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(NSP)定量檢測(cè)試劑盒

本文由 上海科學(xué)儀器有限公司 整理匯編

2018-10-23 10:31 681閱讀次數(shù)

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??谔阋卟《痉墙Y(jié)構(gòu)蛋白(NSP)定量檢測(cè)試劑盒(ELISA)使用說(shuō)明書(shū)【試劑盒名稱】牛口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白(NSP)定量檢測(cè)試劑盒(ELISA)【試劑盒用途】定量檢測(cè)牛血清、血漿及相關(guān)液體樣本中口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白(NSP)的含量?!緳z測(cè)原理】本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本加入到預(yù)先包被牛口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白(NSP)多克隆抗體透明酶標(biāo)包被板中,溫育足夠時(shí)間后,洗滌除去未結(jié)合的成分,再加入酶標(biāo)工作液,溫育足夠時(shí)間后,洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根過(guò)氧化物酶(HRP)催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色產(chǎn)物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中??谔阋卟《痉墙Y(jié)構(gòu)蛋白(NSP)濃度呈正相關(guān),450nm波長(zhǎng)下測(cè)定OD值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的OD值,計(jì)算樣本中??谔阋卟《痉墙Y(jié)構(gòu)蛋白(NSP)含量?!驹噭┖薪M成】1酶標(biāo)包被板12孔×8條7底物夜A6mL2標(biāo)準(zhǔn)品:80ng/ml0.6mL8底物夜B6mL320倍濃縮洗滌液20mL9終止液6mL4標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液6mL10說(shuō)明書(shū)1份5樣本稀釋液6mL11封板膜1張6酶標(biāo)試劑6mL12密封袋1個(gè)備注:標(biāo)準(zhǔn)品用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液依次稀釋為:80、40、20、10、5、2.5ng/ml【需要而未提供的試劑和器材】1、37℃恒溫箱2、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀3、精密移液器及一次性吸頭4、蒸餾水5、一次性試管6、吸水紙【操作步驟】1、準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本:取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,固定于框架上,分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔和空白對(duì)照孔,記錄各孔位置,在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL;待測(cè)樣本孔中先加入待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對(duì)照孔不加。4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說(shuō)明書(shū)操作洗板)。6、加酶標(biāo)工作液:每孔加入酶標(biāo)工作液50μL,空白對(duì)照孔不加。7、溫育:重復(fù)4的操作。8、洗板:重復(fù)5的操作。9、顯色:每孔先加入顯色劑A液50μL,再加入顯色劑B液50μL,37℃避光顯色15min。10、終止:取出酶標(biāo)板,每孔加終止液50μL,終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11、測(cè)定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的吸光值(OD值)。12、計(jì)算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值,計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來(lái)計(jì)算。Z終濃度為實(shí)際測(cè)定濃度乘以稀釋倍數(shù)。相關(guān)產(chǎn)品:小鼠碳酸酐酶2(CA-2)ELISA試劑盒大鼠抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒CAS號(hào):14588-08-0,三苯基膦醋酸鈀,Pd14.2%CAS號(hào):7770-78-7,牛蒡子苷元,分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98%CAS號(hào):591-54-8,4-氨基嘧啶?CAS號(hào):55745-70-5,2,3-二氫-5-醛基-1-苯并呋喃,95%CAS號(hào):1878-65-5,3-氯,98%MouseStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISAkitCAS號(hào):36052-24-1,6-氨基煙酸甲酯?CAS號(hào):17733-22-1,2-氯茴香硫醚,98%FishCortisolELISAKitRatVascularEndothelialcellGrowthFactorD,VEGF-DELISAkit大鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒CAS號(hào):80745-09-1,Z-Arg(Mtr)-OHCHA,98%CAS號(hào):58775-05-6,2,7-二叔丁基芴,98%CAS號(hào):9000-90-2,α-淀粉酶,BRBovinesecretoryimmunoglobulinA,sIgAELISAKit人肌球蛋白(Myosin)ELISA試劑盒rabbittelomerase,TEELISAKitCAS號(hào):4411-26-1,1-Adamantylisothiocyanate?大鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒HumanLegionellaantibodyIgA,LPAb-IgAELISAKitCAS號(hào):1866-38-2,3-氯肉桂酸,98%RatKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISAKit大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒CAS號(hào):38222-83-2,2,6-二叔丁基-4-甲基吡啶,98%CAS號(hào):1016-05-3,二苯并噻吩砜,97%CAS號(hào):10538-51-9,2,5-二甲氧基肉桂酸,99%

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