫酶染色,如果是用過氧化物酶做標(biāo)記,就必須用3%H2O2以去除內(nèi)源性過氧化物酶;2N鹽酸需要使用,目的是使DNA變性,讓Brdu抗體能夠充分地與已經(jīng)摻入的Brdu結(jié)合。4、問:做間接法免疫熒光染色,如何設(shè)置對照?參考見解:**是同一視野在未用熒光激發(fā)下進(jìn)行對照,看是否非特異性染色。(1)空白對照:如果你做的是石蠟切片免疫組化,這個對照必須有,目的是看自發(fā)熒光,脫蠟后直接在熒光顯微鏡下觀察。(2)陰性對照:標(biāo)本直接滴加二抗,呈陰性反應(yīng)。(3)抗原對照:標(biāo)本加同種動物的未免疫血清,以PBS沖洗后,在加抗免疫球蛋白熒光抗體。因未免疫動物的血清中無特異性抗體,應(yīng)呈陰性反應(yīng)。5、問:我做乳腺組織的免疫熒光染色,結(jié)果用激光共聚焦顯微鏡看很好:有陽性信號,陰性對照組也沒有熒光,但是拿到熒光顯微鏡下看,我的陰性對照組一片綠,像非特異性染色,到底哪個結(jié)果才是真實(shí)的呢?參考見解:激光共聚焦顯微鏡的分辨率比普通熒光顯微鏡要高的多,出現(xiàn)上述現(xiàn)象首先要排除熒光顯微鏡的問題,如是不是紫外燈泡壽命到期了或者別的原因,熒光顯微鏡沒有問題,那就以共聚焦顯微鏡的結(jié)果為主。免疫標(biāo)記法可分為以下幾類:熒光免疫法、放射免疫法、酶聯(lián)免疫法(ELISA)、偶聯(lián)生物素親和素系統(tǒng)的酶免法、時間分辨熒光免疫分析、解離增強(qiáng)鑭系元素?zé)晒饷庖叻治觥C庖邿晒鈱?shí)驗(yàn)的主要步驟包括細(xì)胞涂片的制備、細(xì)胞的固定及通透(或稱為透化)、細(xì)胞封閉、一抗和二抗抗體孵育及熒光檢測等。[詳細(xì)]
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2018-11-16 10:02
產(chǎn)品樣冊
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藻紅蛋白標(biāo)記抗體的方法﹠PE-標(biāo)記蛋白A方法
- 藻紅蛋白標(biāo)記抗體的方法﹠PE-標(biāo)記蛋白A方法[詳細(xì)]
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2015-06-17 00:00
期刊論文
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通道載玻片--新的免疫熒光方法
- 通道載玻片--新的免疫熒光方法[詳細(xì)]
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2016-05-10 00:00
期刊論文
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Anti-BSA-FITC標(biāo)記血清白蛋白
- Anti-BSA-FITC標(biāo)記血清白蛋白[詳細(xì)]
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2014-09-22 00:00
報(bào)價單
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生物素抗體標(biāo)記試劑盒
- 生物素抗體標(biāo)記試劑盒Lightning-LinkLightning-Linkisaonestepantibodylabe領(lǐng)kit,requiringjust30secondshands-ontime.Theantibodyiscovalentlybondedtothelabelinadirectionalandcontrolledprocessatnear-neutralpH.LabelTheattachmentofbiotintobiomoleculesisanimportantlaboratorytechnique.Biotinbindstothetetramericavidinproteins,includingstreptavidinandneutravidin,withexceptionallyhighaffinity,andthisinteractionisexploitedinvariousapplicationssuchaswesternblotting,immunohisthochemistryandELISA.Thebiotininthekithasanextendedlinkertofacilitatemolecularinteractions.Lightning-LinkBiotinhasbeenoptimisedfortwoseparateapplications.TypeAisintendedforassaysinwhichastreptavidin-labeleddetectionreagentwillbeused,whilstTypeBisoptimisedforassaysinwhichthebiotinylatedproteiniscapturedbystreptavidinimmobilizedonasurface(ieplates,nitrocellulose,magneticbeadsetc).[詳細(xì)]
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2024-09-29 11:24
產(chǎn)品樣冊
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免疫熒光非特異性染色的消除方法
- 免疫熒光非特異性染色的消除方法[詳細(xì)]
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2024-09-14 04:15
選購指南
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熒光素標(biāo)記抗體技術(shù)
- 熒光素標(biāo)記抗體技術(shù)[詳細(xì)]
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2024-09-20 15:35
標(biāo)準(zhǔn)
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酶標(biāo)記抗體的制備
- 酶標(biāo)記抗體的制備[詳細(xì)]
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2024-09-24 02:28
專利
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使用自動成像技術(shù)進(jìn)行熒光標(biāo)記或無標(biāo)記的細(xì)胞計(jì)數(shù)
- 在多孔微板中精確地定量細(xì)胞數(shù)量的能力使得能夠研究細(xì)胞的健康或增殖。這些應(yīng)用可以利用終點(diǎn)測定法來成像熒光染色的細(xì)胞核,或者可以要求未染色的活細(xì)胞或固定細(xì)胞的可靠透射光成像。[詳細(xì)]
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2021-02-20 09:43
應(yīng)用文章
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使用自動成像技術(shù)進(jìn)行熒光標(biāo)記或無標(biāo)記的細(xì)胞計(jì)數(shù)
- 使用自動成像技術(shù)進(jìn)行熒光標(biāo)記或無標(biāo)記的細(xì)胞計(jì)數(shù)[詳細(xì)]
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2024-09-18 18:09
應(yīng)用文章
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核酸蛋白印跡標(biāo)記檢測產(chǎn)品手冊
- 核酸蛋白印跡標(biāo)記檢測產(chǎn)品手冊[詳細(xì)]
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2014-06-26 00:00
產(chǎn)品樣冊
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GE核酸蛋白印跡標(biāo)記檢測產(chǎn)品目錄
- GE核酸蛋白印跡標(biāo)記檢測產(chǎn)品目錄[詳細(xì)]
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2014-03-27 00:00
選購指南
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Anti-Desmin抗體 , FITC標(biāo)記 conjugated 2
- Anti-Desmin抗體 , FITC標(biāo)記 conjugated 2[詳細(xì)]
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2014-06-02 00:00
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