資料庫
晶體蛋白β(Cryβ)ELISA試劑盒說明書
-
本文由 上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 整理匯編
2018-10-09 10:00 221閱讀次數(shù)
文檔僅可預(yù)覽首頁內(nèi)容,請下載后查看全文信息!
-
立即下載
晶體蛋白β(Cryβ)ELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用標(biāo)本:體液晶體蛋白β(Cryβ)ELISA試劑盒試驗(yàn)原理:BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知BFGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將BFGF和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。人堿性成纖維細(xì)胞生長因子ELISA檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。晶體蛋白β(Cryβ)ELISA試劑盒自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項(xiàng)1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。9.按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。晶體蛋白β(Cryβ)ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的BFGF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlTNF-α人腫瘤壞死因子α規(guī)格:48T/96TCA724人腫瘤標(biāo)志物規(guī)格:48T/96TNAP-2/CXCL7人中性粒細(xì)胞趨化蛋白2規(guī)格:48T/96TNGAL人中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白規(guī)格:48T/96TNAP人中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶規(guī)格:48T/96TNE人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶規(guī)格:48T/96TMK人中期因子規(guī)格:48T/96TLXA4人脂氧素A4規(guī)格:48T/96TLTA人脂磷壁酸規(guī)格:48T/96TADP人脂聯(lián)素規(guī)格:48T/96TFABP人脂肪酸結(jié)合蛋白規(guī)格:48T/96TLipase人脂肪酶規(guī)格:48T/96TADRP人脂肪分化相關(guān)蛋白規(guī)格:48T/96TLBP人脂多糖結(jié)合蛋白規(guī)格:48T/96TLPS人脂多糖/內(nèi)毒素規(guī)格:48T/96TLPL人脂蛋白脂酶規(guī)格:48T/96TLp-PL-A2人脂蛋白磷脂酶A2規(guī)格:48T/96TLp-α人脂蛋白α規(guī)格:48T/96TLAM人脂阿拉伯甘露聚糖規(guī)格:48T/96TRANTES人正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子規(guī)格:48T/96TILK-1人整合素連接激酶1規(guī)格:48T/96TITGαM/CD11b人整合素αM型規(guī)格:48T/96TIntegrinαⅤβ3人整合素αⅤβ3規(guī)格:48T/96TTI人真胰島素規(guī)格:48T/96T
登錄或新用戶注冊
請用手機(jī)微信掃描下方二維碼
快速登錄或注冊新賬號
微信掃碼,手機(jī)電腦聯(lián)動
更多資料
-
晶體蛋白β(Cryβ)ELISA試劑盒說明書
- 晶體蛋白β(Cryβ)ELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用標(biāo)本:體液晶體蛋白β(Cryβ)ELISA試劑盒試驗(yàn)原理:BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知BFGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將BFGF和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。人堿性成纖維細(xì)胞生長因子ELISA檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。晶體蛋白β(Cryβ)ELISA試劑盒自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項(xiàng)1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。9.按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。晶體蛋白β(Cryβ)ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的BFGF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlTNF-α人腫瘤壞死因子α規(guī)格:48T/96TCA724人腫瘤標(biāo)志物規(guī)格:48T/96TNAP-2/CXCL7人中性粒細(xì)胞趨化蛋白2規(guī)格:48T/96TNGAL人中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白規(guī)格:48T/96TNAP人中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶規(guī)格:48T/96TNE人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶規(guī)格:48T/96TMK人中期因子規(guī)格:48T/96TLXA4人脂氧素A4規(guī)格:48T/96TLTA人脂磷壁酸規(guī)格:48T/96TADP人脂聯(lián)素規(guī)格:48T/96TFABP人脂肪酸結(jié)合蛋白規(guī)格:48T/96TLipase人脂肪酶規(guī)格:48T/96TADRP人脂肪分化相關(guān)蛋白規(guī)格:48T/96TLBP人脂多糖結(jié)合蛋白規(guī)格:48T/96TLPS人脂多糖/內(nèi)毒素規(guī)格:48T/96TLPL人脂蛋白脂酶規(guī)格:48T/96TLp-PL-A2人脂蛋白磷脂酶A2規(guī)格:48T/96TLp-α人脂蛋白α規(guī)格:48T/96TLAM人脂阿拉伯甘露聚糖規(guī)格:48T/96TRANTES人正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子規(guī)格:48T/96TILK-1人整合素連接激酶1規(guī)格:48T/96TITGαM/CD11b人整合素αM型規(guī)格:48T/96TIntegrinαⅤβ3人整合素αⅤβ3規(guī)格:48T/96TTI人真胰島素規(guī)格:48T/96T[詳細(xì)]
-
2018-10-09 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
猴晶狀體蛋白αB(CRYαB)ELISA試劑盒
- 猴晶狀體蛋白αB(CRYαB)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
-
2015-09-24 00:00
課件
-
寧波新芝CRY細(xì)胞融合儀使用說明書
- 寧波新芝CRY細(xì)胞融合儀使用說明書[詳細(xì)]
-
2024-09-30 19:28
其它
-
ELISA試劑盒說明書
- 植物防衛(wèi)素/植物抗毒素(PDF)ELISA試劑盒說明書本試劑盒植物防衛(wèi)素/植物抗毒素(PDF)ELISA試劑盒僅供體外研究使用預(yù)期應(yīng)用ELISA法定量測定植物組織、細(xì)胞或其它相關(guān)樣本中防衛(wèi)素/植物抗毒素(PDF)含量。實(shí)驗(yàn)原理用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗PDF抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗PDF抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的PDF呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。試劑盒組成及試劑配制1.酶聯(lián)板:一塊(96孔)1.標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為20ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別稀釋成20ng/ml,10ng/ml,5ng/ml,2.5ng/ml,1.25ng/ml,0.625ng/ml,0.312ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。如配制10ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml(不要少于0.5ml)20ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。2.樣品稀釋液:1×20ml/瓶。3.檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。4.檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。5.檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100ul),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如1ul檢測溶液A加99ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。6.檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。7.底物溶液:1×10ml/瓶。8.濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。9.終止液:1×10ml/瓶(2NH2SO4)。10.覆膜:1×5張操作步驟實(shí)驗(yàn)開始前,請?zhí)崆芭渲坪盟性噭?;試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),均應(yīng)用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。建議各實(shí)驗(yàn)室在操作前先進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)以建立**稀釋倍數(shù)。1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00ul,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液100ul(取1ul檢測溶液A加99ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。3.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350ul/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。4.每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液)100ul,37℃,60分鐘。5.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350ul/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。6.依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。7.依序每孔加終止溶液50ul,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。8.用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。注:1.每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔(不同于空白孔),該孔不加任何試劑,只是Z后加底物溶液及2NH2SO4。測量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。2.嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫。使用后立即冷藏保存試劑。3.洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入檢測溶液B或底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,洗板拍干后請立即加入后步試劑,應(yīng)避免微孔干燥掉。4.消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。5.在儲存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。6.未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請于2-8℃保存。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。7.建議檢測樣品時(shí)均設(shè)雙孔測定,以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。洗板方法手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。自動洗板:如果有自動洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。特異性本試劑盒可同時(shí)檢測重組或天然的植物防衛(wèi)素/植物抗毒素(PDF),且與其它相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)(對數(shù)坐標(biāo)),OD值為縱坐標(biāo)(普通坐標(biāo)),在半對數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(推薦使用專業(yè)制作曲線軟件進(jìn)行分析,如curveexpert1.3),根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。2.一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。3.請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。4.如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計(jì)算時(shí)請Z后乘以稀釋倍數(shù)。5.在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液工作液時(shí),請以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。6.底物請避光保存。說明1.在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。2.小心吸取試劑并嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。請注意在吸取標(biāo)本/標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時(shí),**個(gè)孔與Z后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大,將會導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育”時(shí)間,從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。而且,洗滌不充分將影響試驗(yàn)結(jié)果。3.試劑盒保存:部分試劑保存于-20℃,部分試劑保存于2-8℃,具體以標(biāo)簽上的標(biāo)示為準(zhǔn)。4.濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。5.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。6.中、英文說明書可能會有不一致之處,請以英文說明書為準(zhǔn)。7.所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。8.有效期:6個(gè)月ELISA試劑盒聯(lián)系人:馬先生(先生)部門(職位):銷售(經(jīng)理)手機(jī)號碼:15021200052電話:86-021-54100800/64855665傳真:86-021-54261506所在地:上海公司地址:徐匯區(qū)欽江路15號1405郵政編碼:200233郵件:solarbio@126.com公司網(wǎng)址:http://www.shsolarbio.com[詳細(xì)]
-
2018-09-02 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
DKK-1 ELISA試劑盒說明書
- Wnt通路YZ因子DKK-1檢測試劑盒背景介紹:DKK-1是影響成骨細(xì)胞成熟的WNT信號通道的拮抗劑。Dkk-1首先在人肝母細(xì)胞瘤和Wilms’瘤中,然后在肝腫瘤中被發(fā)現(xiàn)高表達(dá)。Dkk-1的高表達(dá)被證明可以成為多種腫瘤預(yù)后差的標(biāo)志,如肝細(xì)胞癌、食道癌、骨肉瘤、肺癌、結(jié)腸癌、骨關(guān)節(jié)炎、骨質(zhì)疏松癥、卵巢上皮癌和多發(fā)性瘤。DKK-1對腫瘤的骨轉(zhuǎn)移有促進(jìn)作用,這與DKK-1能導(dǎo)致骨吸收,YZ骨形成的作用相一致。產(chǎn)品優(yōu)勢:用于人血清樣本檢測樣本量小,只需20ul檢測范圍寬夾心法檢測操作時(shí)間短參考文獻(xiàn):TheroleofDickkopf-1inbonedevelopment,homeostasis,anddisease.PinzoneJJetal.,Blood,2009;113:517-525.ElevatedSerumDickopf-1LevelsIncreaseRiskofHipandVertebralFractureinOlderCaucasianWomen.ArasuAetal.,EndocrRev,2013;34:SAT-224.ComparativeEffectofZoledronicAcidVersusDenosumabonSerumSclerostinandDickkopf-1LevelsofNaivePostmenopausalWomenWithLowBoneMass:ARandomized,Head-to-HeadClinicalTrial.AnastasilakisADetal.,JClinEndocrinolMetab,2013;98:3206-3212.[詳細(xì)]
-
2018-10-31 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
CA211 ELISA試劑盒說明書
- CA211ELISA試劑盒介紹:CYFRA21-1腫瘤標(biāo)志物酶聯(lián)免疫吸附試劑為量化測定血清和肝素化血漿內(nèi)的CYFRA21-1的含量提供了工具。該試劑只可作為體外診斷之用。CYFRA21-1是細(xì)胞角蛋白19的一個(gè)片斷。盡管在身體各個(gè)細(xì)胞內(nèi)均由表達(dá),但在肺組織中的表達(dá)尤其突出,特別是肺癌組織中。CYFRA21-1作為腫瘤標(biāo)志物在診斷中的重要性主要表現(xiàn)在對非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)病人的鑒別診斷,預(yù)后及術(shù)后評價(jià)。另外也有報(bào)道作為腫瘤標(biāo)志物的CYFRA21-1亦可用于對膀胱癌的監(jiān)測。CYFRA21-1腫瘤標(biāo)志物酶聯(lián)免疫試劑使用的是KS19.1和BM19.21雙鼠單克隆抗體,以確定細(xì)胞角蛋白19片斷。網(wǎng)址:286595[詳細(xì)]
-
2018-10-31 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
CA724 ELISA試劑盒說明書
- CA724ELISA試劑盒介紹:CA72-4癌抗原標(biāo)志物酶聯(lián)免疫吸附試劑(EIA-5071)為量化測定血清和血漿內(nèi)的CA72-4(TAG-72)的含量提供了工具。該試劑只可作為體外診斷之用。CA72-4為一48kD的糖蛋白。報(bào)道表明,在多種惡性腫瘤疾病中(包括癌,胃癌,膽囊癌,直腸癌,乳腺癌,卵巢癌,宮頸癌等)發(fā)現(xiàn)CA72-4的血清和血漿水平均有升高。盡管在一些良性疾患中如風(fēng)濕病或卵巢囊腫中CA72-4的血清和血漿水平也有升高,但在消化道和卵巢腫瘤病患中具有診斷意義上的腫瘤標(biāo)志物作用(95%可信度)。CA72-4在血中的水平與腫瘤的分期和大小有很好的相關(guān)性。在對消化道癌病患的治LX果監(jiān)測和隨訪中,CA72-4是一個(gè)可供選擇的檢測指標(biāo)(其他可供選擇的指標(biāo)還包括CA19-9或CEA)。另外,CA72-4也經(jīng)常被獨(dú)立用于對卵巢癌病患的治LX果監(jiān)測和隨訪過程中,特別是對于CA125水平并沒有升高的女性病例具有非常意義的腫瘤標(biāo)志作用。網(wǎng)址:286595[詳細(xì)]
-
2018-10-31 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
CA242 ELISA試劑盒說明書
- CA242ELISA試劑盒介紹:我公司其它腫瘤標(biāo)志物相關(guān)產(chǎn)品,已有產(chǎn)品包括:中文名稱英文名稱針對疾病糖類抗原19-9試劑盒CA19-9ELISAKit癌糖類抗原242試劑盒CA242ELISAKit癌、結(jié)直腸癌糖類抗原15-3試劑盒CA15-3ELISAKit乳腺癌糖類抗原125試劑盒CA125ELISAKit卵巢癌人附睪分泌蛋白4試劑盒HE4ELISAKit卵巢癌鱗狀細(xì)胞癌抗原試劑盒SCCELISAKit宮頸鱗癌、肺鱗癌、食管鱗癌神經(jīng)元烯醇化酶試劑盒NSEELISAKit肺癌胃泌素釋放肽前體試劑盒ProGRPELISAKit小細(xì)胞肺癌細(xì)胞角蛋白19試劑盒Cyfra21-1ELISAKit非小細(xì)胞肺癌癌胚抗原試劑盒CEAELISAKit結(jié)直腸癌、其他惡性腫瘤甲胎蛋試劑盒AFPELISAKit肝癌前列腺特異性抗體試劑盒PSAELISAKit前列腺癌游離前列腺特異性抗原試劑盒f-PSAELISAKit前列腺癌CA724ELISAKitCA50ELISAKitTPAELISAKitTPSELISAKit如需了解更多資料,請聯(lián)系北京科瑞美公司。[詳細(xì)]
-
2018-10-31 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
CA199 ELISA試劑盒說明書
- CA199ELISA試劑盒說明書:人血清消化道癌抗原(CA19-9)酶標(biāo)定量試劑盒采用酶聯(lián)免疫測定(ELISA)技術(shù),定量測定患者的血清中CA19-9濃度,本試劑盒主要用于:消化道癌早期診斷、癌細(xì)胞與非癌細(xì)胞的鑒別,淋巴結(jié)細(xì)胞轉(zhuǎn)移程度的判斷,可與生物素技術(shù)FAP、APAAP法選擇搭配使用。體液檢測,用于胃癌及其他消化道腫癌高危人群的篩選檢查、提高消化道腫瘤的早期檢出率。胃癌和其他消化道癌的臨床ZL的監(jiān)測和LX評價(jià)。一組粘液型糖蛋白SialosyiLewis抗原(SLA),例如CA19-9、CA19-5,已作為消化道癌循環(huán)腫瘤相關(guān)抗原得到人們的認(rèn)可。CA19-9代表了Z重要的和基本的碳水化合腫瘤標(biāo)志物。組織中的CA19-9的免疫組化分布與癌組織中的CA19-9濃度一致。而后者的濃度則高于正常組織或發(fā)炎的組織。Z近的報(bào)告表明,受試者血清CA19-9水平頻繁升高會患有不同的消化道惡性腫瘤,例如癌、結(jié)腸直腸癌、胃癌、肝癌。與CEA一同檢測時(shí),CA19-9升高提示設(shè)定為膽囊炎的患者為膽囊腫瘤。該腫瘤相關(guān)抗原也會在某些非惡性腫瘤的條件下升高。研究證明,CA19-9濃度值的檢測對上述已診斷為惡性腫瘤患者ZL的監(jiān)控是很有用處的。已經(jīng)表明血清CA19-9值隨著ZL而持續(xù)上升,表明腫瘤有隱性的轉(zhuǎn)移或仍有腫瘤殘余。血清CA19-9值持上升可能與進(jìn)行性惡性腫瘤和或?qū)Σ涣嫉寞煼ǖ膽?yīng)答。下降的CA19-9值表明有利的預(yù)后和對ZL的良好的應(yīng)答。網(wǎng)址:286595[詳細(xì)]
-
2018-10-31 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
CA153 ELISA試劑盒說明書
- CA153ELISA試劑盒介紹:乳腺癌特異性抗原(CA15-3)酶標(biāo)定量試劑盒,利用酶聯(lián)免疫測定(ELISA)方法,定量測定患者血清的CA15-3濃度,用于乳腺癌患者的篩檢、診斷、ZL中的監(jiān)測和預(yù)后的評價(jià)。乳腺癌是今天許多發(fā)達(dá)國家的婦女中常見的對生命Z具有威脅性的惡性腫瘤,大約每年有18萬新病例被診斷出來。這些新患者約一半為陰性結(jié)節(jié),然而其中30%發(fā)展成轉(zhuǎn)移性癌。有一些腫瘤標(biāo)志物可以幫助醫(yī)生鑒別和診斷乳腺癌患者。這些標(biāo)志物包括:雌激素和孕酮受體,DNA倍體,S期分項(xiàng)百分比,表皮生長因子受體,HER-2/neu致癌基因,P53抑癌基因,組織蛋白酶D,增生標(biāo)志物和CA15-3。CA15-3對于患者手術(shù)后復(fù)發(fā)的監(jiān)控,特別是癌轉(zhuǎn)移Z為有效。96%局部的和系統(tǒng)性復(fù)發(fā)患者CA15-3升高,可以比放射學(xué)方法和臨床標(biāo)準(zhǔn)提早預(yù)報(bào)轉(zhuǎn)移。血清CA15-3升高,有25%與腫瘤進(jìn)展有關(guān);CA15-3降低,有50%與對ZL的應(yīng)答相關(guān)。在乳腺癌復(fù)發(fā)的檢查方面,CA15-3比CEA更靈敏。在卵巢癌的復(fù)發(fā)的早期檢查方面,CA15-3與CA125聯(lián)合應(yīng)用已顯示出更加有效。網(wǎng)址:286595[詳細(xì)]
-
2018-10-31 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
CA125 ELISA試劑盒說明書
- 一.卵巢癌抗原(CA-125)ELISA試劑盒介紹:人血清卵巢癌抗原CA125酶標(biāo)定量試劑盒利用酶聯(lián)免疫測定(ELISA)方法,定量地測定患者的CA125血清濃度,用于卵巢癌患者的篩查、診斷、ZL中的監(jiān)測和預(yù)后的評價(jià)。癌抗原CA125與卵巢上皮癌有關(guān)。在血清中,CA125與高分子量的糖蛋白相聯(lián)系。已發(fā)表的研究結(jié)果表明,在血清CA125水平升高的個(gè)體中可發(fā)現(xiàn)具有嚴(yán)重的子宮內(nèi)膜癌,clear-cell和未分化的卵巢癌。血清CA125濃度>35U/mL,60%的婦女患有卵巢癌,而且80%以上的患者有潛在的卵巢癌。正常、健康的婦女,其血清CA125上升1%,其中3%患有良性卵巢疾病,有6%具有非瘤形成的條件(不包括**個(gè)三個(gè)月的孕期,行經(jīng)期、子宮內(nèi)膜異位癥,子宮纖維化病、急性輸卵管炎、肝病、腹膜炎、心包炎或胸膜炎)。血清CA125及骨盆檢查的連續(xù)檢測可以增加檢查的特異性。CA125濃度的檢測在對ZL的監(jiān)控和區(qū)分對ZL的良性反應(yīng)和不良療法引起的進(jìn)行性惡化是有益的。到現(xiàn)在為止,CA125是殘余的卵巢上皮癌Z靈敏的方法?;加蟹伟?、子宮頸癌、輸卵管癌、子宮癌和子宮內(nèi)膜異位癥的病人也會有CA125升高的情況。網(wǎng)址:286595[詳細(xì)]
-
2018-10-31 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
伏馬毒素ELISA試劑盒說明書
- 本試劑盒僅供研究使用。伏馬毒素ELISA試劑盒使用目的:本試劑盒用于飼料、魚、蝦和肉類組織(如雞、牛肉和豬肉),雞蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿樣中伏馬毒素(FB1)殘留的定量檢測。伏馬毒素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒采用競爭ELISA方法,在微孔板包被有伏馬毒素(FB1)偶聯(lián)抗原,加入伏馬毒素(FB1)標(biāo)準(zhǔn)品或樣品,游離伏馬毒素(FB1)與微孔條上預(yù)包被的伏馬毒素(FB1)偶聯(lián)抗原互相競爭抗伏馬毒素(FB1)抗體酶標(biāo)記物,用TMB底物顯色,加入終止液后顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色,用酶標(biāo)儀在450nm波長下進(jìn)行檢測,吸光值與樣品中伏馬毒素(FB1)含量成反比,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中伏馬毒素(FB1)的含量。伏馬毒素ELISA試劑盒組成預(yù)包被的伏馬毒素(FB1)偶聯(lián)抗原的可拆酶標(biāo)板:1塊(12孔×8條)。伏馬毒素(FB1)標(biāo)準(zhǔn)品:6瓶(1ml/瓶),含量分別是:0ppb,0.1ppb,0.3ppb,0.9ppb,2.7ppb,8.1ppb??狗R毒素(FB1)抗體酶結(jié)合物:1瓶(6ml)。顯色液A:1瓶(6ml)。顯色液B:1瓶(6ml)。終止液:1瓶(6ml),2M硫酸。樣本稀釋液:1瓶(10×,6ml),用于樣品稀釋用。濃縮洗滌液:1瓶(20×,20ml),用于洗板。說明書一份。伏馬毒素ELISA試劑盒貯存:1.試劑盒貯存于2~8℃,切勿冷凍2.未用完的微孔板應(yīng)該密封干燥保存伏馬毒素ELISA試劑盒注意事項(xiàng)1.使用試劑盒前請仔細(xì)閱讀說明書。2.不要使用過期試劑盒。3.試劑盒使用前,將試劑恢復(fù)至室溫(25±2℃),建議至少回溫2小時(shí)。4.標(biāo)準(zhǔn)品中含有伏馬毒素(FB1),使用時(shí)應(yīng)特別注意,操作時(shí)應(yīng)帶手套。5.終止液中含有硫酸,使用時(shí)防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。6.不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不能混用,否則會影響試驗(yàn)結(jié)果。7.不同批號試劑盒中的試劑不得混用;不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不得混用,否則會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。8.稀釋樣本時(shí)必須用本試劑盒中的樣本稀釋液,否則會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果9.混合試劑時(shí)應(yīng)避免起泡。伏馬毒素ELISA試劑盒工作液準(zhǔn)備伏馬毒素(FB1)標(biāo)準(zhǔn)品溶液:0ppb,0.1ppb,0.3ppb,0.9ppb,2.7ppb,8.1ppb濃縮洗滌液:用蒸餾水按1:20(1+19)稀釋備用樣本稀釋液:備用顯色劑:已備用,避免光線直照反應(yīng)終止液:已備用伏馬毒素ELISA試劑盒樣品處理:取10g粉碎的樣品,加20ml70%甲醇溶液QL振蕩3分鐘用WhatmanNo1濾紙過濾取25μl處理后的樣品,加入25μl樣本稀釋液于反應(yīng)孔中(樣本稀釋倍數(shù)為2)伏馬毒素ELISA試劑盒結(jié)果計(jì)算定量分析:所獲得的每個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣本吸光度值的平均值(B)除以**個(gè)標(biāo)準(zhǔn)(0標(biāo)準(zhǔn))的吸光度值(B0)再乘以1**%,即百分吸光度值。B標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值B00μg/L標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值以伏馬毒素(FB1)濃度的對數(shù)值為X軸,百分吸光度值為Y軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。根據(jù)樣品百分吸光度值,可從曲線上得到對應(yīng)點(diǎn)的橫坐標(biāo),即為伏馬毒素(FB1)濃度的對數(shù)值,求得反對數(shù)即為測定液中伏馬毒素(FB1)濃度C(ppb)由于樣品經(jīng)過了預(yù)先稀釋,因此根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線所得出的樣品濃度一定要再乘以其稀釋倍數(shù)。半定量測定:目測半定量測定:首先選擇一個(gè)適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)液與樣品同運(yùn)行,根據(jù)樣品與標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值的高低比較,判斷樣品濃度值是小于還是大于標(biāo)準(zhǔn)值。儀器半定量測定:首先選擇一個(gè)適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)液與樣品同運(yùn)行,根據(jù)樣品與標(biāo)準(zhǔn)品顏色深淺比較,判斷樣品濃度值是小于還是大于標(biāo)準(zhǔn)值。[詳細(xì)]
-
2018-11-16 10:02
產(chǎn)品樣冊
-
PSA ELISA試劑盒說明書
- 一.PSAELISA試劑盒介紹:前列腺特異性抗原(PSA)酶標(biāo)定量試劑盒利用酶聯(lián)免疫(ELISA)測定手段,定量地測定患者的PSA血清濃度,用于前列腺癌患者的篩查,診斷、ZL中的監(jiān)測和預(yù)后的評價(jià)。二、試劑盒的組成1.96孔抗體包被板:1塊;2.酶結(jié)合物:12mL,1瓶;3.PSA零緩沖液:1瓶,7mL;4.TMB試劑(一步):1lmL;5.參照標(biāo)準(zhǔn)品:0,2,4,15,60,120ng/mL;6.終止液1NHCL:11mL;7.洗滌濃縮液(20X):50mL,1瓶。網(wǎng)址:286595[詳細(xì)]
-
2024-09-30 18:30
產(chǎn)品樣冊
-
Elisa試劑盒:人D-乳酸鹽Elisa試劑盒說明書
- Elisa試劑盒:人D-乳酸鹽Elisa試劑盒說明書人血清,血漿,細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中D-乳酸鹽(D-lactate)的含量。Elisa試劑盒:人D-乳酸鹽Elisa試劑盒說明書用純化的D-乳酸鹽(D-lactate)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入D-乳酸鹽(D-lactate),再與HRP標(biāo)記的D-乳酸鹽(D-lactate)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。Elisa試劑盒:人D-乳酸鹽Elisa試劑盒說明書濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存Elisa試劑盒:人D-乳酸鹽Elisa試劑盒說明書人D-乳酸鹽(D-lactate)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿,細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中D-乳酸鹽(D-lactate)的含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人D-乳酸鹽(D-lactate)水平。用純化的D-乳酸鹽(D-lactate)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入D-乳酸鹽(D-lactate),再與HRP標(biāo)記的D-乳酸鹽(D-lactate)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的D-乳酸鹽(D-lactate)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人D-乳酸鹽(D-lactate)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:450ng/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為300ng/ml,200ng/ml,100ng/ml,50ng/ml,25ng/ml)。加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng):試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.92以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和15%檢測范圍:8ng/ml-400ng/ml保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
-
2018-10-23 10:31
產(chǎn)品樣冊
-
中英文Elisa試劑盒,干擾素(IFN-α)Elisa試劑盒雞Elisa試劑盒試劑盒使用說明書
- 雞α干擾素(IFN-α)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定雞血清,血漿及相關(guān)液體樣本中α干擾素(IFN-α)的含量。代做ELISA試劑盒,代測elisa試劑盒,上海廣銳生物科技有限公司實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中雞α干擾素(IFN-α)水平。用純化的雞α干擾素(IFN-α)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入α干擾素(IFN-α),再與HRP標(biāo)記的羊抗雞抗體體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的α干擾素(IFN-α)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中雞α干擾素(IFN-α)含量。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:54ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為30ng/L,20ng/L,10ng/L,5ng/L,2.5ng/L)。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng):1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%檢測范圍:2ng/L-40ng/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
-
2018-10-23 10:31
產(chǎn)品樣冊
-
兔子白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒elisa試劑盒說明書
- 兔子白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒elisa試劑盒說明書[詳細(xì)]
-
2024-10-08 05:27
操作手冊
-
人激肽釋放酶ELISA試劑盒說明書
- 人激肽釋放酶ELISA試劑盒說明書[詳細(xì)]
-
2016-03-18 00:00
報(bào)價(jià)單
-
雞ELISA 檢測試劑盒說明書
- 雞ELISA 檢測試劑盒說明書[詳細(xì)]
-
2016-03-16 00:00
其它
-
小鼠Ghrelin ELISA試劑盒說明書
- 小鼠GhrelinELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗小鼠Ghrelin單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的Ghrelin與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗小鼠Ghrelin,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,Ghrelin濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中Ghrelin濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):10ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時(shí);更長時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清可能需要稀釋,請先做預(yù)實(shí)驗(yàn),以確定稀釋倍數(shù)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成10ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入10ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)Ghrelin含量,再乘上稀釋倍數(shù)。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的Ghrelin檢測濃度小于10pg/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測重組或天然的小鼠Ghrelin。不與小鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
-
2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
大鼠C-Fos ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠C-FosELISA試劑盒原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠C-Fos單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的C-Fos與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠C-Fos,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,C-Fos濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中C-Fos濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):1.6ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、尿液等盡早檢測,2-8℃保存48小時(shí);更長時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.4ml蒸餾水混勻,配成4000pg/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,每管加入標(biāo)本稀釋液200ul。在**管中加入4000pg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液200ul混勻后用加樣器吸出200ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出200ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)標(biāo)本激活方法1.將450ul標(biāo)本稀釋液加入到一支1.5ml進(jìn)口聚丙烯管中,再加10ul血清或血漿標(biāo)本。2.加20ul1NHCI,蓋緊,上下混勻。2-8℃放置60±2分鐘。3.加20ul1NNaOH,蓋緊,上下混勻。4.即用,或放-20/-70℃保存3天。計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以稀釋倍數(shù)50。(注意:不同的標(biāo)本C-Fos的水平可能有較大差異,請根據(jù)實(shí)際情況靈活掌握稀釋度)5.細(xì)胞培養(yǎng)上清或組織勻漿10倍稀釋(410ul的標(biāo)本稀釋液+50ul樣本+20ul的1NHCI+20ul的1NNaOH)。檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品(已激活)100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)C-Fos含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的C-Fos檢測濃度小于15pg/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測重組或天然的大鼠C-Fos。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于8.9%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
-
2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
Copyright 2004-2026 yiqi.com All Rights Reserved , 未經(jīng)書面授權(quán) , 頁面內(nèi)容不得以任何形式進(jìn)行復(fù)制
參與評論
登錄后參與評論