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Western Blot結(jié)果出乎意料,有可能是轉(zhuǎn)印海綿墊惹的禍
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本文由 艾普拜生物科技(蘇州)有限公司 整理匯編
2024-09-30 01:24 813閱讀次數(shù)
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轉(zhuǎn)印問題的常見根源是三明治結(jié)構(gòu)的松緊度。三明治結(jié)構(gòu)一定要緊!請(qǐng)定期更換轉(zhuǎn)印海綿墊,以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。使用額外的濾紙來(lái)填補(bǔ)海綿的磨損,可能會(huì)導(dǎo)致傳輸不一致。
我們都會(huì)定期更換海綿墊,因?yàn)樗鼈儠?huì)吸收污染物,隨著時(shí)間的推移,轉(zhuǎn)印海綿墊也會(huì)被污染。使用干凈的海綿墊對(duì)熒光應(yīng)用尤為關(guān)鍵,因?yàn)檫@些污染物會(huì)產(chǎn)生自發(fā)熒光,從而導(dǎo)致高背景。
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Western Blot結(jié)果出乎意料,有可能是轉(zhuǎn)印海綿墊惹的禍
- 轉(zhuǎn)印問題的常見根源是三明治結(jié)構(gòu)的松緊度。三明治結(jié)構(gòu)一定要緊!請(qǐng)定期更換轉(zhuǎn)印海綿墊,以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。使用額外的濾紙來(lái)填補(bǔ)海綿的磨損,可能會(huì)導(dǎo)致傳輸不一致。
我們都會(huì)定期更換海綿墊,因?yàn)樗鼈儠?huì)吸收污染物,隨著時(shí)間的推移,轉(zhuǎn)印海綿墊也會(huì)被污染。使用干凈的海綿墊對(duì)熒光應(yīng)用尤為關(guān)鍵,因?yàn)檫@些污染物會(huì)產(chǎn)生自發(fā)熒光,從而導(dǎo)致高背景。
[詳細(xì)]
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2024-09-30 01:24
實(shí)驗(yàn)操作
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蛋白質(zhì)印跡分析(Western Blot Analysis)
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蛋白質(zhì)印跡分析(WesternBlotAnalysis)【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹苛私獾鞍踪|(zhì)印跡法的基本原理及其操作和應(yīng)用?!緦?shí)驗(yàn)原理】蛋白質(zhì)印跡法又稱為免疫印跡法,這是一種可以檢測(cè)固定在固相載體上蛋白質(zhì)的免疫化學(xué)技術(shù)方法。待測(cè)蛋白既可以是粗提物也可以經(jīng)過一定的分離和純化,另外這項(xiàng)技術(shù)的應(yīng)用需要利用待測(cè)蛋白的單克隆或多克隆抗體進(jìn)行識(shí)別。如圖所示,可溶性抗原,也就是待測(cè)蛋白首先要根據(jù)其性質(zhì),如分子量,分子大小,電荷以及其等電點(diǎn)等采用不同的電泳方法進(jìn)行分離;通過電流將凝膠中的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到聚偏二氟乙烯膜上;利用抗體(一抗)與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的原理,以抗體作為探針釣取目的蛋白。值得注意的是在加入一抗前應(yīng)首先加入非特異性蛋白,如牛血清白蛋白對(duì)膜進(jìn)行“封阻”而防止抗體與膜的非特異性結(jié)合。經(jīng)電泳分離后的蛋白往往需再利用電泳方法將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到固相載體上,我們把這個(gè)過程稱為電泳印跡。常用的兩種電轉(zhuǎn)移方法分別為:1.半干法:凝膠和固相載體被夾在用緩沖溶液浸濕的濾紙之間,通電時(shí)間為10分鐘~30分鐘。2.濕法:凝膠和固相載體夾心浸放在轉(zhuǎn)移緩沖溶液中,轉(zhuǎn)移時(shí)間可從45分鐘延長(zhǎng)到過夜進(jìn)行。由于濕法的使用彈性更大并且沒有明顯浪費(fèi)更多的時(shí)間和原料,因此我們?cè)谶@里只描述濕法的基本操作過程。對(duì)于目的蛋白的識(shí)別需要采用能夠識(shí)別一抗的第二抗體。該抗體往往是購(gòu)買的成品,已經(jīng)被結(jié)合或標(biāo)記了特定的試劑,如辣根過氧化物酶。這種標(biāo)記是利用辣根過氧化物酶所催化的一個(gè)比色反應(yīng),該反應(yīng)的產(chǎn)物有特定的顏色且固定在固相載體上,容易鑒別。因此可通過對(duì)二抗的識(shí)別而識(shí)別一抗,進(jìn)而判斷出目標(biāo)蛋白所在的位置。其他的識(shí)別系統(tǒng)包括堿性磷酸酶系統(tǒng)和125I標(biāo)記系統(tǒng)?!緦?shí)驗(yàn)操作】⒈.蛋白質(zhì)的分離根據(jù)目的蛋白的性質(zhì),利用電泳方法將其進(jìn)行分離。為提高電轉(zhuǎn)移的效率,通常采用SDS/PAGE技術(shù)。分離實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,首先將樣品墻的上邊緣用小刀去除,然后在膠板的右上角切一個(gè)小口以便定位,小心放入轉(zhuǎn)移緩沖溶液中待用。⒉.電轉(zhuǎn)移⑴準(zhǔn)備PVDF膜根據(jù)膠的大小剪出一片PVDF膜,膜的大小應(yīng)略微小于膠的大小。將膜置于甲醇中浸泡1分鐘,再移至轉(zhuǎn)移緩沖溶液中待用。夾心放置順序⑵制作膠膜夾心在一淺盤中打開轉(zhuǎn)移盒,將一個(gè)預(yù)先用轉(zhuǎn)移緩沖溶液浸泡過的海綿墊放在轉(zhuǎn)移盒的黑色篩孔板上,在海綿墊的上方放置經(jīng)轉(zhuǎn)移緩沖溶液浸濕的3MM紙,小心地將膠板放在3MM紙上,并注意排除氣泡。將PVDF膜放在膠的上方同時(shí)注意排除氣泡,再在膜的上方放上一張同樣用轉(zhuǎn)移緩沖溶液浸濕過的3MM紙并趕出氣泡,放置另一張浸泡過的海綿墊,關(guān)閉轉(zhuǎn)移盒。將轉(zhuǎn)移盒按照正確的方向放入轉(zhuǎn)移槽中,轉(zhuǎn)移盒的黑色篩孔板貼近轉(zhuǎn)移槽的黑色端,轉(zhuǎn)移盒的白色篩孔板貼近轉(zhuǎn)移槽的白色端,填滿轉(zhuǎn)移緩沖溶液同時(shí)防止出現(xiàn)氣泡。⑶電轉(zhuǎn)移連接電源,在4°C條件下維持恒壓100v,1小時(shí)⒊.免疫檢測(cè)⑴膜染色斷開電源,將轉(zhuǎn)移盒從轉(zhuǎn)移槽中移出,將轉(zhuǎn)移盒的各個(gè)部分分開。用鑷子將PVDF膜小心放入一個(gè)干凈的容器中,用TBS緩沖溶液進(jìn)行短暫清洗,從膜上剪下一條寬約5mm的膜放入另一個(gè)干凈的容器中。將這條膜在染色液中浸泡1分鐘,然后在脫色液中脫色30分鐘,確定蛋白質(zhì)已經(jīng)轉(zhuǎn)移到PVDF膜上。⑵膜的封閉和清洗對(duì)于沒有進(jìn)行染色的膜,首先倒出TBS緩沖溶液,加入3%封閉緩沖溶液,輕輕搖動(dòng)至少1小時(shí)。倒掉3%封閉緩沖溶液,并用TBS緩沖溶液清洗3次,每次5分鐘。⑶一抗倒掉TBS緩沖溶液,加入10ml0.5%封閉緩沖溶液及適量的一抗,輕輕搖動(dòng)1小時(shí)以上。從容器中倒出一抗及封閉緩沖溶液,用TTBS緩沖溶液清洗兩次,每次10分鐘。⑷二抗倒出TTBS緩沖溶液,加入5ml0.5%封閉緩沖溶液及適量的二抗。輕輕搖動(dòng)30分鐘,倒出二抗及封閉緩沖溶液,用TTBS緩沖溶液清洗兩次,每次10分鐘。⑸檢測(cè)倒掉TTBS緩沖溶液,并加入顯影劑,輕輕搖動(dòng)PVDF膜,觀察顯影情況,當(dāng)能夠清晰的看到顯色帶時(shí),用蒸餾水在30分鐘內(nèi)分三次清洗PVDF膜以終止顯色反應(yīng)的繼續(xù)進(jìn)行?!緦?shí)驗(yàn)結(jié)果】檢查膜上顯色結(jié)果,藍(lán)紫色帶所對(duì)應(yīng)的即是目標(biāo)蛋白的位置。WesternBlotAnalysis【Purpose】ComprehendthetheoryofWesternblotting;understanditsbasicmanipulationandapplication.【Principle】WesternblottingisalsocalledImmunoblotting.Itisakindofimmunochemicaltechniqueswhichisusedtodetectaproteinimmobilizedonamatrix.Thetargetproteincanbeinacrudeextractoramorepurifiedpreparationandthemonoclonalorpolyclonalantibodyagainstthisproteinisnecessarytohelpustorecognizetheantigen.AsintheFigure,solubleantigens(thetargetprotein)maybeseparatedbyelectrophoresisbasedonitsmolecularweight(SDS/PAGE),sizeandcharge(nondenaturatinggelelectrophoresisorisoelectricpoint(isoelectricfocusing).Aftertheseparation,theproteinsaretransferredfromthegeltoaPVDFmembrane.Onceonthemembraneantibodies(firstantibodies)canbeusedtoprobeforthepresenceofparticularproteinbecauseofthespecificallybindingofantigenwithagainstit.Non-specificbindingsitecanbe“blocked”usingothernon-specificproteinsuchasbovineserumalbuminbeforeaddingfirstantibodytoavoidnon-specificbinding.Proteintransferismostcommonlyaccomplishedbyelectrophoresis,Thisprocedureiscalledelectrophoreticblotting.Thetwocommonelectrophoreticmethodsare:⒈Semi-dryblotting,inwhichthegelandimmobilizingmatrixaresandwichedbetweenbuffer-wettedfilterpapersthroughwhichacurrentisappliedfor10-30minutes.⒉Wet(tank)blotting,inwhichthegel-matrixsandwichissubmergedintransferbufferforelectrophoresis,whichmaytakeaslittleas45minutesormaybeallowedtocontinueovernightWeonlydescribewetblottinghere,sinceitpermitsgreaterflexibilitywithoutbeingsignificantlymoreexpensiveintimeormaterials.Thedetectionoftargetproteinisusingasecondantibody,whichcanrecognizethefirstantibody.Typically,thesecondantibodyispurchasedalreadyconjugatedtoalabe領(lǐng)agentsuchastheenzymehorseradishperoxidase.Thismarkeristhenvisualizedbyacolorimetricreactioncatalyzedbytheenzymewhichyieldsacoloredproductthatremainsfixedtothemembrane.Thus,itispossibletorecognizefirstantibodythroughrecognizingsecondantibody,andthenidentifythepositionoftargetprotein.Otherdetectionsystemsincludealkalinephosphataseand125Ilabels.【Materials】⒈Apparatus:ApparatusofSDS-PAGE,ElectroblottingApparatus,Powersupply,PVDFmembrane(MilliporeImmobion-P#IPVH00010),Whatman3MMpaper,AdditionalTools:Forceps,spongepad,scissor,gloves,smallplasticorglasscontainer,Shallowtray.⒉Reagents:⑴10xtransferbuffer(1L):30.3gTrizmabase(0.25M),144gGlycine(1.92M),pH首ldbe8.3;withoutadjustment.⑵1xtransferbuffer(2L):400mlMethanol,200ml10xtransferbuffer,1400mlwater.⑶TBSbuffer:Add1.22gTris(10mM)and8.78gNaCl(150mM)to1LdistilledwaterandadjustpHto7.5withHCl.⑷TTBSbuffer:1LTBSbufferadd0.5mlTween20(0.05%).⑸Firstantibody:antibodyagainstthetargetprotein.⑹Secondantibody:goatanti-rabbit-HRP(horseradishperoxidase).⑺3%Blockingbuffer(0.5L):Add15mgBovineserumalbumininTBSbuffertofinalvolume0.5L,keepat4°Ctopreventbacterialcontamination.⑻0.5%Blockingbuffer(0.5L):Add2.5mgBovineserumalbumininTBSbuffertofinalvolume0.5L,keepat4°Ctopreventbacterialcontamination.⑼Developingreagent:1mlchlonoaphtholsolution(30mg/mlinmethanol),add10mlmethanol,addTBSbufferto50mlandadd30ul30%H2O2.⑽Stainingbuffer:Add1gamidoblack18B(0.1%),250mlisopropanol(25%)and100mlaceticacid(10%)todistilledwaterwithfinalvolume1L.⑾Destainingbuffer:Add350mlisopropanol(35%)and2mlaceticacid(2%)todistilledwaterwithfinalvolume1L.【Procedure】⒈.SeparationofProteinRunanelectrophoreticseparationofknownantigenicproteins.Themethodofseparationdecidedbythecharactersoftargetprotein,butforsufficientlytransferring,themostcommonmethodisSDS-PAGE.Afterseparation,removeuppersideofsamplewellswitharazorblade.Notchingbottomright-handcornerofgelfororientationandputgelintransferbufferuntilreadytouse.⒉.Electrotransfer⑴PreparationofmembraneCutapieceofPVDFmembrane(MilliporeImmobion-P#IPVH00010)accordingtothesizeofgel.Incubateinmethanolforabout1minonarockeratroomtemp.Removemethanolandequilibratemembranein1xtransferbufferuntilreadytouse.⑵Arrangegel-membranesandwichInashallowtray,openthetransfercassette.Putawell-soakedspongepadontheblackpieceofthetransfercassetteandawetted3MMpaperonthespongepad.Placethegelonthepaperandarrangewellsothatallairbubblesareremoved.LaythePVDFmembraneonthetopofgelandremoveanyairbubbles.Placeawettedsheetof3MMpaperoverthePVDFmembraneandremovethebubble.Coveredwiththesecondwell-soakedpad.Closethesandwichwiththewhitepieceofthecassette.Mountthesandwichinthetransfertank;puttheblacksidesneartheblacksideofthedevice.Fillthebuffertankwiththetransferbuffer.⑶Electrotransfer:Attachtheelectrodes.Setthepowersupplyto100V(constantvoltage)for1hat4°C.⒊.Immunodetection⑴MembranestainingDisconnecttransferapparatus,removetransfercassette,andpeel3MMpaperfrommembrane.Removethemembranetoasmallcontainer.Add10mlTBSbufferandwashforshorttime.Cutoutonestripewith5mmwidthandputinanothercleancontainer.Stainthisstripeinstainingbufferfor1min.Destainfor30minindestainingbuffertocheckwhetherproteinhasbeentransferredfromgeltomembraneornot.⑵MembraneblockingandwashingForotherpartofmembrane,pouroffTBSbuffer.Add3%blockingbuffer,rockgentlyforatleast1h.Pouroff3%blockingbufferandrinsebrieflywithTBSbufferthreetimes,5minutesforpertime.⑶FirstantibodyPouroffTBSbuffer.Addfirstantibodyatappropriatedilutionin10ml0.5%blockingbuffer.Rockgentlyforatleast1h;pourofffirstantibodysolutionfrommembraneandwashtwicefor10minuteswithTTBSbuffer.⑷SecondantibodyPouroffTTBSbuffer.Addsecondantibodyatappropriatedilutionin5ml0.5%blockingbuffer.Rockgentlyfor30min,pouroffsecondantibodysolutionfrommembraneandwashtwicefor10minuteswithTTBSbuffer.⑸DetectionPouroffTTBSbufferfrommembraneandadddevelopingreagent,RockPVDFgently,monitoringdevelopment.Whenthebandscanbeseenclearly,stopdevelopmentbywashingmembranewithdistilledwaterfor30minuteswith3changes.【Result】Checkthebandsonmembrane,thebandwithblue-purplecolorcorrespondingtothetargetprotein.實(shí)驗(yàn)材料】1.實(shí)驗(yàn)器材SDS/PAGE實(shí)驗(yàn)相關(guān)材料;電轉(zhuǎn)移裝置;供電設(shè)備;PVDF膜(MilliporeImmobion-P#IPVH00010);Whatman3MM紙;其他工具:鑷子、海綿墊、剪子、手套、小塑料或玻璃容器、淺盤。Detection2.實(shí)驗(yàn)試劑⑴10x轉(zhuǎn)移緩沖溶液(1L):30.3gTrizmabase(0.25M),144g甘氨酸(1.92M),加蒸餾水至1L,此時(shí)pH約為8.3,不必調(diào)整。⑵1x轉(zhuǎn)移緩沖溶液(2L):在1.4L蒸餾水中加入400ml甲醇及200ml10x轉(zhuǎn)移緩沖溶液。⑶TBS緩沖溶液:將1.22gTris(10mM)和8.78gNaCl(150mM)加入到1L蒸餾水中,用HCl調(diào)節(jié)pH至7.5。⑷TTBSbuffer:在1LTBS緩沖溶液中加入0.5mlTween20(0.05%)。⑸一抗:兔抗待測(cè)蛋白抗體(多克隆抗體)。(6)二抗:辣根過氧化物酶標(biāo)記羊抗兔。⑺3%封阻緩沖溶液(0.5L):牛血清白蛋白15mg加入TBS緩沖溶液并定容至0.5L,過濾,在4°C保存以防止細(xì)菌污染。⑻0.5%封阻緩沖溶液(0.5L):牛血清白蛋白2.5mg加入TTBS緩沖溶液并定容至0.5L,過濾,在4°C保存以防止細(xì)菌污染。⑼顯影試劑:1ml氯萘溶液(30mg/ml甲醇配置),加入10ml甲醇,加入TBS緩沖溶液至50ml,加入30ul30%H2O2。⑽染色液:1g氨基黑18B(0.1%),250ml異丙醇(25%)及100ml乙酸(10%)用蒸餾水定容至1L。⑾脫色液:將350ml異丙醇(35%)和20ml乙酸(2%)用蒸餾水定容至1L。[詳細(xì)]
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2018-09-27 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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定量western blot :為什么需要驗(yàn)證抗體
- 驗(yàn)證抗體對(duì)于WB結(jié)果的一致性和重復(fù)性是至關(guān)重要的,即確認(rèn)抗體能特異性識(shí)別感興趣的蛋白,抗體與其他蛋白的交叉反應(yīng)性情況。在您的論文提交給期刊發(fā)表之前,經(jīng)常需要驗(yàn)證抗體的特異性,但并非所有人都花時(shí)間進(jìn)行驗(yàn)證。或者很多人都認(rèn)為他們使用抗體進(jìn)行了免疫共沉淀驗(yàn)證,因而不需要再通過蛋白質(zhì)印跡進(jìn)行驗(yàn)證。然而,抗體與抗原的親和性高度依賴于實(shí)驗(yàn)條件,因此,驗(yàn)證您的試驗(yàn)方法中的條件適用于抗體與抗原的結(jié)合是十分重要的。在《JBC》雜志中關(guān)于抗體驗(yàn)證信息如下:[詳細(xì)]
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2024-09-30 01:34
實(shí)驗(yàn)操作
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使用 ScanLater Western Blot protein Ladder 估算蛋白分子量
- 使用 ScanLater Western Blot protein Ladder 估算蛋白分子量[詳細(xì)]
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2024-09-27 05:16
應(yīng)用文章
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一文教你如何在Western Blot中選擇一抗?
- 說到免疫印跡Z重要的就是抗體的選擇了。在免疫印跡中我們會(huì)用到一抗和二抗等抗體,本文著重給大家介紹一下一抗的選擇。
一抗就是能和特異性抗原特異性結(jié)合的蛋白。種類包括單克隆抗體和多克隆抗體。抗體因其種屬來(lái)源不同可以分為多種類型,如鼠抗,兔抗,羊抗等等,那么在使用時(shí)我們應(yīng)該怎么選擇呢?
檢測(cè)任何一種目的蛋白都有不止一種抗體可供選擇,為了在試驗(yàn)過程中盡快找到Z適合的抗體,往往需要考慮以下幾種因素:
1.確定自己的實(shí)驗(yàn)類型。如WB、IHC、ICC、ELASA等。一般的抗體說明書上都會(huì)給出該抗體適用于哪一種分析類型。
2. 單克隆or多克隆抗體的選擇。一般單克隆抗體特異性強(qiáng),但親和力相對(duì)小,檢測(cè)抗原靈敏度相對(duì)就低;而多克隆抗體特異性稍弱,但抗體的親和力強(qiáng),靈敏度高,但極易出現(xiàn)非特異性條帶。
3.確定自己的實(shí)驗(yàn)樣本的結(jié)構(gòu)信息。不同的抗體是由不同的免疫原(全長(zhǎng)蛋白、蛋白片斷、多肽、全有機(jī)體或細(xì)胞等)免疫宿主而制備得來(lái),抗體說明書一般都有免疫原的描述,如果檢測(cè)的樣本是蛋白片斷或蛋白全長(zhǎng)的某一區(qū)域,則必須選擇用含此片段結(jié)構(gòu)域的免疫原制備出的抗體。還有一點(diǎn)就是樣本的制備過程,有些抗體要求樣本經(jīng)過某些特殊處理[詳細(xì)]
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2019-11-18 17:12
實(shí)驗(yàn)操作
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如何對(duì)化學(xué)發(fā)光Western Blot (1D 和2D) 進(jìn)行高質(zhì)量的成
- 如何對(duì)化學(xué)發(fā)光Western Blot (1D 和2D) 進(jìn)行高質(zhì)量的成[詳細(xì)]
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2024-09-15 22:18
其它
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產(chǎn)品介紹 - 包埋盒(有蓋)、包埋海綿墊、組織包埋模具
- 產(chǎn)品介紹 - 包埋盒(有蓋)、包埋海綿墊、組織包埋模具[詳細(xì)]
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2014-08-18 00:00
其它
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GE給您完全的蛋白印跡方案--Western Blot相關(guān)產(chǎn)品秋季開學(xué)特惠
- GE給您完全的蛋白印跡方案--Western Blot相關(guān)產(chǎn)品秋季開學(xué)特惠[詳細(xì)]
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2012-09-05 00:00
專利
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Whatman雜交膜、轉(zhuǎn)印濾紙、PVDF膜 NC膜 尼龍膜選購(gòu)指南
- Whatman雜交膜、轉(zhuǎn)印濾紙、雜交轉(zhuǎn)印系統(tǒng)1.雜交膜、轉(zhuǎn)印濾紙貨號(hào)品名膜孔徑/濾紙厚度規(guī)格包裝報(bào)價(jià)10401196Whatman硝酸纖維素膜BA850.45um30cmx3m1卷323210401396Whatman硝酸纖維素膜BA830.2um30cmx3m1卷387410485289WhatmanPVDF膜0.45um30cmx3m1卷369110416196Whatman尼龍膜NytranN0.45um30cmx3m1卷365210416296Whatman尼龍膜NytranSPC0.45um30cmx3m1卷38423030-8613MM轉(zhuǎn)印濾紙0.34mm20x20cm100張/盒67510484124GB004轉(zhuǎn)印濾紙1.0mm7x10cm100張/盒20710427918GB004轉(zhuǎn)印濾紙1.0mm20x20cm100張/盒6592.TurboBlotter快速核酸轉(zhuǎn)移系統(tǒng)貨號(hào)品名規(guī)格包裝目錄價(jià)10416328NytranSuperChargeTurboBlotter系統(tǒng)7x10cm轉(zhuǎn)移設(shè)備,5套雜交膜,40張3MM濾紙,100張GB004和5疊3MM濾紙124010416330NytranSuperChargeTurboBlotterRefills7x10cm5套雜交膜,40張3MM濾紙,100張GB004和5疊3MM濾紙9593.Minifold雜交系統(tǒng)貨號(hào)品名大小包裝目錄價(jià)10447850Minifold-1SpotBlotSystem96孔,2.0mm2/Spot1個(gè)MinifoldI裝置,5張硝酸膜1299410447852Minifold-1SpotBlotPlate96孔,2.0mm2/Spot1個(gè)MinifoldI裝置,5張硝酸膜603810447900Minifold-1DotBlotSystem96孔,12.5mm2/Dot1個(gè)MinifoldI裝置,5張硝酸膜1299410447941Minifold-1SlotBlotSystem48孔,6.24mm2/Slot1個(gè)MinifoldI裝置,5張硝酸膜1300910447906Minifold-1SlotBlotPlate48孔,6.24mm2/Slot1個(gè)MinifoldI裝置,5張硝酸膜6038特價(jià)?。?!訂購(gòu)信息:貨號(hào)10401196ProtranBA-850.45um孔徑30cmx3m¥1950/卷貨號(hào)10401396ProtranBA-830.2um孔徑20cmx3m¥5150/卷PALLNC膜NT膜硝酸纖維素膜貨號(hào):66485尺寸:30cmx3m價(jià)格:1150.00MilliporePVDF印跡膜Immobilon-PTransferMembrane貨號(hào):IPVH00010孔徑:0.45um尺寸:26.5cmx3.75m/卷1650.00尺寸:13.75cmx15cm/張85.00貨號(hào):ISEQ00010空進(jìn)0.2um尺寸:26.5cmx3.75m/卷2150.00尺寸:13.25cmx15cm/張100.003030-8613MM轉(zhuǎn)印濾紙0.34mm20x20cm100張/盒600.00[詳細(xì)]
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2018-09-02 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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- 影響水平垂直燃燒試驗(yàn)結(jié)果的主要因素有哪些?[詳細(xì)]
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2024-09-28 00:42
產(chǎn)品樣冊(cè)
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- 這款組合式全溫振蕩培養(yǎng)箱可能是**的[詳細(xì)]
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2015-01-27 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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HJT 371-2007 環(huán)境標(biāo)志產(chǎn)品技術(shù)要求 凹印油墨和柔印油墨
- HJT 371-2007 環(huán)境標(biāo)志產(chǎn)品技術(shù)要求 凹印油墨和柔印油墨[詳細(xì)]
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2024-10-03 20:16
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- 轉(zhuǎn)環(huán)seivels[詳細(xì)]
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2024-10-03 20:16
專利
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Santa Cruz Western Blotting投訴表
- SantaCruz,SantaCruz代理,SantaCruz北京代理,SantaCruz上海,SantaCruz國(guó)內(nèi)代理熱烈祝賀上海起發(fā)獲得SantaCruzZG區(qū)代理2013年9月開始正式簽約SantaCruz,所有產(chǎn)品售后均有上海SantaCruz負(fù)責(zé),1**%負(fù)責(zé),并在上海備有20000多種現(xiàn)貨抗體,價(jià)格優(yōu)惠,歡迎廣大經(jīng)銷商咨詢178406/news_328698.html上海起福生物科技有限公司SantaCruz專業(yè)代理,具體產(chǎn)品信息歡迎電詢:4006551678SantaCruzBiotechnologyTECHNICALSERVICEGUIDE:WesternBlottingCatalog#:Lot#:PROBLEMANDPREVIOUSEXPERIENCEWhatisthespecificproblemyouareexperiencing?Whatsizebandswereexpectedandwhatsizebandsweredetected?Wastheblotblankorwasadarkbackgroundornon-specificbandsseen?Didthissamevialofproductworkinthepast?Whatweretheresults?Didotherlotsofthisproductworkinthepast?Whichlots?Whatweretheresults?SAMPLESANDCONTROLSFromwhatspecies(animal)wasthesampleandwhattypeofsamplewasused(celllysate,tissue,purifiedprotein,etc.)?Whatlysisbufferwasused?Howmuchsamplewasloadedonthegel?Iftheblockingpeptidewasused,wasitusedasanegativecontrol?Whatpositiveand/ornegativecontrolswereused,andwhatweretheresults?BLOCKINGWhatweretheblockingconditions(blockingsolution,howlong,whattemperature.Etc.)?上海起福生物科技有限公司聯(lián)系人:楊建輝400電話:4006551678辦公電話:021-50724187傳真:021-50724961*8006手機(jī):15921799099企業(yè)QQ:4006551678網(wǎng)址:http://www.qfbio.com/地址:上海市浦東新區(qū)繡川路561號(hào)1102室[詳細(xì)]
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2018-09-29 10:02
產(chǎn)品樣冊(cè)
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Western blotting DAB 檢測(cè)試劑盒說明書
- SDS-PAGE電泳后,蛋白質(zhì)按照分子量大小分離,轉(zhuǎn)移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)后,固相載體以非共價(jià)鍵形式吸附蛋白質(zhì),以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原,與對(duì)應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng),再與酶標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng),經(jīng)過底物顯色以檢測(cè)電泳分離的特異性的蛋白。[詳細(xì)]
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2024-09-29 12:14
產(chǎn)品樣冊(cè)
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測(cè)量結(jié)果單位nmol /(mg prot),與nmol /(g tissue)有什么區(qū)別?
- 測(cè)量結(jié)果單位nmol /(mg prot),與nmol /(g tissue)有什么區(qū)別?[詳細(xì)]
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2024-10-08 05:22
安裝說明
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新時(shí)代下對(duì)于Western Blotting發(fā)表文章的新要求(一)
- Western Blotting技術(shù)已經(jīng)問世四十多年了,依然是蛋白分析中Z常用和主流的方法。但近些年Western Blotting數(shù)據(jù)重現(xiàn)性,穩(wěn)定性,定量準(zhǔn)確性等問題,也使這項(xiàng)技術(shù)被推到了風(fēng)口浪尖,同時(shí)也有很多文章因?yàn)閃estern Blotting數(shù)據(jù)的問題而撤稿,而為了盡可能提高Western Blottig數(shù)據(jù)的可靠性和準(zhǔn)確性,期刊雜志對(duì)于接收涉及Western Blotting技術(shù)數(shù)據(jù)的文章也提出了新的要求。[詳細(xì)]
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2024-09-12 16:03
期刊論文
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新時(shí)代下對(duì)于Western Blotting發(fā)表文章的新要求(二)
- Azure公司除了有Sapphire雙模式多光譜激光成像系統(tǒng)可滿足需求, Azure600多功能分子成像系統(tǒng)也可幫助您獲得期刊雜志要求的Western Blot數(shù)據(jù):
Azure600標(biāo)配有5個(gè)熒光光源,可同時(shí)在一張印跡膜上進(jìn)行4通道熒光成像 ,同時(shí)也具有高靈敏化學(xué)發(fā)光檢測(cè)功能,靈敏度可達(dá)fg級(jí)
熒光Western Blot使用熒光基團(tuán)標(biāo)記的二抗進(jìn)行檢測(cè),膜上的靶標(biāo)蛋白濃度與可見熒光信號(hào)強(qiáng)度呈線性關(guān)系,實(shí)現(xiàn)真實(shí)可靠的定量分析。熒光染料發(fā)射光譜不同,因此在一張印跡膜上可實(shí)現(xiàn)多個(gè)蛋白檢測(cè)。這樣目標(biāo)蛋白和內(nèi)參蛋白在同一張膜上,可以避免數(shù)據(jù)造假的情況發(fā)生,更容易被期刊雜志接收。[詳細(xì)]
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2024-09-12 18:30
期刊論文
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解釋DSC實(shí)驗(yàn)結(jié)果中的意外結(jié)果和事件
- 解釋DSC實(shí)驗(yàn)結(jié)果中的意外結(jié)果和事件[詳細(xì)]
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2024-09-17 11:03
標(biāo)準(zhǔn)
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D25 3086-06-2007-A-中文測(cè)定法(電感禍合等離子體發(fā)射光譜法)
- D25 3086-06-2007-A-中文測(cè)定法(電感禍合等離子體發(fā)射光譜法)[詳細(xì)]
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2014-06-30 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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