本文由 上海富衡生物科技有限公司 整理匯編

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  2018-11-19 10:00

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  2018-09-04 10:00

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  為方便廣大用戶使用，試劑內(nèi)容如下：名稱產(chǎn)品編號規(guī)格A羊外周血淋巴細胞分離液200mlB樣本稀釋液（贈品）2010C1119200mlC清洗液（贈品）2010X1118200mlD說明書羊外周血淋巴細胞分離液說明書【實驗前準備】A．適用儀器Zda離心力可達1200g的水平轉(zhuǎn)子離心機B．耗材產(chǎn)品名稱產(chǎn)品貨號產(chǎn)地15ml離心管散裝339650美國NUNC15ml離心管架裝339651美國NUNC50ml離心管散裝339652美國NUNC50ml離心管架裝339653美國NUNC無菌膠頭滴管或塑料滴管羊外周血淋巴細胞分離液說明書【檢驗方法】全過程樣本、試劑及實驗環(huán)境均需在20±2℃的條件下進行。首先取抗凝血按體積比1:1的比例與樣本稀釋液（產(chǎn)品編號：2010C1119）混勻，根據(jù)稀釋后的樣本量大小，分以下兩種情況：情況A：稀釋后的血液樣本量小于5ml時，實驗方法如下：1.取一支15ml離心管，先加入與稀釋后樣本等量的分離液（注：分離液Z少不得少于3ml）。2.用吸管小心吸取稀釋后的血液樣本加于分離液液面上，400-500g，離心20-30min（注：根據(jù)血液樣本量確定離心條件，血液樣本量越多，離心力越大，離心時間越長，具體離心條件需客戶自行摸索，以達到Z理想分離效果）。3.離心后，此時離心管中由上至下分為四層。**層為血漿層。第二層為環(huán)狀乳白色淋巴細胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細胞層。4.用吸管小心吸取第二層環(huán)狀乳白色淋巴細胞層到另一15ml離心管中，往所得離心管中加入10ml清洗液（產(chǎn)品編號：2010X1118），混勻細胞。5.250g，離心10min。6.棄上清。7.用吸管以5ml清洗液（產(chǎn)品編號：2010X1118）重懸所得細胞。8.250g，離心10min。9.重復(fù)6、7、8，棄上清后以0.5ml后續(xù)實驗所需相應(yīng)液體重懸細胞。情況B：稀釋后的血液樣本量大于等于5ml時，實驗方法如下：1.取一支適當?shù)碾x心管，先加入與稀釋后樣本等量的分離液。2.將經(jīng)稀釋后的血液樣本小心加于分離液之液面上，550-650g（Zda離心力可至1000g），離心20-30min。（注：根據(jù)血液樣本量確定離心條件，血液量越多，離心力越大，離心時間越長，具體離心條件需客戶自行摸索，以達到Z理想分離效果。加入血液樣本后，樣本及分離液總體積不得超過離心管總體積的三分之二）。3.剩余步驟同“情況A”中步驟3至步驟9?！咀⒁馐马棥?.全過程樣本、試劑及實驗環(huán)境均需在20±2℃的條件下進行。為獲得Z理想的實驗結(jié)果，**在取血2h內(nèi)進行實驗，血液存放時間越長，細胞分離效果越差。血液放置超過6h后分離效果更差甚至不能達到分離目的。2.本實驗**不要使用高聚合材質(zhì)（如聚苯乙烯）的塑料制品，應(yīng)使用無靜電、低靜電離心管及未經(jīng)堿處理過后的玻璃制品，因為靜電作用將導(dǎo)致細胞貼壁、堿處理的玻璃表面會變成毛面，影響細胞分離效果。3.吸取過多的淋巴細胞層及分離液層會導(dǎo)致分離液交界處的粒細胞被吸出從而使混雜的粒細胞數(shù)量增加。4.吸取過多的淋巴細胞層上層溶液會導(dǎo)致血漿蛋白及血小板混雜。5.如所實驗后細胞得率或活性過低，請聯(lián)系上海研謹生物以尋求技術(shù)支持幫助。羊外周血淋巴細胞分離液說明書【儲存條件及有效期】18-25℃保存，有效期2年。本品易感染細菌，需無菌條件操作。無菌條件下操作，啟封后置常溫保存。如4℃保存，本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果?！緟⒖贾担▍⒖挤秶勘緦嶒灹馨图毎崛÷始凹兌染笥?0%。[詳細]

  2018-09-14 10:00

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