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  FH-M063-小鼠外周血單個核細胞說明書[詳細]

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  FH-R63-大鼠外周血單個核細胞說明書[詳細]

  2024-05-30 09:33

  應用文章

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• 小鼠單個核細胞分離液說明書

  全過程樣本、試劑及實驗環(huán)境均需在20±2℃的條件下進行。首先根據(jù)樣本量大小，分以下幾種情況：一、使用15ml離心管時：情況A：血液樣本量小于3ml時，實驗方法如下：1.取一支15ml離心管，加入3ml分離液。2.用吸管小心吸取血液樣本加于分離液之液面上，400-650g，離心20-30min（注：根據(jù)血液樣本量確定離心條件，血液樣本量越多，離心力越大，離心時間越長，具體離心條件需客戶自行摸索，以達到Z理想分離效果）。3.離心后，此時離心管中由上至下分為四層。**層為血漿層。第二層為環(huán)狀乳白色單個核細胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細胞層。4.用吸管小心吸取第二層環(huán)狀乳白色單個核細胞層到另一15ml離心管中，向所得離心管中加入10ml清洗液（產(chǎn)品編號：2010X1118），混勻細胞。5.250g，離心10min。6.棄上清。7.用吸管以5ml清洗液（產(chǎn)品編號：2010X1118）重懸所得細胞。8.250g，離心10min。9.重復6、7、8，棄上清后以0.5ml后續(xù)實驗所需相應液體重懸細胞。情況B：血液樣本量為3-6ml時，實驗方法如下：1.取一支15ml離心管，先加入與血液樣本等量的分離液。2.用吸管小心吸取血液樣本加于分離液之液面上，400-650g，離心20-30min（注：根據(jù)血液樣本量確定離心條件，血液樣本量越多，離心力越大，離心時間越長，具體離心條件需客戶自行摸索，以達到Z理想分離效果，但Zda離心力**不超過1000g）。3.離心后，此時離心管中由上至下分為四層。**層為血漿層。第二層為環(huán)狀乳白色單個核細胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細胞層。4.用吸管小心吸取第二層環(huán)狀乳白色單個核細胞層到另一15ml離心管中，向所得離心管中加入10ml清洗液（產(chǎn)品編號：2010X1118），混勻細胞。5.250g，離心10min。6.棄上清。7.用吸管以5ml清洗液（產(chǎn)品編號：2010X1118）重懸所得細胞。8.250g，離心10min。9.重復6、7、8，棄上清后以0.5ml后續(xù)實驗所需相應液體重懸細胞。二、使用50ml離心管時：小鼠單個核細胞分離液說明書情況A：血液樣本量為6-10ml時，實驗方法如下：1.取一支50ml離心管，先加入與血液樣本等量的分離液。2.用吸管小心吸取血液樣本加于分離液之液面上，500-950g，離心20-30min（注：根據(jù)血液樣本量確定離心條件，血液樣本量越多，離心力越大，離心時間越長，具體離心條件需客戶自行摸索，以達到Z理想分離效果，但Zda離心力**不超過1200g）。3.離心后，此時離心管中由上至下分為四層。**層為血漿層。第二層為環(huán)狀乳白色單個核細胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細胞層。4.用吸管小心吸取第二層環(huán)狀乳白色單個核細胞層到另一15ml離心管中，向所得離心管中加入10ml清洗液（產(chǎn)品編號：2010X1118），混勻細胞。5.250g，離心10min。6.棄上清。7.用吸管以5ml清洗液（產(chǎn)品編號：2010X1118）重懸所得細胞。8.250g，離心10min。9.重復6、7、8，棄上清后以0.5ml后續(xù)實驗所需相應液體重懸細胞。情況B：血液樣本量為10-20ml時，實驗方法如下：1.取一支50ml離心管，先加入與血液樣本等量的分離液。2.用吸管小心吸取血液樣本加于分離液之液面上，650-110g，離心20-30min（注：根據(jù)血液樣本量確定離心條件，血液樣本量越多，離心力越大，離心時間越長，具體離心條件需客戶自行摸索，以達到Z理想分離效果，但Zda離心力**不超過1200g）。3.離心后，此時離心管中由上至下分為四層。**層為血漿層。第二層為環(huán)狀乳白色單個核細胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細胞層。4.用吸管小心吸取第二層環(huán)狀乳白色單個核細胞層到另一15ml離心管中，向所得離心管中加入10ml清洗液（產(chǎn)品編號：2010X1118），混勻細胞。5.250g，離心10min。6.棄上清。7.用吸管以5ml清洗液（產(chǎn)品編號：2010X1118）重懸所得細胞。8.250g，離心10min。9.重復6、7、8，棄上清后以0.5ml后續(xù)實驗所需相應液體重懸細胞。小鼠單個核細胞分離液說明書【注意事項】1.全過程樣本、試劑及實驗環(huán)境均需在20±2℃的條件下進行。為獲得Z理想的實驗結(jié)果，**在取血2h內(nèi)進行實驗，血液存放時間越長，細胞分離效果越差。血液放置超過6h后分離效果更差甚至不能達到分離目的。2.本實驗**不要使用高聚合材質(zhì)（如聚苯乙烯）的塑料制品，應使用無靜電、低靜電離心管及未經(jīng)堿處理過后的玻璃制品，因為靜電作用將導致細胞貼壁、堿處理的玻璃表面會變成毛面，影響細胞分離效果。3.吸取過多的單個核細胞層及分離液層會導致分離液交界處的粒細胞被吸出從而使混雜的粒細胞數(shù)量增加。4.吸取過多的單個核細胞層上層溶液會導致血漿蛋白及血小板混雜。5.如所實驗后細胞得率或活性過低，請聯(lián)系上海研謹技術(shù)支持以尋求幫助，具體聯(lián)系方式詳見下方生產(chǎn)企業(yè)信息。6.當血液樣本粘度過高需稀釋時，Zyou稀釋方法：將血液與樣本稀釋液（產(chǎn)品編號：2010C1119）1:1稀釋混勻備用。注：不當?shù)南♂尫椒〞档图毎寐始盎钚?。如血液樣本?jīng)過稀釋則分離過程中需適當降低離心力和離心時間。小鼠單個核細胞分離液說明書【儲存條件及有效期】18-25℃保存，有效期2年。本品易感染細菌，需無菌條件操作。無菌條件下操作，啟封后置常溫保存。如4℃保存，本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果?！緟⒖贾担▍⒖挤秶勘緦嶒灹馨图毎崛÷始凹兌染笥?0%。下表為成年人外周血中各種細胞的數(shù)量及比例，用戶可適當進行參考。[詳細]

  2018-09-14 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• FH-M102-小鼠外周血樹突狀細胞說明書

  FH-M102-小鼠外周血樹突狀細胞說明書[詳細]

  2024-05-30 09:33

  應用文章

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• 小鼠臟器組織單個核細胞分離液

  為方便廣大用戶使用，試劑內(nèi)容如下：名稱產(chǎn)品規(guī)格編號A小鼠臟器組織單個核細胞分離液200mlB樣本稀釋液（贈品）2010C1119200mlC清洗液（贈品）2010X1118200mlDF液（贈品）F2013TBD200mlE說明書1份【實驗前準備】A．適用儀器Zda離心力可達1200g的水平轉(zhuǎn)子離心機B．耗材產(chǎn)品名稱產(chǎn)品貨號產(chǎn)地15ml離心管散裝339650美國NUNC15ml離心管架裝339651美國NUNC50ml離心管散裝339652美國NUNC50ml離心管架裝339653美國NUNC無菌膠頭滴管或塑料滴管【檢驗方法】全過程樣本、試劑及實驗環(huán)境均需在20±2℃的條件下進行。1.首先制備組織單細胞懸液，制備方法詳見“組織單細胞懸液制備技術(shù)”。2.取一支15ml離心管，加入與組織單細胞懸液等量的分離液（注：分離液Z少不得少于3ml）。3.用吸管小心吸取組織單細胞懸液加于分離液液面上，400-500g，離心20-30min。（注：根據(jù)組織單細胞懸液量確定離心條件，組織單細胞懸液量越大，離心力越大，離心時間越長，具體離心條件需客戶自行摸索，以達到Z理想分離效果）。4.離心后，此時離心管中由上至下分為四層。**層為稀釋液層。第二層為環(huán)狀乳白色單個核細胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細胞層。5.用吸管小心吸取第二層環(huán)狀乳白色單個核細胞層到另一15ml離心管中，向離心管中加入10ml清洗液（產(chǎn)品編號：2010X1118），混勻細胞。6.250g，離心10min。7.棄上清。8.用吸管以5ml清洗液（產(chǎn)品編號：2010X1118）重懸所得細胞。9.250g，離心10min。10.重復7、8、9，棄上清后以0.5ml后續(xù)實驗所需相應液體重懸細胞?！咀⒁馐马棥?.全過程樣本、試劑及實驗環(huán)境均需在20±2℃的條件下進行。為獲得Z理想的實驗結(jié)果，**在取樣2h內(nèi)進行實驗，樣品存放時間越長，細胞分離效果越差。樣品放置超過6h后分離效果更差甚至不能達到分離目的。2.本實驗**不要使用高聚合材質(zhì)（如聚苯乙烯）的塑料制品，應使用無靜電、低靜電離心管及未經(jīng)堿處理過后的玻璃制品，因為靜電作用將導致細胞貼壁、堿處理的玻璃表面會變成毛面，影響細胞分離效果。3.吸取過多的單個核細胞層及分離液層會導致分離液交界處的粒細胞被吸出從而使混雜的粒細胞數(shù)量增加。4.分離液用量大于組織單細胞懸液樣本時，分離效果更佳。5.如實驗后細胞得率或活性過低，請聯(lián)系上海研謹以尋求幫助技術(shù)支持。【儲存條件及有效期】18-25℃保存，有效期2年。本品易感染細菌，需無菌條件操作。無菌條件下操作，啟封后置常溫保存。如4℃保存，本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果?！緟⒖贾担▍⒖挤秶勘緦嶒灹馨图毎崛÷始凹兌却笥?0%。下表為成年人外周血中各種細胞的數(shù)量及比例，用戶可適當進行參考?！鞠嚓P(guān)實驗技術(shù)方案】1.組織單細胞懸液制備技術(shù)。2.所獲得淋巴細胞的培養(yǎng)技術(shù)。3.所獲得淋巴細胞的核酸提取技術(shù)。4.所獲得淋巴細胞的鑒定方法A.流式細胞技術(shù)B.免疫組化技術(shù)C.原位雜交技術(shù)D.PCR技術(shù)注：上述技術(shù)方案詳情請登陸上海研謹生物科技公司搜索“細胞分離、純化、擴增、鑒定及生物ZL技術(shù)手冊”，并在說明書項目欄下下載使用?！究赡艽嬖诘膯栴}及解決方法】1.由于血液粘度、細胞密度等差異可能造成的問題及解決方案如下表所示：出現(xiàn)情況出現(xiàn)原因建議解決方案離心后目的細胞存在于血漿層或稀釋液層轉(zhuǎn)速過小或離心時間過短適當增減轉(zhuǎn)速離心后目的細胞存在于分離液中轉(zhuǎn)速過大或離心時間過長適當增減轉(zhuǎn)速離心后白環(huán)層彌散細胞密度過大調(diào)整細胞密度離心后白環(huán)層太淺或看不見細胞密度過小調(diào)整細胞密度2.本分離液分離細胞的原理為密度梯度離心，其密度與溫度、大氣壓等密切相關(guān)。不同地區(qū)客戶可根據(jù)當?shù)厍闆r對離心條件進行適當調(diào)整。建議對離心條件進行調(diào)整時，恒定離心時間，對離心轉(zhuǎn)速進行調(diào)整。3.本分離液依照國際標準，全部使用YY級原料，性能指標與國產(chǎn)同類產(chǎn)品略有不同，可能出現(xiàn)紅細胞沉降不完全的情況，可以適當加大離心轉(zhuǎn)速。注：在對離心條件進行調(diào)整時，離心轉(zhuǎn)速的加減以50-100g為基數(shù)，直至達到Z理想分離效果，離心力Z小不得小于400g，Zda不得大于1200g。離心時間以20-30min為準。[詳細]

  2018-09-14 10:00

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