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• ELISA原理（實驗條件、技術(shù)要點）

  ELISA原理（實驗條件、技術(shù)要點）實驗條件和技術(shù)要點：酶聯(lián)免疫吸附測定（Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay,簡稱ELISA）與免疫酶測定等名稱所指的內(nèi)容是不相同的，ELISA的內(nèi)容專指固相吸附技術(shù)和免疫酶標(biāo)抗體（或抗原）技術(shù)相結(jié)合的一種方法，它是將抗原或抗體包被在固相支持物（或稱載體上），然后再進行免疫反應(yīng)，形成酶標(biāo)記的抗原抗體復(fù)合物，反應(yīng)完畢，借助底物顯示特異結(jié)合的標(biāo)記抗體（或抗原）上的酶活性，用酶與底物反應(yīng)后生成的有色產(chǎn)物進行光密度測定，達到抗原或抗體定量的目的。在應(yīng)用ELISA時，首先要清楚下面內(nèi)容：1，是檢測抗體還是抗原？2，檢測的結(jié)果是定性還是定量？3，是否需要檢測特異抗體的類型？4，所用抗體/單克隆抗體的親和力怎樣？(1)檢測抗原Z常用于檢測抗原的方法是非競爭性的雙抗體夾心法，其次是競爭法。但競爭法在具體實驗中有些困難，特別是檢測微生物的抗原，因為需要標(biāo)記抗原，這對于某些抗原是很難做到的，甚至是不可能的。另外在競爭法中，酶標(biāo)記的抗原與標(biāo)本直接混合在一起，許多標(biāo)本中含有酶YZ劑或蛋白A樣物質(zhì)，可影響ELISA的結(jié)果。(2)檢測抗體檢測抗體種類常用的方法是檢測抗體種類的捕獲法，這個方法常用于檢測特異性IgG、IgA和IgM.。這個方法的**步是捕獲所需要檢測的一個種類的抗體，接下來是檢測捕獲的抗體是否是特異性抗原的抗體。間接ELISA在檢測IgG時比較簡單，但不適用于檢測其他種類的抗體，因為血清中如果有特異IgG存在將與IgM或IgA等競爭結(jié)合抗原。競爭法檢測抗體有兩種方法：一種是將標(biāo)記的抗體和標(biāo)本同時加入反應(yīng)孔內(nèi)，但標(biāo)記的抗體和標(biāo)本中的抗體必須是結(jié)合抗原的不同決定簇；另一種是先加標(biāo)本，沖洗后再加標(biāo)記的抗體。競爭法檢測抗體比間接法容易判斷結(jié)果，并且比較敏感和特異。不論選擇哪種方法，ELISA都包括6個步驟：1，抗原或抗體吸附于固相；2.加標(biāo)本和試劑；3，孵育和沖洗；4，加酶標(biāo)抗原或抗體；5，加適當(dāng)?shù)牡孜铮?，檢測和分析結(jié)果。雖然ELISA法在理論上十分簡單，但每一步都有要注意的事項。不論是新設(shè)計的ELISA還是沿用其他ELISA方法都有以下幾方面技術(shù)要點：固相載體的選擇和試劑的制備，反應(yīng)條件和操作的標(biāo)準(zhǔn)化。酶標(biāo)記抗原競爭法利用混合的未標(biāo)記抗原和酶標(biāo)記抗原相互競爭抗體上的結(jié)合點，從而進行抗原的定量。未標(biāo)記抗原的量越大，則酶標(biāo)記抗原和抗體的結(jié)合就越受到Y(jié)Z。但是競爭法在實驗時比較復(fù)雜，有時在抗原混合液與相應(yīng)抗體孵育后，在測定游離抗原與抗體相結(jié)合抗原的活性以前，要先進行鹽析或有機溶劑沉淀或第二抗體沉淀等方法把兩種不同存在形態(tài)的抗原分開。并且在加入底物后，容易產(chǎn)生血清色的物質(zhì)。因此，每次測定時都需做空白對照。由于這些缺點，酶標(biāo)記抗原競爭法使用不多。促銷期間有精美禮品贈送還可以享受免費代測服務(wù)。您只需要把標(biāo)本寄給我們，一星期左右就可以出實驗數(shù)據(jù)。歡迎購買我公司的ELISA試劑盒，我們承諾試劑盒有質(zhì)量問題包退包換。上海研謹生物公司對外承接RT-PCR技術(shù)服務(wù)、細胞培養(yǎng)技術(shù)服務(wù)、原位雜交技術(shù)服務(wù)、免疫沉淀技術(shù)服務(wù)、WesternBlotting技術(shù)服務(wù)、動物模型構(gòu)建服務(wù)、SCI論文服務(wù)、PCR實驗服務(wù)，并為廣大科研用戶提供各種高品質(zhì)的試劑和服務(wù)，如細胞、血清、Elisa試劑盒、質(zhì)粒提取試劑盒、DNA產(chǎn)物純化試劑盒、病毒RNA提取試劑盒、PCR等產(chǎn)品，針對以上各項服務(wù)，我們均有具有豐富服務(wù)經(jīng)驗和深厚專業(yè)背景的人員團隊為您提供技術(shù)服務(wù)和支持。[詳細]

  2018-09-04 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 實驗條件

  總結(jié)了一些常見的實驗方法[詳細]

  2018-04-09 10:49

  應(yīng)用文章

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• ELISA的技術(shù)要點--試劑的制備

  ELISA的技術(shù)要點--試劑的制備試劑的制備　　ELISA的主要試劑有固相的抗原或抗體、酶標(biāo)記的抗原或抗體和與標(biāo)記酶直接關(guān)聯(lián)的酶反應(yīng)底物。以下分別介紹這些試劑的原料和制備方法?！　。ㄒ唬┕滔噍d體　檢測中可作ELISA中載體的物質(zhì)很多，Z常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯為塑料，可制成各種形式。在ELISA測定過程中，它作為載體和容器，不參與化學(xué)反應(yīng)。重要的是聚苯乙烯具有較強的吸附蛋白質(zhì)的性能，抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后依然保留原來的免疫活性。加之它的價格低廉，所以被普遍采用?！　LISA載體的形狀主要有三種：小試管、小珠和微量反應(yīng)板。小試管的特點是兼作反應(yīng)的容器，Z后放入分光光度計中比色。小珠一般為直徑0.6cm的圓球，表面經(jīng)磨砂處理后吸附面積大增加。如用特殊的洗滌器，在洗滌過程中使圓珠滾動淋洗，效果更好。Z常用的載體為微量反應(yīng)板，專用于ELISA測定的產(chǎn)品也稱為ELISA試劑盒，國際通用的標(biāo)準(zhǔn)板形是8×12的96孔式。為便于作少量標(biāo)本的檢測，有制成8聯(lián)或12聯(lián)孔條的，放入座架后，大小與標(biāo)準(zhǔn)ELISA板相同。ELISA試劑盒的特點是可以同時進行大量標(biāo)本的檢測，并可在特定的比色計上迅速讀出結(jié)果?，F(xiàn)在已有多種自動化儀器用于微量反應(yīng)板型的ELISA檢測，包括加樣、洗滌、保溫、比色等步驟，對操作的標(biāo)準(zhǔn)化有重要意義?！　×己玫腅LISA試劑盒應(yīng)該是吸附性能好，空白值低，孔底透明度高，各板之間和同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于配料的不同和制作工藝的差別，各種產(chǎn)品的質(zhì)量差異很大。因此每一批號的聚苯乙烯制品在使用前須檢查其性能。常用的檢查方法為：以一定濃度的人IgG（一般為10ng/ml）包被ELISA板各孔后，每孔內(nèi)加入適當(dāng)稀釋的酶標(biāo)抗人IgG抗人IgG抗體，保溫后洗滌，加底物顯色，終止酶反應(yīng)后分別測每孔溶液的吸光度。控制反應(yīng)條件，使各讀數(shù)在0.8左右。計算所有讀數(shù)的平均值。所有單個讀數(shù)與平均讀數(shù)之差應(yīng)小于10％?！　∨c聚苯乙烯類似的塑料為聚氯乙烯。作為ELISA固相載體，聚氯乙烯板的特點為質(zhì)軟板薄，可切割，價廉、但光潔度不如聚苯乙烯板。聚氯乙烯對蛋白質(zhì)的吸附性能比聚苯乙烯高，但空白值有時也略高?！　楸容^不同固相在某一ELISA測定中的優(yōu)劣，可用以下方法加以檢驗：用其它免疫學(xué)測定方法選出一個典型的陽性標(biāo)本和一個典型的陰性標(biāo)本。將它們分別進行一系列稀釋后，在不同的固相載體上按預(yù)定的ELISA操作步驟進行測定，然后比較測定結(jié)果。在哪一種載體上陽性結(jié)果與陰性結(jié)果判別Zda，這種載體就是這一ELISA測定的Z合適的固相載體?！　〕芰现破吠?，固相酶免疫測定的載體還有兩種材料：一是微孔濾膜，如硝酸纖維素膜、尼龍膜等。另一種載體是以含鐵的磁性微粒制作的，反應(yīng)時固相微粒懸浮在溶液中，具有液相反應(yīng)的速率，反應(yīng)結(jié)束后用磁鐵吸引作為分離的手段，洗滌也十分方便，但需配備特殊的儀器?！　。ǘ┛乖涂贵w　　在ELISA實施過程中，抗原和抗體的質(zhì)量是實驗是否成功的關(guān)鍵因素。本法要求所用抗原純度高，抗體效價高、親和力強。　　ELISA所用抗原有三個來源：天然抗原、重組抗原和合成多肽抗原。天然抗原取材于動物組織或體液、微生物培養(yǎng)物等，一般含有多種抗原成分，需經(jīng)純化，提取出特定的抗原成分后才可應(yīng)用，因此也稱提純抗原（purifiedantigen）。重組抗原（recombinantantigen）和多肽抗原（peptideantigen）均為人工合成品，使用安全，而且純度高，干擾物質(zhì)少。因此雖然制備合成抗原有較高的技術(shù)難度且要求較為昂貴的儀器設(shè)備和試劑，其應(yīng)用仍十分普遍，特別是對那些天然抗原不易得到的試驗，更顯出其獨到之處。　　用于ELISA的抗體有多克隆的和單克隆的?？寡宄煞謴?fù)雜，應(yīng)從中提取IgG才可用于包被固相或酶標(biāo)記。含單克隆抗體的小鼠腹水中的特異性抗體含量較高，有時可適當(dāng)稀釋后直接進行包被。制備酶結(jié)合物用的抗體的質(zhì)量往往要求有較高的純度。經(jīng)硫酸銨鹽析純化的IgG可進一步用各種分子篩層析提純。也可用親和層析法提純特異性IgG，如用酶消化IgG后提取的Fab片段，則效果更好。　?。ㄈ┟庖呶絼　」滔嗟目乖蚩贵w稱為免疫吸附劑。將抗原或抗體固相化的過程稱為包被（coating）。由于載體的不同，包被的方法也不同。如以聚苯乙烯ELISA板為載體，通常將抗原或抗體溶于緩沖液（Z常用的為pH9.6的碳酸緩沖液）中，加于ELISA板孔中在4℃，經(jīng)清洗后即可應(yīng)用。如果包被液中的蛋白質(zhì)濃度過低，固相載體表面有能被此蛋白質(zhì)完全覆蓋，其后加入的血清標(biāo)本和酶結(jié)合物中的蛋白質(zhì)也會部分地吸附于固相載體表面，Z后產(chǎn)生非特異性顯色而導(dǎo)致本底偏高。在這種情況下，如在包被后再用1％～5％牛血清白蛋白包被一次，可以消除這種干擾。這一過程稱為封閉（blocking）。包被好的ELISA試劑盒在低溫可放置一段時間而不失去其免疫活性?！　。ㄋ模┟负偷孜铩　LISA中所用的酶要求純度高、催化反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率高、專一性強、性質(zhì)穩(wěn)定、來源豐富、價格不貴、制備成的酶標(biāo)抗體或抗原性質(zhì)穩(wěn)定，繼續(xù)保留著它的活性部分和催化能力。**在受檢標(biāo)本中不存在與標(biāo)記酶相同的酶。另外它的相應(yīng)底物應(yīng)易于制備和保存，價格低廉，有色產(chǎn)物易于測定，光吸收高。ELISA中Z常用的酶為辣根過氧化酶（HRP）和從牛腸粘膜或大腸桿菌提取的堿性磷酸酶（AP）。HRP在蔬菜作物辣根中含量很高，純化方法也不復(fù)雜。它是一種糖蛋白，含糖量約18％；分子量為44kD；是一種復(fù)合酶，由主酶（酶蛋白）和輔基（亞鐵血紅素）結(jié)合而成的一種卟啉蛋白質(zhì)。主酶為無色糖蛋白，在275nm波長處有Z高吸收峰；輔基是深棕色的含鐵卟啉環(huán).[詳細]

  2018-09-27 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 食品安全elisa試劑盒技術(shù)的-操作要點

  ELISA技術(shù)的-操作要點：優(yōu)質(zhì)的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異,國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗一般均用板式點.本文將敘述板式注意要點,要詳細的使用說明,嚴格遵照規(guī)定操作,必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果.在ELISA中一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物.加樣時應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡.常見elisa試劑盒：1、細胞因子檢測試劑盒：如白介素、選擇素、集落刺激因子，腫瘤壞死因子，干擾素，轉(zhuǎn)化生長因子，趨化因子，細胞因子受體，粘附分子，生長因子，凋亡因子等等2、心肌梗塞檢測試劑盒：如肌鈣蛋白，肌紅蛋白，C-反應(yīng)蛋白等等3、內(nèi)分泌檢測試劑盒：如甲狀腺,,性激素,孕酮,睪酮,生長激素,生長抑素,內(nèi)皮素,皮質(zhì)醇,骨鈣素,催乳素,促腎上腺皮質(zhì)激素,促卵泡素,雌二醇，雌三醇等等4、肝纖維化檢測試劑盒：如纖維連接蛋白，透明質(zhì)酸，膠原，基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子，基質(zhì)金屬蛋白酶，層粘蛋白等等5、自身免疫檢測試劑盒：如甲狀腺,抗核抗體,類風(fēng)濕因子,循環(huán)免疫復(fù)合物,抗胰島細胞抗體等等6、腫瘤標(biāo)志物檢測試劑盒：如腫瘤標(biāo)志物，組織多肽抗原，腫瘤相關(guān)因子等等7、優(yōu)生優(yōu)育檢測試劑盒：8、傳染病檢測試劑盒如百日咳,EB病毒,A族鏈球菌等等9、特種蛋白檢測試劑盒如免疫球蛋白,抗鏈O-aso,類風(fēng)濕因子RF,C反應(yīng)蛋白,微量白蛋白,β-2微球蛋白human,鐵蛋白,轉(zhuǎn)鐵蛋白transferrin等等按試劑盒說明書的要求準(zhǔn)備實驗中需用的試劑.ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的.自配的緩沖液應(yīng)用pH計測量較正.從冰箱中取出的試驗用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用.試劑盒中本次試驗不需用的部分應(yīng)及時放回冰箱保存.[詳細]

  2024-10-05 18:10

  產(chǎn)品樣冊

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• ELISA實驗原理、步驟、問題分析

  上海恒遠生物科技有限公司專業(yè)供應(yīng)各種屬elisa試劑盒，提供免費代測服務(wù)，保證實驗結(jié)果客觀真實性。我公司對試劑盒質(zhì)量1**%保證，若存在質(zhì)量問題，我們無條件包退換。若需要了解試劑盒的詳細信息，請來的咨詢：電話：021-6052049813636351217業(yè)務(wù)QQ:1005074258何經(jīng)理ELISA實驗原理、步驟、ELISA問題分析ELISA實驗原理酶聯(lián)免疫吸附測定（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）原理1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附劑測定（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）用于IgG定量測定的文章，使得1966年開始用于抗原定位的酶標(biāo)抗體技術(shù)發(fā)展成液體標(biāo)本中微量物質(zhì)的測定方法。ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高，故可極大地地放大反應(yīng)效果，從而使測定方法達到很高的敏感度類型及步驟ELISA的主要常用類型及步驟1.間接法測抗體間接法是檢測抗體常用的方法。其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體（二抗）以檢測與固相抗原結(jié)合的受檢抗體，故稱為間接法。操作步驟如下：1）將特異性抗原與固相載體聯(lián)結(jié)，形成固相抗原，洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。2）加稀釋的樣本，保溫反應(yīng)。樣本中的特異抗體與固相抗原結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后，固相載體上只留下特異性抗體，樣本中的其他成份在洗滌過程中被洗去。3）加酶標(biāo)抗抗體。固相免疫復(fù)合物中的抗體與酶標(biāo)抗抗體結(jié)合，從而間接記上酶。洗滌后，固相載體上的酶量與樣本中受檢抗體的量正相關(guān)。4）加底物顯色。2.雙抗體夾心法測抗原雙抗體夾心法是檢測抗原Z常用的方法，操作步驟如下：1）將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié)，形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。2）加受檢樣本，保溫反應(yīng)。樣本中的抗原與固相抗體結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。3）加酶標(biāo)抗體，保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時固相載體上帶有的酶量與樣本中受檢抗原的量相關(guān)。4）加底物顯色。3.雙抗原夾心法測抗體反應(yīng)原理和模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進行包被和制備酶結(jié)合物，以檢測相應(yīng)的抗體。與間接法測抗體的不同之處為以酶標(biāo)抗原代替酶標(biāo)抗抗體4.競爭法測抗原小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個以上的位點，因此不能用雙抗體夾心法進行測定，可以采用競爭法模式。其原理是標(biāo)本中的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合。標(biāo)本中抗原量含量愈多，結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗原愈少，Z后的顯色也愈淺。小分子激素、藥物等ELISA測定多用此法。ELISAQ&A如何選擇合適的陽性對照?陽性對照的基本組成應(yīng)該盡量與檢測樣本的組成一致，一般陽性對照多以含蛋白保護劑的緩沖液為基質(zhì)，加入一定量的待檢物質(zhì)。比如，以人血清為標(biāo)本的測定，陽性對照多用確定的病人血清或者以復(fù)鈣人血漿為原料加入一定量標(biāo)準(zhǔn)品。如何選擇合適的陰性對照?陰性對照的基本組成也應(yīng)該盡量與檢測樣本的組成一致，**先行檢測確定其中不含待檢物質(zhì)。比如，檢測人血清標(biāo)本時，陰性對照應(yīng)該選擇正常人血清;檢測免疫動物血清中抗體效價時，陰性對照應(yīng)該選擇該動物的免疫前血清。如何選擇Zyou化的包被條件?1.包被抗原的選擇包被抗原可分為天然蛋白、重組蛋白和小分子抗原三大類。天然蛋白需經(jīng)純化才能用直接吸附法包被，對于含雜質(zhì)較多的抗原可以采用間接捕獲法包被（先用能夠與目的抗原反應(yīng)的物質(zhì)如抗體直接吸附在酶標(biāo)板上，再通過特異性反應(yīng)使抗原固相化）。經(jīng)純化的重組蛋白一般皆可直接包板。小分子抗原比如多肽以及一些小分子有機化合物，由于分子量太小，往往難于直接吸附在酶標(biāo)板上，一般都先使其與無關(guān)蛋白質(zhì)如BSA等偶聯(lián)，偶聯(lián)物吸附于固相載體上。2.包被液的選擇一般常用的是pH9.6的碳酸鹽緩沖液，如果包被的抗原在堿性條件下不穩(wěn)定的話，也可以使用pH7.2的磷酸鹽緩沖液。3.包被溫度的選擇通常是4-8度條件下過夜或者37度保溫2小時，我們強烈建議4-8度條件下包被，有利于蛋白活性的保持。4.包被濃度的選擇包被的Z適濃度隨固相載體和包被物的性質(zhì)變化，一般蛋白質(zhì)的包被濃度為1-5ug/ml，要明確針對特定包被抗原的Z適包被濃度需要通過實驗來確定。包板后需要封閉嗎?應(yīng)該選擇什么樣的封閉體系?封閉是否必要，取決于ELISA的模式及具體的實驗條件。一般說來，雙抗體夾心法，只要酶標(biāo)記物是高活性的，操作時洗滌徹底，不經(jīng)封閉也可得到滿意的結(jié)果。而在間接法測定中，封閉一般是必不可少的。常用的封閉劑有0.05%-0.5%的BSA、10%的小牛血清、1%明膠、5%的脫脂奶粉，AbMART推薦使用5%脫脂奶粉，價廉而且封閉能力強，不過5%脫脂奶粉只適合短期內(nèi)使用，不宜長期保存，所以試劑盒中較少使用。如何正確使用酶結(jié)合物?1.酶結(jié)合物的稀釋液在稀釋液中常加入高濃度的無關(guān)蛋白質(zhì)（例如1%BSA或5%脫脂奶粉），通過競爭YZ酶結(jié)合物在固相載體上的非特異性吸附。一般還加入能夠YZ蛋白質(zhì)吸附于塑料表面的非離子型表面活性劑，如吐溫20（0.05%的濃度較為適宜）。2.正確稀釋酶結(jié)合物酶結(jié)合物的合適工作濃度需要通過預(yù)實驗來確定，濃度過高易導(dǎo)致本底偏高，濃度過低則會導(dǎo)致陽性信號的減弱。酶結(jié)合物**在使用前稀釋，稀釋后的酶結(jié)合物不宜長期保存，因為低濃度的酶結(jié)合物極易失活。問題可能的原因解決方法陰性對照產(chǎn)生了陽性的結(jié)果試劑或者耗材污染更換試劑，使用一次性耗材洗板出現(xiàn)問題更換更強配方的洗滌液，增加洗板次數(shù)，延長洗板時間如果是在雙抗體夾心法中出現(xiàn)，有可能是包被抗體與二抗間有交叉反應(yīng)更換包被抗體或二抗使用了過多的抗體減少抗體使用量整板出現(xiàn)高背景二抗產(chǎn)生了非特異性吸附減少二抗使用量，縮短二抗反應(yīng)時間顯色液不新鮮使用現(xiàn)配的顯色液顯色反應(yīng)時間過長沒有終止控制顯色反應(yīng)時間，及時終止反應(yīng)試劑或者耗材污染更換試劑，使用一次性耗材反應(yīng)溫度過高導(dǎo)致的非特異性吸附嚴格控制反應(yīng)在Z適溫度下進行封閉條件不佳導(dǎo)致的非特異性吸附更換封閉能力更強的封閉液，延長封閉時間反應(yīng)信號偏低包被條件不合適提高包板濃度，延長包板時間抗原抗體反應(yīng)不夠充分延長反應(yīng)時間，確保反應(yīng)在Z適溫度下進行顯色液配方不恰當(dāng)增加顯色底物的量二抗結(jié)合不夠提高二抗?jié)舛?，延長反應(yīng)時間，更換效果更好的二抗梯度稀釋做ELISA時產(chǎn)生跳孔現(xiàn)象酶標(biāo)板疊放導(dǎo)致傳熱不均勻，各孔反應(yīng)溫度有差異盡量避免酶標(biāo)板疊放在一起移液器稀釋時未能保持連續(xù)性定期校準(zhǔn)移液器，確保移液器的正確使用反應(yīng)溶液蒸發(fā)酶標(biāo)板用封條密封或者加蓋洗板不均勻確定洗板機能夠正常工作酶標(biāo)板底有雜物或者水珠讀板時清理干凈酶標(biāo)板底部[詳細]

  2018-11-16 10:02

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• 條件性恐懼實驗

  條件性恐懼實驗[詳細]

  2014-09-22 00:00

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• 頂空進樣器重復(fù)性實驗條件

  頂空進樣器重復(fù)性實驗條件[詳細]

  2013-07-16 00:00

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• ELISA操作要點

  ELISA操作要點[詳細]

  2024-09-28 05:15

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• 雞γ干擾素（IFN-γ）Elisa試劑盒實驗原理

  本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中雞γ干擾素(IFN-γ)水平。用純化的雞γ干擾素(IFN-γ)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入γ干擾素(IFN-γ)，再與HRP標(biāo)記的雞γ干擾素(IFN-γ)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的γ干擾素(IFN-γ)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中雞γ干擾素(IFN-γ)濃度。標(biāo)本要求1．標(biāo)本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。120pg/ml5號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液60pg/ml4號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液30pg/ml3號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液15pg/ml2號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液7.5pg/ml1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液[詳細]

  2018-10-08 10:01

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• elisa實驗原理：大腸桿菌宿主殘留蛋白

  elisa實驗原理：大腸桿菌宿主殘留蛋白本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)水平。用純化的大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)，再與HRP標(biāo)記的大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)濃度。[詳細]

  2018-11-16 10:02

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• 兔子谷胱甘肽（GSH）Elisa試劑盒實驗原理

  兔子谷胱甘肽(GSH)Elisa試劑盒實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中兔子谷胱甘肽(GSH)水平。用純化的兔子谷胱甘肽(GSH)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入谷胱甘肽(GSH)，再與HRP標(biāo)記的谷胱甘肽(GSH)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的谷胱甘肽(GSH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中兔子谷胱甘肽(GSH)濃度。[詳細]

  2018-11-16 10:02

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• 大鼠鐵蛋白 FE ELISA試劑盒實驗原理

  大鼠鐵蛋白 FE ELISA試劑盒實驗原理 本生生物公司供應(yīng)：ELISA試劑盒,動物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進口凍存管,細胞培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,進口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器等。[詳細]

  2022-10-13 11:43

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• 人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA試劑盒實驗原理

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  2023-08-07 17:21

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  2023-08-18 11:45

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  2023-09-07 10:46

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  2024-09-14 08:14

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• ELISA試劑盒實驗原理與操作步驟

  上海勁馬生物科技有限公司ELISA試劑盒實驗原理與操作步驟實驗方法：酶聯(lián)免疫法/酶免法（ELISA）檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法操作步驟：具體請參照說明書（詳細說明書請聯(lián)系我司業(yè)務(wù)人員：021-60517348，13817140470。）注意事項1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1．試劑盒保存：2-8℃2．有效期：6個月[詳細]

  2024-09-11 18:03

  產(chǎn)品樣冊

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• 鹽霧試驗箱技術(shù)條件

  鹽霧試驗箱技術(shù)條件[詳細]

  2012-12-26 00:00

  安裝說明

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• 干燥箱技術(shù)條件

  干燥箱技術(shù)條件資料下載：http://www.010sy17.com/bjhtfk-Products-6729673干燥箱規(guī)格與技術(shù)參數(shù):型號（mm）臺式電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱DHG-9000系列DHG-9030ADHG-9030ADDHG-9070ADHG-9070ADDHG-9140ADHG-9140ADDHG-9240ADHG-9240AD內(nèi)膽尺寸340×325×325450×400×450550×450×550600×550×750外形尺寸625×510×490740×580×630830×650×730880×770×930輸入功率870W1570W2070W2470W控溫范圍RT＋10℃～250℃溫度分辨率0.1℃恒溫波動度±1℃定時范圍1～9999min電源電壓AC220V50Hz載物托架2塊工作環(huán)境溫度5℃-40℃型號（mm）臺式電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱DHG-9003系列DHG-9023ADHG-9023ADDHG-9053ADHG-9053ADDHG-9123ADHG-9123ADDHG-9203ADHG-9203AD內(nèi)膽尺寸340×325×300420×400×345550×450×550600×600×650外形尺寸620×540×490720×580×530830×650×730880×770×825輸入功率870W1120W2070W2470W控溫范圍RT＋10℃～250℃溫度分辨率0.1℃恒溫波動度±1℃定時范圍1～9999min電源電壓AC220V50Hz載物托架2塊工作環(huán)境溫度5℃-40℃型號（mm）臺式電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱DHG-9005系列DHG-903DHG-903DDHG-905DHG-905DDHG-907DHG-907DDHG-914DHG-914DDHG-924DHG-924D內(nèi)膽尺寸340×325×325420×400×345450×400×450550×450×550600×550×750外形尺寸625×510×490720×580×530740×580×630830×650×730800×770×930輸入功率970W1220W1670W2170W2870W控溫范圍RT＋10℃～300℃溫度分辨率0.1℃恒溫波動度±1℃定時范圍1～9999min電源電壓AC220V50Hz載物托架2塊工作環(huán)境溫度5℃-40℃北京恒泰豐科試驗設(shè)備有限公司[詳細]

  2018-10-05 10:01

  產(chǎn)品樣冊

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• 濕熱試驗箱技術(shù)條件

  本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了濕熱試驗箱的術(shù)語和定義、使用條件，技術(shù)要求、試驗方法、檢驗規(guī)則及標(biāo)志、包裝、貯存。本標(biāo)準(zhǔn)適用于對電工、電子及其他產(chǎn)品、零部件及材料進行濕熱試驗的試驗箱。[詳細]

  2018-10-13 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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