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elisa細(xì)胞裂解的方法
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本文由 上海恒遠(yuǎn)ELISA試劑盒供應(yīng)商 整理匯編
2018-11-15 10:03 2310閱讀次數(shù)
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對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:1.融解RIPA裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF,使PMSF的Z終濃度為1mM。2.對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血清中的蛋白沒(méi)有干擾,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞1-2秒后,細(xì)胞就會(huì)被裂解。對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成50-100萬(wàn)細(xì)胞/管,然后再裂解。3.充分裂解后,10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。裂解液用量說(shuō)明:通常6孔板每孔細(xì)胞加入150微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高可以適當(dāng)加大裂解液的用量到200微升或250微升。對(duì)于組織樣品:1.把組織剪切成細(xì)小的碎片。2.融解RIPA裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF,使PMSF的Z終濃度為1mM。3.按照每20毫克組織加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量。)4.用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。5.充分裂解后,10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。6.如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過(guò)強(qiáng)烈vortex使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。注:RIPA裂解液的裂解產(chǎn)物中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)一小團(tuán)透明膠狀物,屬正?,F(xiàn)象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復(fù)合物。在不檢測(cè)和基因組DNA結(jié)合特別緊密的蛋白的情況下,可以直接離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn);如果需要檢測(cè)和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白,則可以通過(guò)超聲處理打碎打散該透明膠狀物,隨后離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如果檢測(cè)一些常見(jiàn)的轉(zhuǎn)錄因子,例如NF-kappaB、p53等時(shí),通常不必進(jìn)行超聲處理,就可以檢測(cè)到這些轉(zhuǎn)錄因子。上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司主營(yíng)產(chǎn)品/服務(wù):ELISA試劑盒,免疫組化試劑盒,放免試劑盒,標(biāo)準(zhǔn)品,血清,抗體,培養(yǎng)基,細(xì)胞,生物試劑,實(shí)驗(yàn)耗材等服務(wù)承諾:1.所購(gòu)產(chǎn)品均質(zhì)量保證,有任何質(zhì)量方面的問(wèn)題,一律免費(fèi)包換!2.試劑盒方面全程提供技術(shù)指導(dǎo),還有免費(fèi)代測(cè)的服務(wù)!3.本公司出售的任何產(chǎn)品均提供完善的售后服務(wù),客戶有任何疑問(wèn),均是一個(gè)工作日,給出解決方案!歡迎聯(lián)系,聯(lián)系電話:021-60515410,18221290082!
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elisa細(xì)胞裂解的方法
- 對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:1.融解RIPA裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF,使PMSF的Z終濃度為1mM。2.對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血清中的蛋白沒(méi)有干擾,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞1-2秒后,細(xì)胞就會(huì)被裂解。對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成50-100萬(wàn)細(xì)胞/管,然后再裂解。3.充分裂解后,10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。裂解液用量說(shuō)明:通常6孔板每孔細(xì)胞加入150微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高可以適當(dāng)加大裂解液的用量到200微升或250微升。對(duì)于組織樣品:1.把組織剪切成細(xì)小的碎片。2.融解RIPA裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF,使PMSF的Z終濃度為1mM。3.按照每20毫克組織加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量。)4.用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。5.充分裂解后,10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。6.如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過(guò)強(qiáng)烈vortex使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。注:RIPA裂解液的裂解產(chǎn)物中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)一小團(tuán)透明膠狀物,屬正?,F(xiàn)象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復(fù)合物。在不檢測(cè)和基因組DNA結(jié)合特別緊密的蛋白的情況下,可以直接離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn);如果需要檢測(cè)和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白,則可以通過(guò)超聲處理打碎打散該透明膠狀物,隨后離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如果檢測(cè)一些常見(jiàn)的轉(zhuǎn)錄因子,例如NF-kappaB、p53等時(shí),通常不必進(jìn)行超聲處理,就可以檢測(cè)到這些轉(zhuǎn)錄因子。上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司主營(yíng)產(chǎn)品/服務(wù):ELISA試劑盒,免疫組化試劑盒,放免試劑盒,標(biāo)準(zhǔn)品,血清,抗體,培養(yǎng)基,細(xì)胞,生物試劑,實(shí)驗(yàn)耗材等服務(wù)承諾:1.所購(gòu)產(chǎn)品均質(zhì)量保證,有任何質(zhì)量方面的問(wèn)題,一律免費(fèi)包換!2.試劑盒方面全程提供技術(shù)指導(dǎo),還有免費(fèi)代測(cè)的服務(wù)!3.本公司出售的任何產(chǎn)品均提供完善的售后服務(wù),客戶有任何疑問(wèn),均是一個(gè)工作日,給出解決方案!歡迎聯(lián)系,聯(lián)系電話:021-60515410,18221290082![詳細(xì)]
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2018-11-15 10:03
產(chǎn)品樣冊(cè)
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裂解細(xì)胞
- 上海金穗生物公司是一家專業(yè)經(jīng)營(yíng)生物試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、試劑耗材的公司,生物引擎在廣大用戶的幫助和支持下,經(jīng)過(guò)不懈的努力,已成為國(guó)內(nèi)生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的主要供應(yīng)商之一,主要經(jīng)營(yíng)ELISA試劑盒、細(xì)胞、血清、抗體、金標(biāo)試劑盒、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗等產(chǎn)品,產(chǎn)品暢銷國(guó)內(nèi)大部分地區(qū),銷售額逐年穩(wěn)步提高。上海金穗生物公司擁有雄厚的實(shí)力、合理的價(jià)格和優(yōu)良的服務(wù),能夠及時(shí)解決和滿足客戶的各方面的需求,公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國(guó),在同行獲得一致好評(píng)。www.shjsbio.com[詳細(xì)]
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2018-10-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大腸桿菌裂解液細(xì)胞碎片清除
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2015-08-25 00:00
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Geno Grinder組織研磨器和細(xì)胞裂解器
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2023-11-08 11:18
產(chǎn)品樣冊(cè)
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基質(zhì)裂解素(ST3)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 基質(zhì)裂解素(ST3)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)本試劑僅供研究使用標(biāo)本:體液基質(zhì)裂解素(ST3)ELISA試劑盒試驗(yàn)原理:BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知BFGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將BFGF和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子ELISA檢測(cè)試劑盒洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系?;|(zhì)裂解素(ST3)ELISA試劑盒自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。2.實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項(xiàng)1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。9.按照中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋?xiě)?yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。9.在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。局限6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%?;|(zhì)裂解素(ST3)ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的BFGF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlCaN人鈣調(diào)磷酸酶規(guī)格:48T/96TCALD人鈣調(diào)結(jié)合蛋白規(guī)格:48T/96TCALD人鈣調(diào)結(jié)合蛋白規(guī)格:48T/96Thistatin5人富組蛋白規(guī)格:48T/96TPNP人副腫瘤性天皰瘡抗體規(guī)格:48T/96TRPA-70人復(fù)制蛋白A規(guī)格:48T/96TCPSA人復(fù)合前列腺特異性抗原規(guī)格:48T/96TBA人封閉抗體規(guī)格:48T/96TSLPI人分泌性白細(xì)胞蛋白酶YZ因子規(guī)格:48T/96TSIgA人分泌型免疫球蛋白A規(guī)格:48T/96TMP-Ab人肺炎支原體抗體規(guī)格:48T/96TCpn-Ab人肺炎衣原體抗體規(guī)格:48T/96TPARC/CCL18人肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子規(guī)格:48T/96TSP-D人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D規(guī)格:48T/96TSP-C人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C規(guī)格:48T/96TSP-B人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B規(guī)格:48T/96TSP-A人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A規(guī)格:48T/96T人肺癌標(biāo)志物ELISAKit,48T/96T人肺癌標(biāo)志物ELISAKit,48T/96T規(guī)格:48T/96TDR-70TM人肺癌標(biāo)志物DR-70規(guī)格:48T/96TLTA人非小細(xì)胞肺癌抗原規(guī)格:48T/96TNNE人非神經(jīng)元性烯醇化酶規(guī)格:48T/96TNON人非甲基化寡核苷酸規(guī)格:48T/96TAhR人芳香烴受體規(guī)格:48T/96TE1/UBAE人泛素激活酶規(guī)格:48T/96TUb人泛素蛋白規(guī)格:48T/96TrT3人反三碘甲狀腺原氨酸規(guī)格:48T/96T[詳細(xì)]
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2018-10-09 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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裂解進(jìn)樣裝置
- 裂解進(jìn)樣裝置[詳細(xì)]
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2024-09-18 18:10
安裝說(shuō)明
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使用高通量組織研磨機(jī)進(jìn)行細(xì)胞裂解從而從動(dòng)物組織中提取
- 使用高通量組織研磨機(jī)進(jìn)行細(xì)胞裂解從而從動(dòng)物組織中提取[詳細(xì)]
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2024-09-28 01:21
期刊論文
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高溫裂解器/裂解進(jìn)樣器產(chǎn)品樣冊(cè)
- 高溫裂解器/裂解進(jìn)樣器產(chǎn)品樣冊(cè)[詳細(xì)]
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2024-09-16 00:22
課件
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ELISA檢測(cè)試劑盒細(xì)胞瘤細(xì)胞SH-SY5Y的說(shuō)明書(shū)
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2018-09-19 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠ELISA試劑盒雜交瘤細(xì)胞ER細(xì)胞的說(shuō)明書(shū)
- 大鼠ELISA試劑盒細(xì)胞形態(tài)特征淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞生長(zhǎng)特性小鼠雜交瘤細(xì)胞ER細(xì)胞半貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞特種特性該雜交瘤細(xì)胞由公司制備并提交,細(xì)胞注射小鼠腹腔可產(chǎn)生高滴度的單抗,可用于基礎(chǔ)研究和臨床檢驗(yàn)。培養(yǎng)基血清細(xì)胞傳代方法1:3傳代,2-3天傳一代細(xì)胞傳代情況C10細(xì)胞凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS支原體檢測(cè)陰性A52825ETBR/EndothelinBReceptor內(nèi)皮素B受體抗體0.2mlA52826ETFB電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽/黃素蛋白抗體0.2mlA52827ET-3小鼠雜交瘤細(xì)胞ER細(xì)胞內(nèi)皮素3抗體0.2mlA52828Ets1/ETS-1Ets轉(zhuǎn)錄因子家族e(cuò)ts1抗體0.1mlA52829ETK/BMX非受體性蛋白酪氨酸激酶ETK抗體0.1mlA52830Phospho-BMX/ETK(Tyr40)磷酸化非受體性蛋白酪氨酸激酶ETK抗體0.1mlA52831Phospho-BMX/ETK(Tyr556)磷酸化非受體性蛋白酪氨酸激酶ETK抗體0.1mlA52832EMAP2內(nèi)皮單核細(xì)胞激活肽2抗體0.2mlA52833Eukaryoticaspartylprotease天冬氨酸蛋白酶家族蛋白抗體1mlA52834EV71polyproteinVP4腸道病毒71型/手足口病病毒抗體0.2mlA52835DeltaD/DLDDeltaD抗體0.2mlA52836EV71polyprotein3D腸道病毒71型/手足口病病毒抗體0.2mlA52837EXPB-2植物延展素-β1mlA52838DHHDHH蛋白抗體0.2mlA52839ATEXPA10植物延長(zhǎng)蛋白(擬南芥)1mlA52840Ezrin埃茲蛋白抗體0.1ml大鼠ELISA試劑盒A52841Phospho-Ezrin(Tyr353)磷酸化埃茲蛋白抗體0.1mlA52842Phospho-Ezrin(Thr567)磷酸化埃茲蛋白抗體0.1mlA52843F1operonpositiveregulatoryprotein(NT)肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體(N端)0.2mlA52844F1operonpositiveregulatoryprotein肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體(C端)0.2mlA52845FAAH1脂肪酸酰胺水解酶1抗體0.2ml[詳細(xì)]
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2018-09-19 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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紅細(xì)胞裂解液
- 本產(chǎn)品是利用細(xì)胞內(nèi)外鹽離子濃度差可導(dǎo)致細(xì)胞膜脹破的原理來(lái)裂解紅細(xì)胞,主要用于實(shí)驗(yàn)中紅細(xì)胞的去除,比如:淋巴細(xì)胞的分離純化,經(jīng)酶消化分散的組織細(xì)胞的分離純化,以及組織細(xì)胞蛋白與核酸提取等實(shí)驗(yàn)中紅細(xì)胞的去除。[詳細(xì)]
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2018-09-04 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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裂解氣相分析藥片的涂層
- 裂解氣相分析藥片的涂層[詳細(xì)]
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2005-02-01 00:00
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裂解氣相分析藥片的涂層
- 裂解氣相分析藥片的涂層[詳細(xì)]
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2024-09-28 00:26
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細(xì)胞染色方法總結(jié)
- 細(xì)胞染色方法總結(jié)[詳細(xì)]
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2024-09-28 21:53
產(chǎn)品樣冊(cè)
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ELISA試劑盒揭開(kāi)細(xì)胞的古老謎題
- ELISA試劑盒揭開(kāi)細(xì)胞的古老謎題[詳細(xì)]
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2015-03-24 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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利用超聲裂解細(xì)菌
- 上海金穗生物公司是一家專業(yè)經(jīng)營(yíng)生物試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、試劑耗材的公司,生物引擎在廣大用戶的幫助和支持下,經(jīng)過(guò)不懈的努力,已成為國(guó)內(nèi)生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的主要供應(yīng)商之一,主要經(jīng)營(yíng)ELISA試劑盒、細(xì)胞、血清、抗體、金標(biāo)試劑盒、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗等產(chǎn)品,產(chǎn)品暢銷國(guó)內(nèi)大部分地區(qū),銷售額逐年穩(wěn)步提高。上海金穗生物公司擁有雄厚的實(shí)力、合理的價(jià)格和優(yōu)良的服務(wù),能夠及時(shí)解決和滿足客戶的各方面的需求,公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國(guó),在同行獲得一致好評(píng)。www.shjsbio.com[詳細(xì)]
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2018-10-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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裂解在高分子材料分析中的應(yīng)用
- 裂解在高分子材料分析中的應(yīng)用[詳細(xì)]
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2024-09-23 23:22
其它
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大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13/WF-cp)ELISA試劑盒
- 大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13/WF-cp)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2015-09-22 00:00
專利
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大鼠P450側(cè)鏈裂解酶(P450 scc)ELISA試劑盒
- 大鼠P450側(cè)鏈裂解酶(P450scc)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠P450scc單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的P450scc與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠P450scc,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測(cè)OD值,P450scc濃度與OD值成正比,可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中P450scc濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)P450scc含量即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的P450scc檢測(cè)濃度小于15pg/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的大鼠P450scc。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于10%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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