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現(xiàn)貨供應(yīng)人蛋白酪氨酸磷酸酶ELISA 檢測試劑盒
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2024-09-28 07:02 477閱讀次數(shù)
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人(Human)蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標本:血清或血漿試驗原理:PTP試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知PTP濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將PTP和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中PTP的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品:40ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進行稀稀空轉(zhuǎn)移趨化生長因子β1對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標準品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標記的抗PTP抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型人(Human)蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)ELISA檢測試劑盒自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1.試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液5、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備1.標準品:標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:40ng/ml(6號標準品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。20ng/ml(5號標準品)100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液10ng/ml(4號標準品)100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液5.0ng/ml(3號標準品)100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液2.5ng/ml(2號標準品)100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液1.25ng/ml(1號標準品)100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0ng/ml(空轉(zhuǎn)移趨化生長因子β1對照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空轉(zhuǎn)移趨化生長因子β1孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。人(Human)蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)ELISA檢測試劑盒建議使用的實驗方案標準品濃度(ng/ml)A4040樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B2020樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C1010樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D5.05.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E2.52.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F1.251.25樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的PTP標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的PTP含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-40ng/ml4、敏感度:0.1ng/ml人β-微管蛋白(TUBB)ELISA試劑盒humanβ-tubulin,TUBBELISA試劑盒人前列腺素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒HumanProstaglandinF2α,PGF2αELISA試劑盒人總前列腺特異抗原(tPSA)ELISA試劑盒Humantotalprostatespecificantigen,tPSAELISA試劑盒人抗人類免疫缺陷病毒抗體(HIV)ELISA試劑盒Humananti-immunodeficiencyvirusantibody,HIVELISA試劑盒人解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA試劑盒HumanUreaplasmaurealyticumantibody,UU-AbELISA試劑盒人復(fù)合前列腺特異性抗原(CPSA)ELISA試劑盒Humancomplexedprostatespecificantigen,cPSAELISA試劑盒人單純皰疹病毒Ⅱ型抗體(HSVⅡ-Ab)ELISA試劑盒HumanHerpessimplexvirusⅡantibody,HSVⅡ-AbELISA試劑盒人雌激素誘導(dǎo)蛋白PS2ELISA試劑盒HumanEstrogen-inducedproteinpS2ELISA試劑盒人細菌性陰道?。˙V)ELISA試劑盒Humanbacterialvaginosis,BVELISA試劑盒人單純皰疹病毒Ⅰ型抗體(HSVⅠAb)ELISA試劑盒HumanHerpessimplexvirusⅠantibody,HSVⅠAbELISA試劑盒人雌激素誘導(dǎo)蛋白PS2ELISA試劑盒HumanEstrogen-inducedproteinpS2ELISA試劑盒人乳頭狀瘤病毒抗體IgM(HPV-IgM)ELISA試劑盒HumanpapillomavirusIgM,HPV-IgMELISA試劑盒人乳頭狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)ELISA試劑盒humanpapillomavirusIgG,HPV-IgGELISA試劑盒人單純皰疹病毒抗原2(HSV-Ag2)ELISA試劑盒HumanHerpessimplexvirus2,HSV-Ag2ELISA試劑盒人游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒HumanFreeProstateSpecificAntigen,fPSAELISA試劑盒人前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒Humanprostatespecificantigen,PSAELISA試劑盒
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- 人(Human)蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標本:血清或血漿試驗原理:PTP試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知PTP濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將PTP和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中PTP的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品:40ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進行稀稀空轉(zhuǎn)移趨化生長因子β1對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標準品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標記的抗PTP抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型人(Human)蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)ELISA檢測試劑盒自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1.試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液5、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備1.標準品:標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:40ng/ml(6號標準品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。20ng/ml(5號標準品)100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液10ng/ml(4號標準品)100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液5.0ng/ml(3號標準品)100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液2.5ng/ml(2號標準品)100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液1.25ng/ml(1號標準品)100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0ng/ml(空轉(zhuǎn)移趨化生長因子β1對照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空轉(zhuǎn)移趨化生長因子β1孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。人(Human)蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)ELISA檢測試劑盒建議使用的實驗方案標準品濃度(ng/ml)A4040樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B2020樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C1010樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D5.05.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E2.52.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F1.251.25樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的PTP標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的PTP含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-40ng/ml4、敏感度:0.1ng/ml人β-微管蛋白(TUBB)ELISA試劑盒humanβ-tubulin,TUBBELISA試劑盒人前列腺素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒HumanProstaglandinF2α,PGF2αELISA試劑盒人總前列腺特異抗原(tPSA)ELISA試劑盒Humantotalprostatespecificantigen,tPSAELISA試劑盒人抗人類免疫缺陷病毒抗體(HIV)ELISA試劑盒Humananti-immunodeficiencyvirusantibody,HIVELISA試劑盒人解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA試劑盒HumanUreaplasmaurealyticumantibody,UU-AbELISA試劑盒人復(fù)合前列腺特異性抗原(CPSA)ELISA試劑盒Humancomplexedprostatespecificantigen,cPSAELISA試劑盒人單純皰疹病毒Ⅱ型抗體(HSVⅡ-Ab)ELISA試劑盒HumanHerpessimplexvirusⅡantibody,HSVⅡ-AbELISA試劑盒人雌激素誘導(dǎo)蛋白PS2ELISA試劑盒HumanEstrogen-inducedproteinpS2ELISA試劑盒人細菌性陰道病(BV)ELISA試劑盒Humanbacterialvaginosis,BVELISA試劑盒人單純皰疹病毒Ⅰ型抗體(HSVⅠAb)ELISA試劑盒HumanHerpessimplexvirusⅠantibody,HSVⅠAbELISA試劑盒人雌激素誘導(dǎo)蛋白PS2ELISA試劑盒HumanEstrogen-inducedproteinpS2ELISA試劑盒人乳頭狀瘤病毒抗體IgM(HPV-IgM)ELISA試劑盒HumanpapillomavirusIgM,HPV-IgMELISA試劑盒人乳頭狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)ELISA試劑盒humanpapillomavirusIgG,HPV-IgGELISA試劑盒人單純皰疹病毒抗原2(HSV-Ag2)ELISA試劑盒HumanHerpessimplexvirus2,HSV-Ag2ELISA試劑盒人游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒HumanFreeProstateSpecificAntigen,fPSAELISA試劑盒人前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒Humanprostatespecificantigen,PSAELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-28 07:02
產(chǎn)品樣冊
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兔蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)ELISA試劑盒說明書
- 兔蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)ELISA試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于檢測兔血清,血漿及相關(guān)液體樣本中兔蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)水平。實驗原理:本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定標本中兔蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)。用純化的兔蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后再與HRP標記的蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標本中兔蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)的存在與否。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存陰性對照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存陽性對照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟:編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。結(jié)果判定:試驗有效性:陽性對照孔平均值≥1.00;陰性對照平均值≤0.10臨界值(CUTOFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15陰性判定:樣品OD值<臨界值(CUTOFF)者為兔蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)陰性陽性判定:樣品OD值≥臨界值(CUTOFF)者為兔蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)陽性注意事項1.操作嚴格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用。2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。3.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。5.底物請避光保存。6.試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,使用雙波長檢測時,參考波長為630nm7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為2M的硫酸,使用時必須注意安全。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-11-07 14:16
產(chǎn)品樣冊
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蛋白酪氨酸磷酸酶受體R(PTPRR)ELISA試劑盒說明書
- 蛋白酪氨酸磷酸酶受體R(PTPRR)ELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用標本:體液蛋白酪氨酸磷酸酶受體R(PTPRR)ELISA試劑盒試驗原理:BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知BFGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將BFGF和生物素標記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細胞生長因子ELISA檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。蛋白酪氨酸磷酸酶受體R(PTPRR)ELISA試劑盒自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1.試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備標準品:標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。蛋白酪氨酸磷酸酶受體R(PTPRR)ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的BFGF標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlBcl-2小鼠B細胞淋巴瘤因子2規(guī)格:48T/96TBid小鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白規(guī)格:48T/96TAP12小鼠apelin12規(guī)格:48T/96T8-iso-PG小鼠8異前列腺素規(guī)格:48T/96T8-OHdG小鼠8羥基脫氧鳥苷規(guī)格:48T/96T6-keto-PGF1a小鼠6酮前列腺素F1a規(guī)格:48T/96T6-K-PG小鼠6酮前列腺素規(guī)格:48T/96T5-HT小鼠5羥色胺規(guī)格:48T/96T5-NT小鼠5核苷酸酶規(guī)格:48T/96TColⅣ小鼠Ⅳ型膠原規(guī)格:48T/96TPⅢNP小鼠Ⅲ型前膠原肽規(guī)格:48T/96TPⅢNT小鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽規(guī)格:48T/96TColⅢ小鼠Ⅲ型膠原規(guī)格:48T/96TColⅡ小鼠Ⅱ型膠原規(guī)格:48T/96TOH小鼠25羥基維生素D3規(guī)格:48T/96TPⅠCP小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽規(guī)格:48T/96TCⅠCP小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽規(guī)格:48T/96X小鼠Ⅰ型膠原N末端肽規(guī)格:48T/96TColⅠ小鼠Ⅰ型膠原規(guī)格:48T/96T[詳細]
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2018-10-09 10:00
產(chǎn)品樣冊
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小鼠T細胞蛋白酪氨酸磷酸酶(TC-PTP)試劑盒使用說明書
- 小鼠T細胞蛋白酪氨酸磷酸酶(TC-PTP)試劑盒使用說明書[詳細]
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2014-06-03 00:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒
- 大鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-10 00:00
選購指南
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小鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒
- 小鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-30 12:53
操作手冊
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人蛋白磷酸酶1調(diào)控(PPP1R1A)檢測試劑盒說明書
- 人蛋白磷酸酶1調(diào)控(PPP1R1A)試劑盒(ELISA)使用說明書Cat.No.RJ-12167l本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中人蛋白磷酸酶1調(diào)控(PPP1R1A)的含量。l有效期:6個月l保存條件:2-8℃l本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷實驗原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被人蛋白磷酸酶1調(diào)控(PPP1R1A)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人蛋白磷酸酶1調(diào)控(PPP1R1A)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。[詳細]
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2018-11-25 10:00
產(chǎn)品樣冊
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裸鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒
- 裸鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-10 20:48
產(chǎn)品樣冊
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小鼠絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒
- 小鼠絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-08 00:00
選購指南
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大鼠絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒
- 大鼠絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-28 00:47
選購指南
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人硝基酪氨酸(Nitrotyrosine)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com人硝基酪氨酸(Nitrotyrosine)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人Nitrotyrosine單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的Nitrotyrosine與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人Nitrotyrosine,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,Nitrotyrosine濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中Nitrotyrosine濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):10nmol/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、尿液等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清可能需要稀釋,請先做預(yù)實驗,以確定稀釋倍數(shù)。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成10nmol/ml的溶液。設(shè)標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入10nmol/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標準品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0pmol/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)Nitrotyrosine含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的Nitrotyrosine檢測濃度小于8pmol/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人Nitrotyrosine。不與人其它細胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于11%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人酪氨酸酶ELISA試劑盒使用說明書
- 本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中人抗酪氨酸酶的含量。實驗原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人酪氨酸酶水平。用純化的人酪氨酸酶抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入酪氨酸酶,再與HRP標記的酪氨酸酶抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的酪氨酸酶呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人酪氨酸酶濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品:180ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,在**、第二孔中分別加標準品100μl,然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為120ng/L,80ng/L,40ng/L,20ng/L,10ng/L)。加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。注意事項:試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線,**做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%檢測范圍:3ng/L-160ng/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-11-07 14:16
產(chǎn)品樣冊
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2024-09-29 15:12
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2024-09-27 23:50
課件
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大鼠酪氨酸羥化酶(TH)ELISA檢測試劑盒
- www.biokanu.com本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷大鼠酪氨酸羥化酶(TH)ELISA檢測試劑盒使用說明書檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被大鼠酪氨酸羥化酶(TH)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠酪氨酸羥化酶(TH)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。3.細胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。5.保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品酶標儀(450nm)高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱操作注意事項試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。標準品稀釋液即可視為陰性對照或者空白;預(yù)處理后的樣本無需稀釋,直接取10μL加樣即可。嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。所有液體組分使用前充分搖勻。試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標板12孔×8條12孔×4條無標準品(320pmol/mL)0.6mL0.6mL按說明書進行稀釋標準品稀釋液6mL3mL無樣本稀釋液6mL3mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無注:標準品用標準品稀釋液依次稀釋為:320、160、80、40、20、10pmol/mL試劑的準備20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。洗板方法手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步驟從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。結(jié)果判斷繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應(yīng)OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。試劑盒性能1.準確性:標準品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。2.靈敏度:Zdi檢測濃度小于1.0pmol/mL。3.特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。4.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。5.貯藏:2-8℃,避光防潮保存。6.有效期:6個月免責(zé)聲明1.試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔(dān),本公司概不負責(zé)。2.嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔(dān)。[詳細]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人蛋白ELISA 檢測試劑盒有現(xiàn)貨
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2015-06-17 00:00
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人 (Human) KLotho蛋白ELISA 檢測試劑盒
- 人(Human)KLotho蛋白ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標本:血清或血漿試驗原理:KLotho試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知KLotho濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將KLotho和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中KLotho的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品:400pg/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進行稀稀空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標準品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標記的抗KLotho抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備標準品:標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:400pg/ml(6號標準品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。200pg/ml(5號標準品)100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液100pg/ml(4號標準品)100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液50pg/ml(3號標準品)100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液25pg/ml(2號標準品)100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液12.5pg/ml(1號標準品)100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0pg/ml(空白對照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標準品濃度(pg/ml)A400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E2525樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F12.512.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的KLotho標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的KLotho含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-400pg/ml4、敏感度:1.0pg/ml[詳細]
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2018-09-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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現(xiàn)貨人KLotho蛋白ELISA 檢測試劑盒
- 本試劑僅供研究使用標本:血清或血漿人KLotho蛋白ELISA檢測試劑盒試驗原理: KLotho試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知KLotho濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將KLotho和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中KLotho的濃度呈比例關(guān)系?! ∽詡洳牧险麴s水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人KLotho蛋白ELISA檢測試劑盒試劑的準備標準品:標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結(jié)果。人KLotho蛋白ELISA檢測試劑盒試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的KLotho標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的KLotho含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-400pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlBC032-500mlTC-100500mlCLS1128-200ml細胞分離液1.128200mlCLS1068-1-200ml細胞分離液1.068-1200mlCLS1071-200ml細胞分離液1.071200mlCLS1063-200ml細胞分離液1.063200mlCLS1068-200ml細胞分離液1.068200mlCLS1082-200ml細胞分離液1.082200mlCLS1093-200ml細胞分離液1.093200mlBB003-250ml超級新生牛血清250mlCLS1078-200ml細胞分離液1.078200ml人KLotho蛋白ELISA檢測試劑盒BB002-250ml普通胎牛血清250mlBC007-500mlDMEM(低糖)培養(yǎng)基【促銷】500mlBB004-500ml特級新生牛血清500mlCLS1075-200ml細胞分離液1.075200mlBB005-500ml普通新生牛血清(經(jīng)56℃30′滅活)500mlBB006-250ml特級馬血清250mlBB007-500ml普通級馬血清500mlBC030-500mlFischer’sMedium500mlBC031-500mlMcCoy’s500mlBC011-500mlIMEM500mlTC017-500mlBME500mlCLS1066-200ml細胞分離液1.066200mlBC006-500mlDMEM(低糖)培養(yǎng)基【促銷】500mlBC008-500mlDMEM(低糖)培養(yǎng)基【促銷】500mlBC009-500mlDMEM(低糖)培養(yǎng)基【促銷】500mlBC010-500mlDMEM(低糖)培養(yǎng)基【促銷】500mlBC001-500mlDMEM(高糖)培養(yǎng)基【促銷】500mlBC002-500mlDMEM(高糖)培養(yǎng)基【促銷】500mlBC003-500mlDMEM(高糖)培養(yǎng)基【促銷】500mlBC004-500mlDMEM(高糖)培養(yǎng)基【促銷】500mlBC005-500mlDMEM(高糖)培養(yǎng)基【促銷】500ml[詳細]
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2018-09-14 10:01
產(chǎn)品樣冊
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大鼠酪氨酸(Tyrosine)ELISA試劑盒試劑盒
- 大鼠酪氨酸(Tyrosine)ELISA試劑盒試劑盒使用說明書ELISA試劑盒使用目的:本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中酪氨酸(Tyrosine)含量。大鼠酪氨酸(Tyrosine)ELISA試劑盒實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中大鼠酪氨酸(Tyrosine)水平。用純化的大鼠酪氨酸(Tyrosine)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入酪氨酸(Tyrosine),再與HRP標記的酪氨酸(Tyrosine)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的酪氨酸(Tyrosine)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠酪氨酸(Tyrosine)濃度。大鼠酪氨酸(Tyrosine)ELISA試劑盒試劑盒組成2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié):計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。大鼠酪氨酸(Tyrosine)ELISA試劑盒試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。ELISA試劑盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊
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