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癌胚抗原(CEA)ELISA試劑盒說明書

本文由 上海撫生實業(yè)有限公司 整理匯編

2018-10-09 10:00 229閱讀次數(shù)

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癌胚抗原(CEA)ELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用標(biāo)本:體液癌胚抗原(CEA)ELISA試劑盒說明書試驗原理:BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知BFGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將BFGF和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細(xì)胞生長因子ELISA檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。癌胚抗原(CEA)ELISA試劑盒說明書自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。癌胚抗原(CEA)ELISA試劑盒說明書操作注意事項1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。9.按照中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。癌胚抗原(CEA)ELISA試劑盒說明書樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。癌胚抗原(CEA)ELISA試劑盒說明書操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。癌胚抗原(CEA)ELISA試劑盒說明書性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。癌胚抗原(CEA)ELISA試劑盒說明書結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的BFGF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlTM兔子血栓調(diào)節(jié)蛋白規(guī)格:48T/96TPAI-1兔子纖溶酶原激活物YZ因子1規(guī)格:48T/96TPAI兔子纖溶酶原激活物YZ因子規(guī)格:48T/96TICAM-3/CD50兔子細(xì)胞間粘附分子3規(guī)格:48T/96TICAM-2/CD102兔子細(xì)胞間粘附分子2規(guī)格:48T/96TICAM-1/CD54兔子細(xì)胞間粘附分子1規(guī)格:48T/96TDPD兔子脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉規(guī)格:48T/96TDHEA-S兔子脫氫表雄酮硫酸酯規(guī)格:48T/96THA兔子透明質(zhì)酸規(guī)格:48T/96TMBP兔子髓磷脂堿性蛋白規(guī)格:48T/96TRBP-4兔子視黃醇結(jié)合蛋白4規(guī)格:48T/96TGHRP兔子生長激素釋放多肽規(guī)格:48T/96TADM兔子腎上腺髓質(zhì)素規(guī)格:48T/96-4兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子4規(guī)格:48T/96-3兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子3規(guī)格:48T/96TNSE兔子神經(jīng)特異性烯醇化酶規(guī)格:48T/96TNGF兔子神經(jīng)生長因子規(guī)格:48T/96TGFAP兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白規(guī)格:48T/96TPGE2兔子前列腺素E2規(guī)格:48T/96TPGE1兔子前列腺素E1規(guī)格:48T/96TGIP兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽規(guī)格:48T/96TCORT兔子皮質(zhì)酮/腎上腺酮規(guī)格:48T/96TCortisol兔子皮質(zhì)醇規(guī)格:48T/96TFⅡ兔子凝血因子Ⅱ規(guī)格:48T/96TTR兔子凝血酶受體規(guī)格:48T/96TBNP兔子腦鈉素/腦鈉尿肽規(guī)格:48T/96TES兔子內(nèi)皮抑素規(guī)格:48T/96TeNOS-3兔子內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3規(guī)格:48T/96TET-1兔子內(nèi)皮素1規(guī)格:48T/96TET-1兔子內(nèi)皮素1規(guī)格:48T/96TIgM兔子免疫球蛋白M規(guī)格:48T/96TIgG兔子免疫球蛋白G規(guī)格:48T/96TIgE兔子免疫球蛋白E規(guī)格:48T/96TIgA兔子免疫球蛋白A規(guī)格:48T/96TSam兔子可溶性粘附分子規(guī)格:48T/96TsVCAM-1兔子可溶性血管細(xì)胞粘附分子1規(guī)格:48T/96TsEPCR兔子可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體規(guī)格:48T/96TsICAM-1兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1規(guī)格:48T/96TsCD40L兔子可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體規(guī)格:48T/96TsP-selectin兔子可溶性P選擇素規(guī)格:48T/96TsE-selectin兔子可溶性E選擇素規(guī)格:48T/96TANGA兔子抗中性粒細(xì)胞顆粒抗體規(guī)格:48T/96TMIP-5兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白5規(guī)格:48T/96TMIP-1α/CCL3兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α規(guī)格:48T/96TCollagenaseII兔子膠原酶II規(guī)格:48T/96TCollagenaseI兔子膠原酶I規(guī)格:48T/96TbFGF兔子堿性成纖維細(xì)胞生長因子規(guī)格:48T/96TT4兔子甲狀腺素規(guī)格:48T/96TTIMP-1兔子基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子1規(guī)格:48T/96TMMP-9兔子基質(zhì)金屬蛋白酶9規(guī)格:48T/96TMMP-5兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5規(guī)格:48T/96TMMP-4兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4規(guī)格:48T/96TMMP-3兔子基質(zhì)金屬蛋白酶3規(guī)格:48T/96TCr兔子骨膠原交聯(lián)規(guī)格:48T/96TT兔子睪酮規(guī)格:48T/96THGF兔子肝細(xì)胞生長因子規(guī)格:48T/96TTE兔子端粒酶規(guī)格:48T/96TCETP兔子膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白規(guī)格:48T/96TMCP-1/CCL2/MCAF兔子單核細(xì)胞趨化蛋白1規(guī)格:48T/96TPRL兔子催乳素規(guī)格:48T/96TPRL兔子催乳素規(guī)格:48T/96TACTH兔子促腎上腺皮質(zhì)激素規(guī)格:48T/96TFSH兔子促卵泡素規(guī)格:48T/96TTSH兔子促甲狀腺素規(guī)格:48T/96TLH兔子促黃體激素規(guī)格:48T/96TLH兔子促黃體激素規(guī)格:48T/96TE2兔子雌二醇規(guī)格:48T/96TiFABP兔子腸脂肪酸結(jié)合蛋白規(guī)格:48T/96TC3a兔子補體片斷3a規(guī)格:48T/96TC4兔子補體蛋白4規(guī)格:48T/96TEGF兔子表皮生長因子規(guī)格:48T/96TLIFR兔子白血病YZ因子受體規(guī)格:48T/96TLTB4兔子白三烯B4規(guī)格:48T/96TIL-4兔子白介素4規(guī)格:48T/96TIL-3兔子白介素3規(guī)格:48T/96TIL-2兔子白介素2規(guī)格:48T/96TIL-1sRⅠ兔子白介素1可溶性受體I規(guī)格:48T/96TIL-1β兔子白介素1β規(guī)格:48T/96TIL-10兔子白介素10規(guī)格:48T/96TIL-1兔子白介素1規(gu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