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培養(yǎng)基的制備及滅菌
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培養(yǎng)基的制備及滅菌
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培養(yǎng)基的制備及滅菌- 培養(yǎng)基的制備及滅菌[詳細]
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2024-09-14 09:59
實驗操作
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- 培養(yǎng)基的滅菌及準備
- 培養(yǎng)基的滅菌及準備B．1大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA）培養(yǎng)基的滅菌及準備B．1.1培養(yǎng)基采用大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基，可以按以下制備，也可使用按該生產的符合要求的脫水培養(yǎng)基。配制后按培養(yǎng)基規(guī)定的經驗證合格的滅菌程序滅菌。B．1.2大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基配方酪蛋白胰酶消化物…………………………………………………………………15g大豆粉木瓜蛋白酶消化物…………………………………………………………5g氯化鈉………………………………………………………………………………5g瓊脂…………………………………………………………………………………15g純化水……………………………………………………………………………1000mL取上述成分除瓊脂，混合，微熱溶解，調節(jié)pH值使滅菌后為7.3±0.2，加入瓊脂，加熱融化后，分裝，滅菌，冷卻至約60℃，在無菌操作要求下傾注約20mL至無菌平皿（φ90mm1））中。加蓋后在室溫放至凝固。B．2沙氏瓊脂培養(yǎng)基（SDA）培養(yǎng)基的滅菌及準備葡萄糖………………………………………………………………………………40g酪蛋白胰酶消化物、動物組織的胃酶消化物等量混合…………………………10g瓊脂…………………………………………………………………………………15g純化水……………………………………………………………………………1000mL取上述成分除瓊脂，混合，微熱溶解，調節(jié)pH值使滅菌后為5.6±0.2，加入瓊脂，加熱融化后，分裝，滅菌，冷卻至約60℃，在無菌操作要求下傾注約20mL至無菌平皿（φ90mm1））中。加蓋后在室溫放至凝固。B．3培養(yǎng)基平皿培養(yǎng)及保存制備好的培養(yǎng)基平皿宜在2℃~8℃保存，一般以一周為宜或按廠商提供的標準執(zhí)行。采用適宜方法在平皿上做好培養(yǎng)基的名稱、制備日期記錄的標記。1）如果用其他規(guī)格的平皿，可適當增減培養(yǎng)基的量，使之在平皿中形成至少2mm厚的瓊脂層。[詳細]
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2018-09-28 10:00
產品樣冊
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常用培養(yǎng)基制備、滅菌與消毒- 常用培養(yǎng)基制備、滅菌與消毒 制備、滅菌與消毒： 一、實驗目的 了解培養(yǎng)基的配制原理;掌握配制培養(yǎng)基的一般方法和步驟;了解常見滅菌、清毒基本原理及方法;掌握干熱天菌、高壓蒸汽滅菌及過濾CJ的操作方法?！ 《嶒炘怼 ∨囵B(yǎng)基是人工按一定比例配制的供微生物生長繁殖和合成代謝產物所需要的營養(yǎng)物質的混合物。培養(yǎng)基的原材料可分為碳源、氮源、無機鹽、生長因素和水。根據微生物的種類和實驗目的不同，培養(yǎng)基也有不同的種類和配制方法?！ ∨Ｈ飧嗟鞍纂伺囵B(yǎng)基是一種應用Z廣泛和Z普通的細菌基礎培養(yǎng)基，有時又稱為普通培養(yǎng)基。由于這種培養(yǎng)基中含有一般細胞生長繁殖所需要的Z基本的營養(yǎng)物質，所以可供微生物生長繁殖之用?！ 「蔁崽炀⒏邏赫羝麥缇椒ㄖ饕峭ㄟ^升溫使蛋白質變性從而達到殺死微生物的效果?！ ∪⒃噭┡c器材 1.器材 試管、三角瓶、燒杯、量筒、玻璃棒、培養(yǎng)基、分裝器、天平、牛角匙、高壓蒸汽滅菌鍋、pH度紙、棉花、牛皮紙、記號筆、麻繩、紗布、吸管、培養(yǎng)皿、電烘箱、注射器、微孔濾膜過濾器、鑷子等?！ ?.試劑牛肉膏、蛋白胨、NaCl、瓊脂 四、實驗內容 1.稱量→溶化→調pH→過濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無菌檢查 2.干熱滅菌：裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物 3.高壓蒸汽滅菌：加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無菌檢查 4.過濾CJ：組裝滅菌→連接→壓濾→無菌檢查→清洗滅菌 五、關鍵步驟及注意事項 1.要嚴格按配方配制?！ ?.調pH不要過頭?！ ?.干熱滅菌要注意物品不要堆放過緊，注意溫度的時間控制，70C以下放物、取物?！ ?.高壓滅菌要注意物品不要過多，加熱后排除冷空氣，到時降壓回零取物?！ ?.過濾CJ要注意各部件滅菌，壓濾時，壓力要適當，不可太猛太快，濾膜要注意清洗保存。[詳細]
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2018-09-27 10:00
產品樣冊
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- 制備培養(yǎng)基的小技巧
- 制備培養(yǎng)基的小技巧1.培養(yǎng)基可按制備也可使用按生產的符合規(guī)定的商品化成品培養(yǎng)基，脫水培養(yǎng)基除附有和使用說明外還應注明有效期、貯存條件、適用性試驗的質控菌株和用途。配制時應按使用說明上的要求操作，受潮結塊不能使用，以確保培養(yǎng)基的質量符合要求。2.配制培養(yǎng)基使用的容器應是玻璃器皿或搪瓷器皿如搪瓷筒、量筒、漏斗、三角燒瓶、刻度吸管、試管、培養(yǎng)皿等。使用的器皿應洗凈，用蒸餾水沖凈，烘干后方可使用。禁用金屬容器如鐵、銅、鋁容器，避免金屬離子與培養(yǎng)基成分結合，生成有害物質，影響細菌生長。3.培養(yǎng)基若于非潔凈的玻璃器皿中制備，可能導致YJ物質進入培養(yǎng)基中。YJ物質可能是殘留的玻璃器皿清潔用的清潔劑或之前玻璃器皿所盛裝的物質。因此。應使用純化水完全沖洗玻璃器皿以消除清潔劑和外來物質的殘留，并進行清除污物的確認。4.配制培養(yǎng)基Z常用的溶劑是純化水，特殊情況下需要用去離子水和蒸餾水，對熱敏感的培養(yǎng)基應用滅菌水和無菌容器配制與分裝，配制時若需加熱助溶應注意溫度不要過高。5.對配制培養(yǎng)基的過程作詳細的記錄，記錄內容包括：配制日期、培養(yǎng)基名稱、成分、配制數量、質量監(jiān)控結果等進行全面詳細記錄。友情推薦：上海勁馬實驗設備有限公司上海恒遠生物科技有限公司[詳細]
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2018-11-18 10:00
產品樣冊
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- 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的滅菌八步驟
- 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的滅菌八步驟[詳細]
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2015-04-29 00:00
操作手冊
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Masterclave——培養(yǎng)基自動制備儀- Masterclave——培養(yǎng)基自動制備儀[詳細]
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2016-06-03 00:00
標準
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- 實驗室自己動手制備培養(yǎng)基的方法要求
- 實驗室自己動手制備培養(yǎng)基的方法要求[詳細]
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2015-06-04 00:00
安裝說明
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- 全自動培養(yǎng)基制備儀產品樣冊
- 全自動培養(yǎng)基制備儀產品樣冊[詳細]
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2016-10-20 09:17
課件
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- 超贊超全的培養(yǎng)基制備流程在這里
- 培養(yǎng)基是我公司的主要產品線之一，在前面的技術分享內容中，相關培養(yǎng)基的制備方法、要求、保存、種類等也為大家介紹過不少。在今天的內容中，上海滬鼎生物公司為您帶來了Zxin的培養(yǎng)基制備流程，可以表示為：稱量藥品→溶解→調節(jié)PH值→溶化瓊脂→過濾分裝→包扎標記→滅菌→擺斜面或倒平板。超贊超全的培養(yǎng)基制備流程在這里！1.稱量藥品：根據培養(yǎng)基配方依次準確稱取各種藥品，放入適當大小的燒杯中，瓊脂不要加入。蛋白胨極易吸潮，故稱量時要迅速。2.溶解：用量筒取一定量(約占總量的1/2)蒸餾水倒入盛有藥品的燒杯中，在放有石棉網的電爐上小火加熱，并用玻璃棒攪拌，以防液體溢出。待各種藥品完全溶解后，停止加熱，補足水分。如果配方中有淀粉，則先將淀粉用少量冷水調成糊狀，并在火上加熱攪拌，然后加足水分及其他原料，待完全溶化后，補足水分。3.調節(jié)PH值：根據培養(yǎng)基對PH值的要求，用50g/LNaOH或5%(體積分數)HCl溶液調至所需的PH值。測定PH值可用PH試紙或酸度計等。4.溶化瓊脂：固體或半固體培養(yǎng)基須加入一定量的瓊脂，將盛有培養(yǎng)基的器皿置于電爐上一面攪拌一面加熱，直至瓊脂完全溶化后才能停止攪拌，并補足水分(水需預熱)。注意控制火力不要使培養(yǎng)基溢出或燒焦。5.過濾分裝：先將過濾分裝裝置安裝好。如果是液體培養(yǎng)基，玻璃漏斗中放一層濾紙；如果是固體或半固體培養(yǎng)基，則須在漏斗中放多層紗布，或兩層紗布夾一層薄薄的脫脂棉趁熱進行過濾。過濾后立即進行分裝。分裝時注意不要使培養(yǎng)基沾染在瓶口或管口，以免浸濕棉塞，引起污染。液體分裝高度以試管高度的1/4左右為宜。固體分裝量為管高的1/5，半固體分裝量一般以試管高度的1/3為宜，分裝三角瓶，以不超過三角瓶容積的一半為宜。6.包扎標記：培養(yǎng)基分裝后加好棉塞或試管帽，再包上一層防潮紙，用棉繩系好。在包裝紙上標明培養(yǎng)基名稱、制備組別和實驗者姓名、日期等。7.滅菌：上述培養(yǎng)基應按培養(yǎng)基配方中規(guī)定的條件及時進行滅菌。普通培養(yǎng)基為121℃，20min，以保證滅菌效果和不損傷培養(yǎng)基的有效成分。如需要作斜面固體培養(yǎng)基，則滅菌后立即擺放成斜面。斜面長度一般以不超過試管長度的1/2為宜；半固體培養(yǎng)基滅菌后，垂直冷凝成半固體深層瓊脂。[詳細]
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2018-11-18 10:00
產品樣冊
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- 德國Systec全自動培養(yǎng)基制備分裝系統
- 德國Systec全自動培養(yǎng)基制備分裝系統[詳細]
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2014-01-10 00:00
實驗操作
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- 樣品的采取及制備
- 樣品的采取及制備[詳細]
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2007-01-14 00:00
期刊論文
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- 高壓滅菌器做九管法滅菌時如何避免氣泡殘留在培養(yǎng)基
- 大腸菌群細菌多存在于溫血動物糞便、人類經?；顒拥膱鏊约坝屑S便污染的地方，人、畜糞便對外界環(huán)境的污染是大腸菌群在自然界存在的主要原因。大腸菌群是評價食品衛(wèi)生質量的重要指標之一。而檢測食品中大腸菌群的方法中，國內采用的進出口食品大腸菌群檢測方法主要有國家標準，國家標準的三步九管法，即乳糖發(fā)酵試驗、分離培養(yǎng)、證實試驗。由于大腸菌群指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關的細菌，即：需氧及兼性厭氧、在37℃能分解乳糖產酸產氣的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。因此大腸菌群的檢測一般都是按照它的定義進行。1.乳糖發(fā)酵試驗：樣品稀釋后，選擇三個稀釋度，每個稀釋度接種三管乳糖膽鹽發(fā)酵管。36±1℃培養(yǎng)48±2h，觀察是否產氣。2.分離培養(yǎng)：將產氣發(fā)酵管培養(yǎng)物轉種于伊紅美藍瓊脂平板上，36±1℃培養(yǎng)18-24h，觀察菌落形態(tài)。3.證實試驗：挑取平板上的可疑菌落，進行革蘭氏染色觀察。同時接種乳糖發(fā)酵管36±1℃培養(yǎng)24±2h，觀察產氣情況。在乳糖發(fā)酵試驗工作中，經?？梢钥吹皆诎l(fā)酵倒管內極微少的氣泡（有時比小米粒還?。?，有時可以遇到在初發(fā)酵時產酸或沿管壁有緩緩上浮的小氣泡。實驗表明大腸菌群的產氣量，多者可以使發(fā)酵倒管全部充滿氣體，少者可以產生比小米粒還小的氣泡。在試驗過程中，會用到高壓滅菌器來進行滅菌，九管法滅菌時，大腸菌在高溫下會產生氣泡，如果用的是ALP高壓力滅菌鍋，可以通過進入工程師菜單，調整在升溫過程中的排氣時間，可以有效的排走殘留在培養(yǎng)基中的氣泡。[詳細]
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2024-09-11 19:53
產品樣冊
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- 德國Systec全自動培養(yǎng)基制備分裝系統產品樣冊
- 德國Systec全自動培養(yǎng)基制備分裝系統產品樣冊[詳細]
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2016-10-20 10:18
標準
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- 德國systec培養(yǎng)基自動制備分裝系統產品樣冊
- 德國systec培養(yǎng)基自動制備分裝系統產品樣冊[詳細]
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2024-09-14 04:14
實驗操作
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- 金屬分離柱的制備及應用
- 金屬分離柱的制備及應用[詳細]
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2012-02-07 00:00
實驗操作
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- 銅及銅合金的金相制備
- 銅及銅合金的金相制備[詳細]
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2008-08-19 00:00
期刊論文
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- 超純水機的制備工藝及使用說明
- 超純水機的制備工藝及使用說明[詳細]
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2012-06-28 00:00
標準
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- 鋁及鋁合金的金相制備
- 鋁及鋁合金的金相制備[詳細]
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2024-09-28 17:30
課件
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- 免疫核糖核酸的制備及檢定
- 免疫核糖核酸的制備及檢定[詳細]
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2024-09-28 07:01
產品樣冊
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- 抗體催化的化學反應及制備
- 抗體催化的化學反應：由抗體催化的化學反應特異性高于酶，但催化速率低于常規(guī)的酶，只有l(wèi)010倍。但有一些未發(fā)現催化劑的反應，如DielsAlder反應也能被抗體催化。常規(guī)酶一般不能催化胺鍵水解，抗體酶能使胺鍵水解的速度增加25萬倍。訖今為止，已發(fā)現和證明的由抗體催化的化學反應不下40種?！ 】贵w催化的制備：抗體酶是抗原決定簇處于轉換態(tài)結構的抗體。因為轉換態(tài)分子極不穩(wěn)定無法制備抗體，所以催化性抗體的獲得主要是通過設計穩(wěn)定的轉換態(tài)的類似物作為半抗原，與載體蛋白交聯后，免疫動物，獲得針對半抗原的抗體，從中篩選具有催化活性的抗體。篩選催化性單克隆抗體所用的ELISA與篩選一般抗體的方法不完全一樣，應根據催化反應的特點而進行適當的修改。經典的方法是先篩選出與底物或半抗原結合的抗體，然后從中再篩選出有催化活力的抗體，這種方法費時費力。利用催化性抗體對底物的催化活性，對底物進行適當修飾，使催化反應的產物可直接表現抗體的催化活性，這樣可以簡化檢測步驟?！ ∞D換態(tài)類似物半抗原的設計，必須了解催化反應的轉換態(tài)模型的結構特點。催化抗體的抗原結合位點上與轉換態(tài)互補的某些催化基團的形成，能穩(wěn)定轉換態(tài)分子。此外有人把單克隆抗體分子用化學修飾方法引入一些活性基團，提高催化性抗體的催化與親和效率。應用噬菌體抗體文庫也可以篩選催化性抗體，可省去制備轉換態(tài)類似物的復雜過程，直接用底物從文庫中篩選有催化活性的抗體片段。如用半抗原免疫后制備的文庫或文庫經過多次混雜重組，則可以得到更高的親和力的催化性抗體?？躬毺匦涂贵w也用于催化性抗體的制備，用酶作為抗原免疫小鼠獲得能夠封閉酶活性位點的單克隆抗體，將這個抗體用蛋白酶除去Fc片段，用Fab免疫其他品系的小鼠或家兔，得到的抗體具有相應的酶催化活性。[詳細]
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2024-09-28 07:04
產品樣冊
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