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細(xì)胞凋亡檢測(cè)
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2024-09-13 04:53 769閱讀次數(shù)
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細(xì)胞凋亡檢測(cè)
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細(xì)胞凋亡檢測(cè)
細(xì)胞凋亡檢測(cè)[詳細(xì)]
2024-09-13 04:53
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細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒POD法
六折特價(jià)細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒POD法產(chǎn)品簡(jiǎn)介:產(chǎn)品編號(hào)品名/Packsize的11684817910在原位細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒,過氧化物酶1包(高達(dá)50測(cè)試)優(yōu)點(diǎn)敏感:細(xì)胞凋亡(細(xì)胞染色)標(biāo)簽的Zda強(qiáng)度高于缺口翻譯方法快速:使用熒光的dUTP允許后直接TUNEL反應(yīng),但在此之前的二次檢測(cè)系統(tǒng)除了對(duì)樣品的分析方便:直接標(biāo)記程序,使用熒光素-dUTP標(biāo)記允許在檢測(cè)過程中的TUNEL反應(yīng)效率的核查準(zhǔn)確:在分子水平(DNA鏈斷裂)和細(xì)胞凋亡的早期階段的細(xì)胞識(shí)別凋亡鑒定靈活:無基板;提供了選擇的機(jī)會(huì),選擇染色過程六折特價(jià)細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒POD法6380元六折特價(jià)【021-54100800】InSituCellDeathPOD細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒POD法上海索寶特價(jià)【021-54100800】產(chǎn)品明細(xì):一、原理:TUNEL(TdT-mediateddUTPnickendlabe領(lǐng))細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒是用來檢測(cè)組織細(xì)胞在凋亡早期過程中細(xì)胞核DNA的斷裂情況。其原理是熒光素(fluorescein)標(biāo)記的dUTP在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdTEnzyme)的作用下,可以連接到凋亡細(xì)胞中斷裂DNA的3’-OH末端,并與連接辣根過氧化酶(HRP,horse-radishperoxidase)的熒光素抗體特異性結(jié)合,后者又與HRP底物二氨基聯(lián)苯胺(DAB)反應(yīng)產(chǎn)生很強(qiáng)的顏色反應(yīng)(呈深棕色),特異準(zhǔn)確地定位正在凋亡的細(xì)胞,因而在光學(xué)顯微鏡下即可觀察凋亡細(xì)胞;由于正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒有DNA斷裂,因而沒有3‘-OH形成,很少能夠被染色。本試劑盒適用于組織樣本(石蠟包埋、冰凍和超薄切片)和細(xì)胞樣本(細(xì)胞涂片)在單細(xì)胞水平上的凋亡原位檢測(cè)。還可應(yīng)用于抗腫瘤藥的藥效評(píng)價(jià),以及通過雙色法確定細(xì)胞死亡類型和分化階段。二、器材與試劑器材:光學(xué)顯微鏡及其成像系統(tǒng)、小型染色缸、濕盒(塑料飯盒與紗布)、塑料蓋玻片或封口膜、吸管、各種規(guī)格的加樣器及槍頭等;試劑:試劑盒含TdT10×、熒光素標(biāo)記的dUTP1×、標(biāo)記熒光素抗體的HRP;自備試劑:PBS、雙蒸水、二甲苯、梯度乙醇(100、95、90、80、70%)、DAB工作液(臨用前配制,5μl20×DAB+1μL30%H2O2+94μlPBS)、ProteinaseK工作液(10-20μg/mlin10mMTris/HCl,pH7.4-8)或細(xì)胞通透液(0.1%TritonX-100in0.1%sodiumcitrate,臨用前配制)、蘇木素或甲基綠、DNase1(3000U/ml3U/mlin50mMTris-HCl,pH7.5,10mMMgCl2,1mg/mlBSA)等。三、實(shí)驗(yàn)步驟操作流程圖:制作石蠟切片→脫蠟、水合→細(xì)胞通透→加TUNEL反應(yīng)液→加converter-POD→與底物DAB反應(yīng)顯色→光學(xué)顯微鏡計(jì)數(shù)并拍照。具體操作步驟(石蠟包埋切片的檢測(cè)):1.用二甲苯浸洗2次,每次5min;2.用梯度乙醇(100、95、90、80、70%)各浸洗1次,每次3min;注:上面兩步是針對(duì)石蠟切片樣本的處理4.用ProteinaseK工作液處理組織15-30min在2137°C(溫度、時(shí)間、濃度均需摸索)或者加細(xì)胞通透液8min;5.PBS漂洗2次;6.制備TUNEL反應(yīng)混合液,處理組用50μlTdT+450μl熒光素標(biāo)記的dUTP液混勻;而陰性對(duì)照組僅加50μl熒光素標(biāo)記的dUTP液,陽性對(duì)照組先加入100μlDNase1,反應(yīng)在15~25℃×10min,后面步驟同處理組。7.玻片干后,加50μlTUNEL反應(yīng)混合液(陰性對(duì)照組僅加50μl熒光素標(biāo)記的dUTP液)于標(biāo)本上,加蓋玻片或封口膜在暗濕盒中反應(yīng)37℃×1h。8.PBS漂洗3次;9.可以加1滴PBS在熒光顯微鏡下計(jì)數(shù)凋亡細(xì)胞(激發(fā)光波長(zhǎng)為450~500nm,檢測(cè)波長(zhǎng)為515~565nm);10.玻片干后加50μlconverter-POD于標(biāo)本上,加蓋玻片或封口膜在暗濕盒中反應(yīng)37℃×30min。11.PBS漂洗3次;12.在組織處加50~100μlDAB底物,反應(yīng)15~25℃×10min;13.PBS漂洗3次;14.拍照后再用蘇木素或甲基綠復(fù)染,幾秒后立即用自來水沖洗。梯度酒精脫水、二甲苯透明、中性樹膠封片。15.加一滴PBS或甘油在視野下,用光學(xué)顯微鏡觀察凋亡細(xì)胞(共計(jì)200~500個(gè)細(xì)胞)并拍照??山Y(jié)合凋亡細(xì)胞形態(tài)特征來綜合判斷(未染色細(xì)胞變小,胞膜完整但出現(xiàn)發(fā)泡現(xiàn)象,晚期出現(xiàn)凋亡小體,貼壁細(xì)胞出現(xiàn)鄒縮、變圓、脫落;而染色細(xì)胞呈現(xiàn)染色質(zhì)濃縮、邊緣化,核膜裂解,染色質(zhì)分割成塊狀/凋亡小體)對(duì)于.培養(yǎng)細(xì)胞的預(yù)處理:①在載玻片上鋪一層薄薄的多聚賴氨酸(見備注4),干燥后在去離子水中漂洗,干燥后4℃保存;②適當(dāng)方法誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,同時(shí)設(shè)未經(jīng)誘導(dǎo)的對(duì)照組,各組離心收集約1×106個(gè)細(xì)胞,PBS洗一次,重懸,加到鋪好的多聚賴氨酸載玻片上,自然干燥,使細(xì)胞很好的吸附到載玻片上;③將吸附細(xì)胞的載玻片在4%多聚甲醛(見備注2)中固定25min;④PBS浸洗二次,每次5min;⑤將吸附細(xì)胞的載玻片在0.2%的TritonX-100(見備注5)中處理5min;⑥PBS浸洗二次,每次5min;后續(xù)操作如同石蠟包埋切片的615四、注意事項(xiàng)1.進(jìn)行PBS清洗時(shí),每次清洗5min。2.PBS清洗后,為了各種反應(yīng)的有效進(jìn)行,請(qǐng)盡量除去PBS溶液后再進(jìn)行下一步反應(yīng)。3.在載玻片上的樣本上加上實(shí)驗(yàn)用反應(yīng)液后,請(qǐng)蓋上蓋玻片或保鮮膜,或在濕盒中進(jìn)行,這樣可以使反應(yīng)液均勻分布于樣本整體,又可以防止反應(yīng)液干燥造成實(shí)驗(yàn)失敗。4.TUNEL反應(yīng)液臨用前配制,短時(shí)間在冰上保存。不宜長(zhǎng)期保存,長(zhǎng)期保存會(huì)導(dǎo)酶活性的失活。5.如果20×DAB溶液顏色變深成為紫色,則不可使用,需重新配制。6.用甲基綠(MethylGreen)染液(3-5%甲基綠溶于0.1M醋酸PH4.0)染色后,請(qǐng)用滅菌蒸餾水清洗多余的甲基綠。然后進(jìn)行洗凈(1**%乙醇)、脫水(二甲苯)透明、封片后通過光學(xué)顯微鏡觀察操作。如果此時(shí)使用80~90%的乙醇洗凈時(shí),甲基綠比較容易脫色,注意快速進(jìn)行脫水操作。7.熒光素標(biāo)記的dUTP液含甲次酸鹽和二氯鈷等致癌物,可通過吸入、口服等途徑進(jìn)入機(jī)體,注意防護(hù)。8.試劑保存;未打開的試劑盒貯存在-20℃(-15~25℃);converter-POD液一旦解凍,以后就保存在4℃(2~8℃)下,至少在6m內(nèi)穩(wěn)定,避免再次凍存;TUNEL反應(yīng)液臨用前配好后,放至冰上直至使用。9.結(jié)果分析時(shí)注意:在壞死的晚期階段或在高度增殖/代謝的組織細(xì)胞中可產(chǎn)生大量DNA斷,從而引起假陽性結(jié)果;而有些類型的凋亡性細(xì)胞死亡缺乏DNA斷裂或DNA裂解不完全,以及細(xì)胞外的矩陣成分阻止TdT進(jìn)入胞內(nèi)反應(yīng),進(jìn)而產(chǎn)生假陰性結(jié)果。六折特價(jià)細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒POD法上海索寶特價(jià)【021-54100800】InSituCellDeathPOD細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒POD法上海索寶特價(jià)【021-54100800】ShanghaisolarbioBioscience&TechnologyCo.,LTD上海索萊寶生物科技有限公司是一家集銷售生化試劑、實(shí)驗(yàn)耗材、自產(chǎn)分子生物學(xué)產(chǎn)品為一體,并能提供技術(shù)支持的專業(yè)性生物科技公司。公司秉承“以客戶為ZX,以產(chǎn)品為保障、以誠信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨”的發(fā)展理念,在依靠客戶的大力支持和員工的不懈努力下獲得了快速的成長(zhǎng)。公司組織結(jié)構(gòu)清晰,內(nèi)部管理科學(xué),擁有一支既分工細(xì)致又高度合作的年輕化隊(duì)伍,保持了各個(gè)部門之間的GX合作運(yùn)轉(zhuǎn),充分保障了公司在充滿競(jìng)爭(zhēng)的市場(chǎng)中處于領(lǐng)xian地位。公司注重與業(yè)界精英合作,目前公司已經(jīng)和Amersham、Amresco、Axygen、BD、Corning、Dragon、Eppendorf、等企業(yè)結(jié)成緊密的合作伙伴關(guān)系,代理其領(lǐng)xian世界的產(chǎn)品,并在全國(guó)各地設(shè)有分銷機(jī)構(gòu)。我們將以高度的責(zé)任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和實(shí)驗(yàn)技術(shù)解決方案。豐富的經(jīng)驗(yàn)、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫存、準(zhǔn)確的交貨時(shí)間、極具競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格,所有這些都保證了我們向您提供的是Z專業(yè)Zyou質(zhì)的服務(wù)!立足北京,上海,輻射全國(guó),隨著產(chǎn)品營(yíng)銷戰(zhàn)略的不斷延伸,我們將逐步發(fā)展成為yi流的專業(yè)性生物科技公司。我們希望能夠和尊敬的客戶一起,利用各自的資源優(yōu)勢(shì)和勇于進(jìn)取的敬業(yè)精神,為ZG生命科學(xué)研究的發(fā)展作出更多的貢獻(xiàn)。為了更好、更全面的發(fā)展,現(xiàn)公司正在誠招各地dai理商和招聘若干銷售、研發(fā)人員,歡迎垂詢并期待您的加入!六折特價(jià)細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒POD法上海索寶特價(jià)【021-54100800】聯(lián)系方式上海索萊寶生物科技有限公司電話:021-64855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2018-09-02 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
細(xì)胞凋亡檢測(cè)-形態(tài)學(xué)特征的檢測(cè)方法
一、普通光學(xué)顯微鏡觀察方法1)蘇木素-伊紅染色(HE染色法)石蠟組織切片的HE染色1.取材組織塊,經(jīng)固定后,常規(guī)石蠟包埋,4μm切片。2.切片常規(guī)用二甲苯脫蠟,經(jīng)各級(jí)乙醇至水洗:二甲苯(I)5min→二甲苯(Ⅱ)5min→100%乙醇2min→95%的乙醇1min→80%乙醇1min→75%乙醇1min→蒸餾水洗2min。3.蘇木素染色5min,自來水沖洗。4.鹽酸乙醇分化30s(提插數(shù)下)。5.自來水浸泡15min或溫水(約50℃)5min。6.置伊紅液2min。7.常規(guī)脫水,透明,封片:95%乙醇(I)min→95%乙醇(Ⅱ)1min→100%乙醇(I)1min→100%乙醇(Ⅱ)1min→二甲苯石碳酸(3:1)1min→二甲苯(I)1min→二甲苯(Ⅱ)1min→中性樹脂封固。2)甲基綠-派諾寧染色法1.新鮮取材組織固定液中4℃固定3~6小時(shí)。2.直接轉(zhuǎn)入95%乙醇脫水和無水乙醇脫水,二甲苯透明,石蠟包埋。3.切片經(jīng)二甲苯脫蠟,梯度乙醇水化至蒸餾水。4.置染色液中室溫下染片約1h。5.取出切片,不經(jīng)水洗,用濾紙吸干多余染液。6.插入丙酮中迅速分化。7.轉(zhuǎn)入丙酮二甲苯(1:1)稍洗。8.二甲苯透明2~3次。9.中性樹膠封固。3)Giemsa染色1.收集細(xì)胞(1×106),PBS洗1次。2.用細(xì)胞涂片離心機(jī)制成細(xì)胞涂片。3.甲醇固定3~5min。4.入Giemsa稀釋染色液15~30min,冬天在37℃溫箱中染色。5.用磷酸鹽緩沖液分色,以鏡下控制為準(zhǔn)。6.涂片晾干后用中性樹膠封片。4)瑞氏(Wright)染色1.收集細(xì)胞(1×106),PBS洗1次。2.用細(xì)胞涂片離心機(jī)制成細(xì)胞涂片。3.甲醇固定3~5min。4.用Wright液染色2min。5.入Wright磷酸緩沖液稀釋液4~10min,然后用蒸餾水沖洗。此時(shí)如果顏色較深,可0.08%醋酸分化數(shù)秒鐘6.直立晾干后,用中性樹膠封固。二、透射電子顯微鏡觀察方法1)透射電鏡樣本的取材和固定培養(yǎng)細(xì)胞的取材和固定1.常規(guī)收集帖壁和懸浮細(xì)胞,置離心管中離心,800~1000r/min,10min。2.用0.01mol/LPBS5ml重懸細(xì)胞。3.將細(xì)胞懸液吸入有瓊脂空槽的離心管中。4.離心,2000r/min,15~20min,使細(xì)胞成團(tuán)。5.小心吸去上清,加入2.5%戊二醛固定液固定細(xì)胞團(tuán),以免細(xì)胞團(tuán)散開。6.取出離心管內(nèi)的瓊脂,仔細(xì)切下尖槽內(nèi)含有細(xì)胞團(tuán)的瓊脂塊。7.將含細(xì)胞的團(tuán)瓊脂塊投入含戊二醛固定液的小瓶中,4℃(可長(zhǎng)期)保存。8.用0.1mol/LPBS緩沖液洗1次。9.1%鋨酸后固定30~60min。三、熒光顯微鏡觀察方法1)吖啶橙染色法1.制備活細(xì)胞懸液,濃度約為107/ml。2.取95μl的細(xì)胞懸液,加5μl的吖啶橙貯存液混勻。3.吸一滴混合液點(diǎn)潔凈玻片上,直接用蓋玻片封片。4.熒光顯微鏡選用激發(fā)濾片BG12或BV等,阻斷濾片用515nm或SP3。2)Hoechst33258染色法1.原代細(xì)胞培養(yǎng),細(xì)胞學(xué)涂片或細(xì)胞甩片機(jī)制備的單細(xì)胞片。2.細(xì)胞固定液4℃固定5min。3.蒸餾水稍洗后,點(diǎn)加Hoechst33258染色液,10min。4.蒸餾水洗片后,用濾紙沾去多余液體。5.封片劑封片后熒光顯微鏡觀察。3)Hoechst33342染色法1.將Hoechst33342加入培養(yǎng)的細(xì)胞中,終濃度為10μg/ml37℃孵育30min。2.4%的多聚甲醛和培養(yǎng)液以1:3混合,使多聚甲醛的濃度為1%,固定細(xì)胞5~10min。3.固定好后,將細(xì)胞懸液涂在載玻片加蓋玻片。4.熒光顯微鏡激發(fā)濾片選用UV激發(fā)濾片,阻斷濾片為400~500nm。以上是先將細(xì)胞染色后再行固定觀察的方法,也可先固定后染色:1.收集(0.5~3.0)×106個(gè)細(xì)胞,500~1000r/min,離心5min去上清。2.PBS洗1次,500~1000r/min,離心5min去PBS。3.用3%多聚甲醛50μl重懸細(xì)胞,室溫下固定10min。4.PBS洗1次,500~1000r/min離心5min去PBS。5.用15μl的Hoechst33258或33342重懸細(xì)胞,終濃度為16μg/ml,孵育15min。6.取10μl放在玻片上,熒光顯微鏡下觀察,可數(shù)500個(gè)細(xì)胞,計(jì)算調(diào)亡率。[詳細(xì)]
2018-09-28 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
ANNEXIN V-FITC標(biāo)記法細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒
ANNEXINV-FITC標(biāo)記法細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途ANNEXINV-FITC標(biāo)記法細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑是一種旨在使用異硫氰酸熒光素標(biāo)記的膜粘連蛋白-5(AnnexinV),探尋細(xì)胞膜的磷脂酰絲氨酸外翻移位,來分析特征性早期細(xì)胞凋亡狀況的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。主要適用于各種活體細(xì)胞(動(dòng)物、人體、植物等)的細(xì)胞凋亡測(cè)定。廣泛用于細(xì)胞凋亡的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,反應(yīng)敏感,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景細(xì)胞凋亡,或細(xì)胞程序性死亡,在諸如形態(tài)發(fā)育、免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)、以及腫瘤和神經(jīng)退行性疾病等各種生物學(xué)過程中,起著實(shí)質(zhì)性的作用。凋亡細(xì)胞具有形態(tài)、生化、和分子方面的顯著特征??鼓鞍啄ふ尺B蛋白-5(AnnexinV)是35至36kd的鈣離子依賴性磷脂結(jié)合蛋白,主要與磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine;PS)可逆性結(jié)合,每個(gè)分子AnnexinV結(jié)合50個(gè)單體磷脂酰絲氨酸。在正常生理狀態(tài)下,磷脂酰絲氨酸,是四種主要細(xì)胞膜磷脂成分之一,和磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine;PE)一起分布在細(xì)胞質(zhì)膜的內(nèi)側(cè),即面向胞漿的一面。一旦細(xì)胞凋亡啟動(dòng),細(xì)胞膜失去了磷脂雙層的非對(duì)稱性分布和完整性,導(dǎo)致磷脂酰絲氨酸移位到細(xì)胞膜外側(cè),成為巨噬細(xì)胞的識(shí)別目標(biāo),由此細(xì)胞膜外側(cè)的磷脂酰絲氨酸可以通過異硫氰酸熒光素(FITC)標(biāo)記的AnnexinV進(jìn)行探測(cè)。伴隨碘化丙啶(Propidiumiodide;PI)的染色以區(qū)別晚期細(xì)胞凋亡。碘化丙啶為膜非通透性染料,受到活細(xì)胞排外,如果細(xì)胞處于晚期凋亡或死亡,則呈現(xiàn)紅色熒光的細(xì)胞核。借助細(xì)胞流式儀,可以清晰探測(cè)細(xì)胞凋亡的程度。流式細(xì)胞術(shù)(FLOWCYTOMETRY)是七十年代發(fā)展起來的集計(jì)算機(jī)、激光、流體力學(xué)、細(xì)胞化學(xué)、細(xì)胞免疫學(xué)為一體的高科學(xué)技術(shù)。[詳細(xì)]
2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
人細(xì)胞凋亡YZ因子(IAP)檢測(cè)試劑盒
人細(xì)胞凋亡YZ因子(IAP)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
2024-09-28 17:58
選購指南
細(xì)胞凋亡的分子機(jī)理
細(xì)胞凋亡的分子機(jī)理[詳細(xì)]
2015-10-29 00:00
安裝說明
細(xì)胞凋亡YZ因子抗體
細(xì)胞凋亡YZ因子抗體廣銳生物堅(jiān)守品質(zhì)、銳意進(jìn)取,滿足于每一位老師的實(shí)驗(yàn)要求,廠家供貨,品質(zhì)保證,價(jià)格優(yōu)惠,歡迎來電咨詢!1.包裝:0.1ml/0.2ml2.濃度:一般是200微克每100微升3.庫存均有現(xiàn)貨。4.產(chǎn)品訂購以訂貨當(dāng)日Zxin價(jià)格為準(zhǔn)。5.所有產(chǎn)品為確保質(zhì)量,出庫均復(fù)檢。細(xì)胞凋亡YZ因子抗體Anti-phospho-P70S6KinasebetaAnti-GRM1小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒豚鼠血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA試劑盒人抗心肌抗體(AMA)ELISA試劑盒人α羥基丁酸脫氫酶(αHBDH)ELISA試劑盒腦紅蛋白/神經(jīng)血紅蛋白抗體人透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)ELISA試劑盒Anti-NKG2A/CD159a/KLRC1人血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)ELISA試劑盒細(xì)胞凋亡YZ因子抗體不同類型抗體的保存指南,用以避免抗體污染或損傷請(qǐng)不時(shí)核查數(shù)據(jù)表以獲取特定保存建議。如果恰當(dāng)保存和處理,大多數(shù)抗體應(yīng)能保持活性數(shù)月乃至數(shù)年。對(duì)于很多抗體而言,分裝成小等份并凍存于-20℃或-80℃是佳保存條件。分裝成小等份可Z*程度減少由凍融造成的損傷,以及從單個(gè)試劑瓶中多次吸取而引入的污染。小等份只需凍融一次,如有剩余,可將剩余物保存于4℃。在收到抗體時(shí),在10,000×g下離心20秒以沉積截留于試劑瓶螺紋的溶液,并以小等份轉(zhuǎn)移至低蛋白結(jié)合微量離心管中。小等份的量取決于實(shí)驗(yàn)人員在實(shí)驗(yàn)中通常采用的量。小等份應(yīng)不小于10μl;等份越小,儲(chǔ)液濃度因抗體蒸發(fā)及吸附于保存瓶表面而受到的影響越大。[詳細(xì)]
2018-10-23 10:30
產(chǎn)品樣冊(cè)
利用自動(dòng)細(xì)胞成像系統(tǒng)分析細(xì)胞凋亡
細(xì)胞凋亡是一種發(fā)生在多細(xì)胞生物體內(nèi)的程序性細(xì)胞死亡過程!生化反應(yīng)導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)和特征變化及細(xì)胞死亡。形態(tài)變化包括細(xì)胞收縮、核分裂、染色質(zhì)凝縮、染色 DNA 分裂及 mRNA 衰減。[詳細(xì)]
2024-09-11 18:18
應(yīng)用文章
V-FITC/PI雙染法細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明
AnnexinV-FITC/PI雙染法細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品簡(jiǎn)介: 細(xì)胞凋亡普遍存在于生物界,是細(xì)胞的基本特征之一,對(duì)胚胎發(fā)育及形態(tài)發(fā)生、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定、機(jī)體的防御和免疫反應(yīng)等方面都起到十分重要的作用?! nnexinV-FITC/PI細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(AnnexinV-FITC/PIApoptosisDetectionKit)是用FITC融合的重組人AnnexinV來檢測(cè)細(xì)胞凋亡時(shí)出現(xiàn)在細(xì)胞膜表面的磷酯酰絲氨酸(PS)的一種細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒??梢允褂昧魇郊?xì)胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測(cè)設(shè)備進(jìn)行檢測(cè)。AnnexinV是一種分子量為35.8kD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,廣泛分布于真核細(xì)胞胞漿內(nèi),參與細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。AnnexinV能與磷酯酰絲氨酸(phosphatidylserine,簡(jiǎn)稱PS)高親和力、特異地結(jié)合。在正常細(xì)胞中,PS主要分布在細(xì)胞膜內(nèi)側(cè),在細(xì)胞發(fā)生凋亡的早期,細(xì)胞膜上的PS會(huì)外翻到細(xì)胞表面。用帶有綠色熒光的AnnexinV-FITC標(biāo)識(shí)出凋亡細(xì)胞?! ”驹噭┖羞€提供了碘化丙啶(PropidiumIodide,PI),PI可以染色壞死細(xì)胞或凋亡晚期喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,呈現(xiàn)紅色熒光。保存條件: 4℃保存,AnnexinV-FITC、PI染色液需避光保存,半年有效。若長(zhǎng)期保存,可以把PI染色液適當(dāng)分裝后-20℃保存,AnnexinV-FITC結(jié)合液可以直接-20℃保存。包裝規(guī)格:貨號(hào)規(guī)格包裝規(guī)格AnnexinV-FITC1×BindingBufferPIA005-15assays25ul2ml50ulA005-220assays100ul8ml200ulA005-350assays250ul20ml500ulA005-4100assays500ul40ml1mlA005-X100次以上[詳細(xì)]
2018-09-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
用99Tcm-rh-Anexin V檢測(cè)放療或化療后腫瘤細(xì)胞凋亡
用99Tcm-rh-Anexin V檢測(cè)放療或化療后腫瘤細(xì)胞凋亡[詳細(xì)]
2024-09-30 14:04
產(chǎn)品樣冊(cè)
魚細(xì)胞凋亡因子(Fas)酶聯(lián)免疫分析
魚細(xì)胞凋亡因子(Fas)酶聯(lián)免疫分析檢測(cè)范圍:96T0.8IU/L-24IU/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定魚血清、血漿及相關(guān)液體樣本中細(xì)胞凋亡因子(Fas)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中魚細(xì)胞凋亡因子(Fas)亡因子(Fas)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入細(xì)胞凋亡因子(Fas),再與HRP標(biāo)記的細(xì)胞凋亡因子(Fas)抗體,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)。用純化的魚細(xì)胞凋過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的細(xì)胞凋亡因子(Fas)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中魚細(xì)胞凋亡因子(Fas)濃度。試劑盒組成130倍濃20ml×1瓶6ml×1瓶12孔×8條6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×1/瓶終止液6ml×1瓶0.5ml×1瓶1.5ml×1瓶1份2酶標(biāo)試劑標(biāo)準(zhǔn)品(48IU/L)標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液3酶標(biāo)包被板4樣品稀釋液5顯色劑A液6顯色劑B液10說明書11封板膜12密封袋2張1個(gè)標(biāo)本要1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(HRP)活性。魚細(xì)胞凋亡因子(Fas)酶聯(lián)免疫分析操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。24IU/L12IU/L6IU/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液3IU/L1.5IU/L2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。溫育:用封板膜封板后37℃溫育30分鐘。30倍稀釋后備用配液:將30倍濃洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜重復(fù)5次,拍干。30秒后棄去,如此加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總:計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。魚細(xì)胞凋亡因子(Fas)酶聯(lián)免疫分析注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有析出,稀釋時(shí)可在浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。魚細(xì)胞凋亡因子(Fas)酶聯(lián)免疫分析保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
2018-09-14 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
人細(xì)胞凋亡YZ因子(IAP)ELISA試劑盒
人細(xì)胞凋亡YZ因子(IAP)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
2014-08-21 00:00
其它
小鼠細(xì)胞凋亡相關(guān)基因(BCL-2)ELISA試劑盒
小鼠細(xì)胞凋亡相關(guān)基因(BCL-2)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗小鼠BCL-2單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的BCL-2與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗小鼠BCL-2,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液,在450nm處測(cè)OD值,BCL-2濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中BCL-2濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清測(cè)定前用標(biāo)本稀釋液至少作1:5稀釋(取40ul,加標(biāo)本稀釋液160ul,稀釋5倍)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成40ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)BCL-2含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的BCL-2檢測(cè)濃度小于30pg/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的小鼠BCL-2。不與小鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
大鼠細(xì)胞凋亡相關(guān)基因試劑盒使用說明書
大鼠細(xì)胞凋亡相關(guān)基因(Bcl-2)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書使用目的:本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中細(xì)胞凋亡相關(guān)基因(Bcl-2)含量。實(shí)驗(yàn)原理大鼠細(xì)胞凋亡相關(guān)基因試劑盒使用說明書應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠細(xì)胞凋亡相關(guān)基因(Bcl-2)水平。用純化的大鼠細(xì)胞凋亡相關(guān)基因(Bcl-2)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入細(xì)胞凋亡相關(guān)基因(Bcl-2),再與HRP標(biāo)記的細(xì)胞凋亡相關(guān)基因(Bcl-2)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的細(xì)胞凋亡相關(guān)基因(Bcl-2)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠細(xì)胞凋亡相關(guān)基因(Bcl-2)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(400μg/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。200μg/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100μg/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μg/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25μg/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液12.5μg/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。計(jì)算大鼠細(xì)胞凋亡相關(guān)基因試劑盒使用說明書以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
2018-09-14 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
人細(xì)胞凋亡YZ因子(IAP)ELISA試劑盒
人細(xì)胞凋亡YZ因子(IAP)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
2024-09-14 22:39
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人細(xì)胞凋亡相關(guān)基因(BCL-2)ELISA試劑盒說明書
人細(xì)胞凋亡相關(guān)基因(BCL-2)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人BCL-2單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的BCL-2與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人BCL-2,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液,在450nm處測(cè)OD值,BCL-2濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中BCL-2濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):40ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。正常標(biāo)本測(cè)定前用標(biāo)本稀釋液作1:5-10稀釋(取40ul,加標(biāo)本稀釋液160ul,稀釋5倍)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成40ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)BCL-2含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的BCL-2檢測(cè)濃度小于30pg/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人BCL-2。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
豬細(xì)胞凋亡相關(guān)因子(Bcl-2)試劑盒使用說明書
實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中豬細(xì)胞凋亡相關(guān)因子(Bcl-2)水平。用純化的豬細(xì)胞凋亡相關(guān)因子(Bcl-2)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入細(xì)胞凋亡相關(guān)因子(Bcl-2),再與HRP標(biāo)記的細(xì)胞凋亡相關(guān)因子(Bcl-2)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的細(xì)胞凋亡相關(guān)因子(Bcl-2)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中豬細(xì)胞凋亡相關(guān)因子(Bcl-2)濃度。豬細(xì)胞凋亡相關(guān)因子(Bcl-2)試劑盒使用說明書試劑盒組成30倍濃縮洗滌液20ml×1瓶6ml×1瓶12孔×8條6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×1/瓶終止液6ml×1瓶0.5ml×1瓶1.5ml×1瓶1份2酶標(biāo)試劑標(biāo)準(zhǔn)品(200μg/L)標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液3酶標(biāo)包被板4樣品稀釋液5顯色劑A液6顯色劑B液10說明書11封板膜12密封袋2張1個(gè)豬細(xì)胞凋亡相關(guān)因子(Bcl-2)試劑盒使用說明書標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。100μg/L50μg/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25μg/L12.5μg/L6.25μg/L2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié):計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
小鼠細(xì)胞凋亡相關(guān)基因(BCL-2)ELISA試劑盒說明書
小鼠細(xì)胞凋亡相關(guān)基因(BCL-2)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗小鼠BCL-2單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的BCL-2與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗小鼠BCL-2,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液,在450nm處測(cè)OD值,BCL-2濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中BCL-2濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清測(cè)定前用標(biāo)本稀釋液至少作1:5稀釋(取40ul,加標(biāo)本稀釋液160ul,稀釋5倍)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成40ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)BCL-2含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的BCL-2檢測(cè)濃度小于30pg/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的小鼠BCL-2。不與小鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
2024-09-29 10:16
產(chǎn)品樣冊(cè)
產(chǎn)品應(yīng)用(51)利用EarlyTox細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒評(píng)估GM-CSF和TNFα 誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡
腫瘤壞死因子(TNFα)是一個(gè)關(guān)鍵的細(xì)胞炎癥因子,它可以通過許多細(xì)胞通路來調(diào)控各種細(xì)胞事件。[詳細(xì)]
2021-02-24 15:46
應(yīng)用文章
產(chǎn)品應(yīng)用(1)利用SpectraMax Paradigm 多功能檢測(cè)平臺(tái)同時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凋亡和細(xì)胞壞死篩選工作
細(xì)胞凋亡和細(xì)胞壞死的本質(zhì)均為細(xì)胞死亡,但我們可以通過其發(fā)生機(jī)制和病理形態(tài)學(xué)方面所表現(xiàn)出的特征加以區(qū)別。[詳細(xì)]
2021-02-23 16:11
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