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2024-09-29 12:14 1070閱讀次數(shù)

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• Western blotting DAB 檢測試劑盒說明書

  SDS-PAGE電泳后，蛋白質(zhì)按照分子量大小分離，轉移到固相載體（例如硝酸纖維素薄膜）后，固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質(zhì)，以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原，與對應的抗體起免疫反應，再與酶標記的第二抗體起反應，經(jīng)過底物顯色以檢測電泳分離的特異性的蛋白。[詳細]

  2024-09-29 12:14

  產(chǎn)品樣冊

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• Santa Cruz Western Blotting投訴表

  SantaCruz，SantaCruz代理，SantaCruz北京代理，SantaCruz上海，SantaCruz國內(nèi)代理熱烈祝賀上海起發(fā)獲得SantaCruzZG區(qū)代理2013年9月開始正式簽約SantaCruz，所有產(chǎn)品售后均有上海SantaCruz負責，1**%負責，并在上海備有20000多種現(xiàn)貨抗體，價格優(yōu)惠，歡迎廣大經(jīng)銷商咨詢178406/news_328698.html上海起福生物科技有限公司SantaCruz專業(yè)代理，具體產(chǎn)品信息歡迎電詢：4006551678SantaCruzBiotechnologyTECHNICALSERVICEGUIDE:WesternBlottingCatalog#:Lot#:PROBLEMANDPREVIOUSEXPERIENCEWhatisthespecificproblemyouareexperiencing?Whatsizebandswereexpectedandwhatsizebandsweredetected?Wastheblotblankorwasadarkbackgroundornon-specificbandsseen?Didthissamevialofproductworkinthepast?Whatweretheresults?Didotherlotsofthisproductworkinthepast?Whichlots?Whatweretheresults?SAMPLESANDCONTROLSFromwhatspecies（animal）wasthesampleandwhattypeofsamplewasused（celllysate,tissue,purifiedprotein,etc.）?Whatlysisbufferwasused?Howmuchsamplewasloadedonthegel?Iftheblockingpeptidewasused,wasitusedasanegativecontrol?Whatpositiveand/ornegativecontrolswereused,andwhatweretheresults?BLOCKINGWhatweretheblockingconditions（blockingsolution,howlong,whattemperature.Etc.）?上海起福生物科技有限公司聯(lián)系人：楊建輝400電話：4006551678辦公電話：021-50724187傳真：021-50724961*8006手機：15921799099企業(yè)QQ:4006551678網(wǎng)址:http://www.qfbio.com/地址：上海市浦東新區(qū)繡川路561號1102室[詳細]

  2018-09-29 10:02

  產(chǎn)品樣冊

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• DAB染色試劑盒使用說明書

  DAB染色試劑盒使用說明書[詳細]

  2015-04-21 00:00

  其它

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• 新時代下對于Western Blotting發(fā)表文章的新要求（一）

  Western Blotting技術已經(jīng)問世四十多年了，依然是蛋白分析中Z常用和主流的方法。但近些年Western Blotting數(shù)據(jù)重現(xiàn)性，穩(wěn)定性，定量準確性等問題，也使這項技術被推到了風口浪尖，同時也有很多文章因為Western Blotting數(shù)據(jù)的問題而撤稿，而為了盡可能提高Western Blottig數(shù)據(jù)的可靠性和準確性，期刊雜志對于接收涉及Western Blotting技術數(shù)據(jù)的文章也提出了新的要求。[詳細]

  2024-09-12 16:03

  期刊論文

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• 新時代下對于Western Blotting發(fā)表文章的新要求（二）

  Azure公司除了有Sapphire雙模式多光譜激光成像系統(tǒng)可滿足需求， Azure600多功能分子成像系統(tǒng)也可幫助您獲得期刊雜志要求的Western Blot數(shù)據(jù)： Azure600標配有5個熒光光源，可同時在一張印跡膜上進行4通道熒光成像 ，同時也具有高靈敏化學發(fā)光檢測功能，靈敏度可達fg級 熒光Western Blot使用熒光基團標記的二抗進行檢測，膜上的靶標蛋白濃度與可見熒光信號強度呈線性關系，實現(xiàn)真實可靠的定量分析。熒光染料發(fā)射光譜不同，因此在一張印跡膜上可實現(xiàn)多個蛋白檢測。這樣目標蛋白和內(nèi)參蛋白在同一張膜上，可以避免數(shù)據(jù)造假的情況發(fā)生，更容易被期刊雜志接收。[詳細]

  2024-09-12 18:30

  期刊論文

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• 你的Western blotting實驗好拍檔——GE明星產(chǎn)品組合大特惠

  你的Western blotting實驗好拍檔——GE明星產(chǎn)品組合大特惠[詳細]

  2013-04-01 00:00

  選購指南

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• 兔檢測試劑盒說明書

  Cys-C試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知Cys-C濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將Cys-C和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中Cys-C的濃度呈比例關系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品：1600ng/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進行稀稀空白對照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標準品稀釋緩沖液1瓶（4.0ml）1瓶（2.0ml）即用型生物素標記的抗Cys-C抗體1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說明書進行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型標本稀釋液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自備材料1．蒸餾水。2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3．振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1．避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。2．實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。兔檢測試劑盒說明書操作注意事項1．試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。2．實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。3．不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6．洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7．底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8．加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9．按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液5、保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備1．標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：1600ng/ml（6號標準品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。800ng/ml（5號標準品）100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液400ng/ml（4號標準品）100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液200ng/ml（3號標準品）100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液100ng/ml（2號標準品）100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液50ng/ml（1號標準品）100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0ng/ml（空白對照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2．洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。2．根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi)。3．加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。4．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。5．每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。6．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。8．取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。9．在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標準品濃度（ng/ml）A16001600樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標準品以上的結果為非線性的，根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細胞因子反應。3.重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。兔檢測試劑盒說明書結果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的Cys-C標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的Cys-C含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍：0-1600ng/ml4、敏感度：1.0ng/ml[詳細]

  2018-11-05 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 蛋白質(zhì)印跡分析（Western Blot Analysis）

  蛋白質(zhì)印跡分析（WesternBlotAnalysis）【實驗目的】了解蛋白質(zhì)印跡法的基本原理及其操作和應用?！緦嶒炘怼康鞍踪|(zhì)印跡法又稱為免疫印跡法，這是一種可以檢測固定在固相載體上蛋白質(zhì)的免疫化學技術方法。待測蛋白既可以是粗提物也可以經(jīng)過一定的分離和純化,另外這項技術的應用需要利用待測蛋白的單克隆或多克隆抗體進行識別。如圖所示，可溶性抗原，也就是待測蛋白首先要根據(jù)其性質(zhì)，如分子量，分子大小，電荷以及其等電點等采用不同的電泳方法進行分離；通過電流將凝膠中的蛋白質(zhì)轉移到聚偏二氟乙烯膜上；利用抗體（一抗）與抗原發(fā)生特異性結合的原理，以抗體作為探針釣取目的蛋白。值得注意的是在加入一抗前應首先加入非特異性蛋白，如牛血清白蛋白對膜進行“封阻”而防止抗體與膜的非特異性結合。經(jīng)電泳分離后的蛋白往往需再利用電泳方法將蛋白質(zhì)轉移到固相載體上,我們把這個過程稱為電泳印跡。常用的兩種電轉移方法分別為:1.半干法:凝膠和固相載體被夾在用緩沖溶液浸濕的濾紙之間,通電時間為10分鐘~30分鐘。2.濕法：凝膠和固相載體夾心浸放在轉移緩沖溶液中，轉移時間可從45分鐘延長到過夜進行。由于濕法的使用彈性更大并且沒有明顯浪費更多的時間和原料，因此我們在這里只描述濕法的基本操作過程。對于目的蛋白的識別需要采用能夠識別一抗的第二抗體。該抗體往往是購買的成品，已經(jīng)被結合或標記了特定的試劑，如辣根過氧化物酶。這種標記是利用辣根過氧化物酶所催化的一個比色反應，該反應的產(chǎn)物有特定的顏色且固定在固相載體上，容易鑒別。因此可通過對二抗的識別而識別一抗，進而判斷出目標蛋白所在的位置。其他的識別系統(tǒng)包括堿性磷酸酶系統(tǒng)和125I標記系統(tǒng)?！緦嶒灢僮鳌竣?蛋白質(zhì)的分離根據(jù)目的蛋白的性質(zhì)，利用電泳方法將其進行分離。為提高電轉移的效率，通常采用SDS/PAGE技術。分離實驗結束后，首先將樣品墻的上邊緣用小刀去除，然后在膠板的右上角切一個小口以便定位，小心放入轉移緩沖溶液中待用。⒉.電轉移⑴準備PVDF膜根據(jù)膠的大小剪出一片PVDF膜，膜的大小應略微小于膠的大小。將膜置于甲醇中浸泡1分鐘，再移至轉移緩沖溶液中待用。夾心放置順序⑵制作膠膜夾心在一淺盤中打開轉移盒，將一個預先用轉移緩沖溶液浸泡過的海綿墊放在轉移盒的黑色篩孔板上，在海綿墊的上方放置經(jīng)轉移緩沖溶液浸濕的3MM紙，小心地將膠板放在3MM紙上，并注意排除氣泡。將PVDF膜放在膠的上方同時注意排除氣泡，再在膜的上方放上一張同樣用轉移緩沖溶液浸濕過的3MM紙并趕出氣泡，放置另一張浸泡過的海綿墊，關閉轉移盒。將轉移盒按照正確的方向放入轉移槽中，轉移盒的黑色篩孔板貼近轉移槽的黑色端，轉移盒的白色篩孔板貼近轉移槽的白色端，填滿轉移緩沖溶液同時防止出現(xiàn)氣泡。⑶電轉移連接電源,在4°C條件下維持恒壓100v，1小時⒊.免疫檢測⑴膜染色斷開電源，將轉移盒從轉移槽中移出，將轉移盒的各個部分分開。用鑷子將PVDF膜小心放入一個干凈的容器中，用TBS緩沖溶液進行短暫清洗，從膜上剪下一條寬約5mm的膜放入另一個干凈的容器中。將這條膜在染色液中浸泡1分鐘，然后在脫色液中脫色30分鐘,確定蛋白質(zhì)已經(jīng)轉移到PVDF膜上。⑵膜的封閉和清洗對于沒有進行染色的膜，首先倒出TBS緩沖溶液,加入3%封閉緩沖溶液,輕輕搖動至少1小時。倒掉3%封閉緩沖溶液，并用TBS緩沖溶液清洗3次,每次5分鐘。⑶一抗倒掉TBS緩沖溶液，加入10ml0.5%封閉緩沖溶液及適量的一抗，輕輕搖動1小時以上。從容器中倒出一抗及封閉緩沖溶液，用TTBS緩沖溶液清洗兩次，每次10分鐘。⑷二抗倒出TTBS緩沖溶液，加入5ml0.5%封閉緩沖溶液及適量的二抗。輕輕搖動30分鐘，倒出二抗及封閉緩沖溶液，用TTBS緩沖溶液清洗兩次，每次10分鐘。⑸檢測倒掉TTBS緩沖溶液，并加入顯影劑，輕輕搖動PVDF膜，觀察顯影情況，當能夠清晰的看到顯色帶時，用蒸餾水在30分鐘內(nèi)分三次清洗PVDF膜以終止顯色反應的繼續(xù)進行?！緦嶒灲Y果】檢查膜上顯色結果，藍紫色帶所對應的即是目標蛋白的位置。WesternBlotAnalysis【Purpose】ComprehendthetheoryofWesternblotting;understanditsbasicmanipulationandapplication.【Principle】WesternblottingisalsocalledImmunoblotting.Itisakindofimmunochemicaltechniqueswhichisusedtodetectaproteinimmobilizedonamatrix.Thetargetproteincanbeinacrudeextractoramorepurifiedpreparationandthemonoclonalorpolyclonalantibodyagainstthisproteinisnecessarytohelpustorecognizetheantigen.AsintheFigure,solubleantigens（thetargetprotein）maybeseparatedbyelectrophoresisbasedonitsmolecularweight（SDS/PAGE）,sizeandcharge（nondenaturatinggelelectrophoresisorisoelectricpoint（isoelectricfocusing）.Aftertheseparation,theproteinsaretransferredfromthegeltoaPVDFmembrane.Onceonthemembraneantibodies（firstantibodies）canbeusedtoprobeforthepresenceofparticularproteinbecauseofthespecificallybindingofantigenwithagainstit.Non-specificbindingsitecanbe“blocked”usingothernon-specificproteinsuchasbovineserumalbuminbeforeaddingfirstantibodytoavoidnon-specificbinding.Proteintransferismostcommonlyaccomplishedbyelectrophoresis，Thisprocedureiscalledelectrophoreticblotting.Thetwocommonelectrophoreticmethodsare:⒈Semi-dryblotting,inwhichthegelandimmobilizingmatrixaresandwichedbetweenbuffer-wettedfilterpapersthroughwhichacurrentisappliedfor10-30minutes.⒉Wet（tank）blotting,inwhichthegel-matrixsandwichissubmergedintransferbufferforelectrophoresis,whichmaytakeaslittleas45minutesormaybeallowedtocontinueovernightWeonlydescribewetblottinghere,sinceitpermitsgreaterflexibilitywithoutbeingsignificantlymoreexpensiveintimeormaterials.Thedetectionoftargetproteinisusingasecondantibody,whichcanrecognizethefirstantibody.Typically,thesecondantibodyispurchasedalreadyconjugatedtoalabe領agentsuchastheenzymehorseradishperoxidase.Thismarkeristhenvisualizedbyacolorimetricreactioncatalyzedbytheenzymewhichyieldsacoloredproductthatremainsfixedtothemembrane.Thus,itispossibletorecognizefirstantibodythroughrecognizingsecondantibody,andthenidentifythepositionoftargetprotein.Otherdetectionsystemsincludealkalinephosphataseand125Ilabels.【Materials】⒈Apparatus:ApparatusofSDS-PAGE,ElectroblottingApparatus,Powersupply,PVDFmembrane（MilliporeImmobion-P#IPVH00010）,Whatman3MMpaper,AdditionalTools:Forceps,spongepad,scissor,gloves,smallplasticorglasscontainer,Shallowtray.⒉Reagents:⑴10xtransferbuffer（1L）:30.3gTrizmabase（0.25M）,144gGlycine（1.92M）,pH首ldbe8.3;withoutadjustment.⑵1xtransferbuffer（2L）:400mlMethanol,200ml10xtransferbuffer,1400mlwater.⑶TBSbuffer:Add1.22gTris（10mM）and8.78gNaCl（150mM）to1LdistilledwaterandadjustpHto7.5withHCl.⑷TTBSbuffer:1LTBSbufferadd0.5mlTween20（0.05%）.⑸Firstantibody:antibodyagainstthetargetprotein.⑹Secondantibody:goatanti-rabbit-HRP（horseradishperoxidase）.⑺3%Blockingbuffer（0.5L）:Add15mgBovineserumalbumininTBSbuffertofinalvolume0.5L,keepat4°Ctopreventbacterialcontamination.⑻0.5%Blockingbuffer（0.5L）:Add2.5mgBovineserumalbumininTBSbuffertofinalvolume0.5L,keepat4°Ctopreventbacterialcontamination.⑼Developingreagent:1mlchlonoaphtholsolution（30mg/mlinmethanol）,add10mlmethanol,addTBSbufferto50mlandadd30ul30%H2O2.⑽Stainingbuffer:Add1gamidoblack18B（0.1%）,250mlisopropanol（25%）and100mlaceticacid（10%）todistilledwaterwithfinalvolume1L.⑾Destainingbuffer:Add350mlisopropanol（35%）and2mlaceticacid（2%）todistilledwaterwithfinalvolume1L.【Procedure】⒈.SeparationofProteinRunanelectrophoreticseparationofknownantigenicproteins.Themethodofseparationdecidedbythecharactersoftargetprotein,butforsufficientlytransferring,themostcommonmethodisSDS-PAGE.Afterseparation,removeuppersideofsamplewellswitharazorblade.Notchingbottomright-handcornerofgelfororientationandputgelintransferbufferuntilreadytouse.⒉.Electrotransfer⑴PreparationofmembraneCutapieceofPVDFmembrane（MilliporeImmobion-P#IPVH00010）accordingtothesizeofgel.Incubateinmethanolforabout1minonarockeratroomtemp.Removemethanolandequilibratemembranein1xtransferbufferuntilreadytouse.⑵Arrangegel-membranesandwichInashallowtray,openthetransfercassette.Putawell-soakedspongepadontheblackpieceofthetransfercassetteandawetted3MMpaperonthespongepad.Placethegelonthepaperandarrangewellsothatallairbubblesareremoved.LaythePVDFmembraneonthetopofgelandremoveanyairbubbles.Placeawettedsheetof3MMpaperoverthePVDFmembraneandremovethebubble.Coveredwiththesecondwell-soakedpad.Closethesandwichwiththewhitepieceofthecassette.Mountthesandwichinthetransfertank;puttheblacksidesneartheblacksideofthedevice.Fillthebuffertankwiththetransferbuffer.⑶Electrotransfer:Attachtheelectrodes.Setthepowersupplyto100V（constantvoltage）for1hat4°C.⒊.Immunodetection⑴MembranestainingDisconnecttransferapparatus,removetransfercassette,andpeel3MMpaperfrommembrane.Removethemembranetoasmallcontainer.Add10mlTBSbufferandwashforshorttime.Cutoutonestripewith5mmwidthandputinanothercleancontainer.Stainthisstripeinstainingbufferfor1min.Destainfor30minindestainingbuffertocheckwhetherproteinhasbeentransferredfromgeltomembraneornot.⑵MembraneblockingandwashingForotherpartofmembrane,pouroffTBSbuffer.Add3%blockingbuffer，rockgentlyforatleast1h.Pouroff3%blockingbufferandrinsebrieflywithTBSbufferthreetimes,5minutesforpertime.⑶FirstantibodyPouroffTBSbuffer.Addfirstantibodyatappropriatedilutionin10ml0.5%blockingbuffer.Rockgentlyforatleast1h;pourofffirstantibodysolutionfrommembraneandwashtwicefor10minuteswithTTBSbuffer.⑷SecondantibodyPouroffTTBSbuffer.Addsecondantibodyatappropriatedilutionin5ml0.5%blockingbuffer.Rockgentlyfor30min,pouroffsecondantibodysolutionfrommembraneandwashtwicefor10minuteswithTTBSbuffer.⑸DetectionPouroffTTBSbufferfrommembraneandadddevelopingreagent,RockPVDFgently,monitoringdevelopment.Whenthebandscanbeseenclearly,stopdevelopmentbywashingmembranewithdistilledwaterfor30minuteswith3changes.【Result】Checkthebandsonmembrane,thebandwithblue-purplecolorcorrespondingtothetargetprotein.實驗材料】1.實驗器材SDS/PAGE實驗相關材料；電轉移裝置；供電設備；PVDF膜（MilliporeImmobion-P#IPVH00010）；Whatman3MM紙；其他工具：鑷子、海綿墊、剪子、手套、小塑料或玻璃容器、淺盤。Detection2.實驗試劑⑴10x轉移緩沖溶液（1L）：30.3gTrizmabase（0.25M）,144g甘氨酸（1.92M）,加蒸餾水至1L,此時pH約為8.3，不必調(diào)整。⑵1x轉移緩沖溶液（2L）：在1.4L蒸餾水中加入400ml甲醇及200ml10x轉移緩沖溶液。⑶TBS緩沖溶液:將1.22gTris（10mM）和8.78gNaCl（150mM）加入到1L蒸餾水中，用HCl調(diào)節(jié)pH至7.5。⑷TTBSbuffer：在1LTBS緩沖溶液中加入0.5mlTween20（0.05%）。⑸一抗：兔抗待測蛋白抗體（多克隆抗體）。（6）二抗：辣根過氧化物酶標記羊抗兔。⑺3%封阻緩沖溶液（0.5L）：牛血清白蛋白15mg加入TBS緩沖溶液并定容至0.5L，過濾，在4°C保存以防止細菌污染。⑻0.5%封阻緩沖溶液（0.5L）：牛血清白蛋白2.5mg加入TTBS緩沖溶液并定容至0.5L，過濾，在4°C保存以防止細菌污染。⑼顯影試劑：1ml氯萘溶液（30mg/ml甲醇配置），加入10ml甲醇，加入TBS緩沖溶液至50ml，加入30ul30%H2O2。⑽染色液：1g氨基黑18B（0.1%），250ml異丙醇（25%）及100ml乙酸（10%）用蒸餾水定容至1L。⑾脫色液：將350ml異丙醇（35%）和20ml乙酸（2%）用蒸餾水定容至1L。[詳細]

  2018-09-27 10:01

  產(chǎn)品樣冊

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• 活性氧檢測試劑盒使用說明書

  活性氧檢測試劑盒使用說明書[詳細]

  2015-05-29 00:00

  應用文章

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• 雞ELISA 檢測試劑盒說明書

  雞ELISA 檢測試劑盒說明書[詳細]

  2016-03-16 00:00

  其它

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• 人ELISA試劑盒檢測說明書

  人(Human)白細胞介素6（IL-6）ELISA檢測試劑盒人ELISA試劑盒檢測說明書試驗原理IL-6試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知IL-6濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將IL-6和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中IL-6的濃度呈比例關系。人ELISA試劑盒檢測內(nèi)容及其配制：試劑盒成份96孔配置48孔配置96/48人份酶標板1塊板（96T）半塊（48T）塑料膜板蓋1塊半塊標準品：800pg/ml1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）空白對照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）標準品稀釋緩沖液1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）生物素標記的抗IL-6抗體1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）親和鏈酶素-HRP1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）人ELISA試劑盒檢測說明書?自備材料：蒸餾水。加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。人ELISA試劑盒檢測樣品收集、處理及保存方法：血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細胞上清液---1000×g離心10分鐘除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人ELISA試劑盒檢測說明書操作注意事項：試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。人ELISA試劑盒檢測安全性：避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。人ELISA試劑盒檢測試劑的準備：標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：800pg/ml（6號標準品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。400pg/ml（5號標準品）100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液200pg/ml（4號標準品）100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液100pg/ml（3號標準品）100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液50pg/ml（2號標準品）100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液25pg/ml（1號標準品）100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0pg/ml（空白對照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。人ELISA試劑盒檢測性能：1.靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細胞因子反應。3.重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。人ELISA試劑盒檢測操作步驟：使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育45分鐘。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育5分鐘。避免光照。取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。在450nm波長處測定各孔的OD值。人ELISA試劑盒檢測結果判斷與分析：1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的IL-6標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的IL-6含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度,再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。3、檢測值范圍：0-800pg/ml4、敏感度：1.0pg/ml[詳細]

  2018-09-14 10:00

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• 豬ELISA 檢測試劑盒說明書

  豬ELISA試劑盒檢測試劑盒說明書本試劑僅供研究使用標本：血清或血漿試驗原理：IL-8試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知IL-8濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將IL-8和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中IL-8的濃度呈比例關系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品：800pg/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進行稀稀空白對照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標準品稀釋緩沖液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素標記的抗IL-8抗體1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說明書進行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型自備材料1．蒸餾水。2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3．振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1．避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。2．實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1．試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。2．實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。3．不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6．洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7．底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8．加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9．按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備1．標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：800pg/ml（6號標準品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。400pg/ml（5號標準品）100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液200pg/ml（4號標準品）100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液100pg/ml（3號標準品）100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液50pg/ml（2號標準品）100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液25pg/ml（1號標準品）100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0pg/ml（空白對照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2．洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。2．根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。3．加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。4．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。5．每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。6．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。8．取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。9．在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標準品濃度（pg/ml）A800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F2525樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標準品以上的結果為非線性的，根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細胞因子反應。3.重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的IL-8標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的IL-8含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍：0-800pg/ml4、敏感度：1.0pg/ml[詳細]

  2018-09-14 10:01

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• ELISA檢測試劑盒通用說明書

  ELISA檢測試劑盒試驗原理：Dopamine試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知Dopamine濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將Dopamine和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中Dopamine的濃度呈比例關系。自備材料蒸餾水。加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。ELISA檢測試劑盒安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。操作步驟使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi)。加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標準品以上的結果為非線性的，根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細胞因子反應。3.重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。ELISA檢測試劑盒結果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的Dopamine標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的Dopamine含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍：0-800nmol/L4、敏感度：1.0nmol/L[詳細]

  2018-09-19 10:00

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• 血清白蛋白試劑盒檢測說明書

  血清白蛋白試劑盒檢測說明書試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T1ng/ml-45ng/ml使用目的：本試劑盒用于測定牛細胞懸液樣本中血清白蛋白（BSA）含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中牛血清白蛋白（BSA）水平。用純化的牛血清白蛋白（BSA）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入血清白蛋白（BSA），再與HRP標記的血清白蛋白（BSA）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血清白蛋白（BSA）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中牛血清白蛋白（BSA）濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品（80ng/ml）0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。40ng/ml5號標準品150l的原倍標準品加入150l標準品稀釋液20ng/ml4號標準品150l的5號標準品加入150l標準品稀釋液10ng/ml3號標準品150l的4號標準品加入150l標準品稀釋液5ng/ml2號標準品150l的3號標準品加入150l標準品稀釋液2.5ng/ml1號標準品150l的2號標準品加入150l標準品稀釋液2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50l，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l，然后再加待測樣品10l（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50l，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50l，再加入顯色劑B50l，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.10.終止：每孔加終止液50l，終止反應（此時藍色立轉黃色）。11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結：計算以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。注意事項1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-10-09 10:00

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• 羥基脫氧鳥苷試劑盒檢測說明書

  羥基脫氧鳥苷試劑盒檢測說明書試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T3ng/L-100ng/L使用目的：本試劑盒用于測定人外周血和臍血樣本中8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)水平。用純化的人8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)，再與HRP標記的8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品（200ng/L）0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。100ng/L5號標準品150l的原倍標準品加入150l標準品稀釋液50ng/L4號標準品150l的5號標準品加入150l標準品稀釋液25ng/L3號標準品150l的4號標準品加入150l標準品稀釋液12.5ng/L2號標準品150l的3號標準品加入150l標準品稀釋液6.25ng/L1號標準品150l的2號標準品加入150l標準品稀釋液2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50l，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l，然后再加待測樣品10l（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50l，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50l，再加入顯色劑B50l，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.10.終止：每孔加終止液50l，終止反應（此時藍色立轉黃色）。11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結：計算以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。注意事項1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-10-09 10:00

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• 流行性出血熱病毒試劑盒檢測說明書

  流行性出血熱病毒試劑盒檢測說明書試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。96T使用目的：本試劑盒用于測定鹿血清、血漿及相關液體樣本中流行性出血熱病毒(EHFV)表達。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中鹿流行性出血熱病毒(EHFV)表達。用純化的鹿流行性出血熱病毒(EHFV)抗體包被微孔板，制成固相抗體，可與樣品中流行性出血熱病毒(EHFV)相結合，經(jīng)洗滌除去未結合的抗原和其他成分后再與HRP標記的流行性出血熱病毒(EHFV)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），與CUTOFF值相比較，從而判定標本中鹿流行性出血熱病毒(EHFV)的存在與否。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8陽性對照0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9陰性對照0.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.編號：將樣品對應微孔按序編號，每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50l。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40l，然后再加待測樣品10l。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50l，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50l，再加入顯色劑B50l，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50l，終止反應（此時藍色立轉黃色）。11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結：計算和結果判定：試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00;陰性對照平均值≤0.10臨界值（CUTOFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15陰性判定：樣品OD值<臨界值（CUTOFF）者為流行性出血熱病毒(EHFV)陰性陽性判定：樣品OD值≥臨界值（CUTOFF）者為流行性出血熱病毒(EHFV)陽性。注意事項1．操作嚴格按照說明書進行，本試劑不同批號組分不得混用。2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。3．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。4．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5．底物請避光保存。6．試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準，使用雙波長檢測時，參考波長為630nm7．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為2M的硫酸，使用時必須注意安全。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-10-09 10:00

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• 雌酮（E1）檢測試劑盒說明書

  雌酮(E1)檢測試劑盒適用生物General，通用雌酮(E1)檢測試劑盒檢測范圍24.69-2000pg/mL靈敏度8.86pg/mL樣本類型Serum,plasmaandotherbiologicalfluids.實驗時長2.5h實驗方法競爭YZ法雌酮(E1)檢測試劑盒規(guī)格96T雌酮(E1)檢測試劑盒ELISAKitforEstrone(E1)FORINVITROANDRESEARCHUSEONLY,NOTFORUSEINCLINICALDIAGNOSTICPROCEDURES!OrganismspeciesGeneralProductNo.CEB003GeSampletypeSerum,plasmaandotherbiologicalfluids.Format96-wellstripplateAssaylength2.5hoursDetectionrange24.69-2000pg/mLThestandardcurveconcentrationsusedfortheELISA’swere2000pg/mL,666.67pg/mL,222.22pg/mL,74.07pg/mL,24.69pg/mLSensitivityTheminimumdetectabledoseofthiskitistypicallylessthan8.86pg/mL.SpecificityThisassayhashighsensitivityandexcellentspecificityfordetectionofEstrone(E1).Nosignificantcross-reactivityorinterferencebetweenEstrone(E1)andanalogueswasobserved.RecoveryMatriceslistedbelowwerespikedwithcertainlevelofrecombinantEstrone(E1)andtherecoveryrateswerecalculatedbycomparingthemeasuredvaluetotheexpectedamountofEstrone(E1)insamples.MatrixRecoveryrange(%)Average(%)serum(n=5)80-9085EDTAplasma(n=5)97-105102heparinplasma(n=5)96-105101PrecisionIntra-assayPrecision(Precisionwithinanassay):3sampleswithlow,middleandhighlevelEstrone(E1)weretested20timesononeplate,respectively.Inter-assayPrecision(Precisionbetweenassays):3sampleswithlow,middleandhighlevelEstrone(E1)weretestedon3differentplates,8replicatesineachplate.CV(%)=SD/meanX100Intra-Assay:CV<10%Inter-Assay:CV<12%LinearityThelinearityofthekitwasassayedbytestingsamplesspikedwithappropriateconcentrationofEstrone(E1)andtheirserialdilutions.Theresultsweredemonstratedbythepercentageofcalculatedconcentrationtotheexpected.Sample1:21:41:81:16serum(n=5)93-101%84-98%84-98%87-96%EDTAplasma(n=5)92-105%93-101%79-90%91-99%heparinplasma(n=5)88-101%91-102%83-99%93-101%StabilityThestabilityofkitisdeterminedbythelossrateofactivity.Thelossrateofthiskitislessthan5%withintheexpirationdateunderappropriatestoragecondition.Tominimizeextrainfluenceontheperformance,operationproceduresandlabconditions,especiallyroomtemperature,airhumidity,incubatortemperature首ldbestrictlycontrolled.Itisalsostronglysuggestedthatthewholeassayisperformedbythesameoperatorfromthebeginningtotheend.ReagentsandmaterialsprovidedReagentsQuantityReagentsQuantityPre-coated,readytouse96-wellstripplate1Platesealerfor96wells4Standard2StandardDiluent1×20mLDetectionReagentA1AssayDiluentA1×12mLDetectionReagentB1×120μLAssayDiluentB1×12mLReagentDiluent1×300μLStopSolution1×6mLTMBSubstrate1×9mLInstructionmanual1WashBuffer(30×concentrate)1×20mLAssayproceduresummary1.Prepareallreagents,samplesandstandards;2.Add50μLstandardorsampletoeachwell.Andthenadd50μLpreparedDetectionReagentAimmediately.Shakeandmix.Incubate1hourat37oC;3.Aspirateandwash3times;4.Add100μLpreparedDetectionReagentB.Incubate30minutesat37oC;5.Aspirateandwash5times;6.Add90μLSubstrateSolution.Incubate15-25minutesat37oC;7.Add50μLStopSolution.Readat450nmimmediately.TestprincipleThisassayemploysthecompetitiveinhibitionenzymeimmunoassaytechnique.AmonoclonalantibodyspecifictoEstrone(E1)hasbeenpre-coatedontoamicroplate.AcompetitiveinhibitionreactionislaunchedbetweenbiotinlabeledEstrone(E1)andunlabeledEstrone(E1)(Standardsorsamples)withthepre-coatedantibodyspecifictoEstrone(E1).Afterincubationtheunboundconjugateiswashedoff.Next,avidinconjugatedtoHorseradishPeroxidase(HRP)isaddedtoeachmicroplatewellandincubated.TheamountofboundHRPconjugateisreverseproportionaltotheconcentrationofEstrone(E1)inthesample.Afteradditionofthesubstratesolution,theintensityofcolordevelopedisreverseproportionaltotheconcentrationofEstrone(E1)inthesample.[詳細]

  2018-10-31 10:00

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• 三磷酸肌醇（IP3）試劑盒檢測說明書

  三磷酸肌醇(IP3)試劑盒檢測說明書試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T1.2ng/ml-45ng/ml使用目的：本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中三磷酸肌醇(IP3)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠三磷酸肌醇(IP3)水平。用純化的小鼠三磷酸肌醇(IP3)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入三磷酸肌醇(IP3)，再與HRP標記的三磷酸肌醇(IP3)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的三磷酸肌醇(IP3)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中小鼠三磷酸肌醇(IP3)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品（80ng/ml）0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。40ng/ml5號標準品150l的原倍標準品加入150l標準品稀釋液20ng/ml4號標準品150l的5號標準品加入150l標準品稀釋液10ng/ml3號標準品150l的4號標準品加入150l標準品稀釋液5ng/ml2號標準品150l的3號標準品加入150l標準品稀釋液2.5ng/ml1號標準品150l的2號標準品加入150l標準品稀釋液2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50l，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l，然后再加待測樣品10l（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50l，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50l，再加入顯色劑B50l，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.10.終止：每孔加終止液50l，終止反應（此時藍色立轉黃色）。11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結：計算以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。注意事項1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2024-09-28 07:01

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• 凝血因子Ⅺ（FⅪ）試劑盒檢測說明書

  凝血因子Ⅺ（FⅪ）試劑盒檢測說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T0.1ng/ml-5ng/ml使用目的：本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中凝血因子Ⅺ（FⅪ）含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠凝血因子Ⅺ（FⅪ）水平。用純化的小鼠凝血因子Ⅺ（FⅪ）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入凝血因子Ⅺ（FⅪ），再與HRP標記的凝血因子Ⅺ（FⅪ）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的凝血因子Ⅺ（FⅪ）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中小鼠凝血因子Ⅺ（FⅪ）濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品（8ng/ml）0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。4ng/ml5號標準品150l的原倍標準品加入150l標準品稀釋液2ng/ml4號標準品150l的5號標準品加入150l標準品稀釋液1ng/ml3號標準品150l的4號標準品加入150l標準品稀釋液0.5ng/ml2號標準品150l的3號標準品加入150l標準品稀釋液0.25ng/ml1號標準品150l的2號標準品加入150l標準品稀釋液IBL2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50l，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l，然后再加待測樣品10l（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50l，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50l，再加入顯色劑B50l，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.10.終止：每孔加終止液50l，終止反應（此時藍色立轉黃色）。11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結：計算以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。注意事項1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2024-09-28 07:01

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• 肉毒素A說明書試劑盒檢測說明

  肉毒素A說明書試劑盒檢測說明本試劑盒僅供研究使用。96T使用目的：本試劑盒用于測定血清、血漿及相關液體樣本中肉毒素A表達。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中肉毒素A表達。用純化的肉毒素A抗體包被微孔板，制成固相抗體，可與樣品中肉毒素A相結合，經(jīng)洗滌除去未結合的抗原和其他成分后再與HRP標記的肉毒素A抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），與CUTOFF值相比較，從而判定標本中肉毒素A的存在與否。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8陽性對照0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9陰性對照0.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.編號：將樣品對應微孔按序編號，每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50l。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40l，然后再加待測樣品10l。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50l，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50l，再加入顯色劑B50l，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50l，終止反應（此時藍色立轉黃色）。11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結：計算和結果判定：試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00;陰性對照平均值≤0.10臨界值（CUTOFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15陰性判定：樣品OD值<臨界值（CUTOFF）者為肉毒素A陰性陽性判定：樣品OD值≥臨界值（CUTOFF）者為肉毒素A陽性。注意事項1．操作嚴格按照說明書進行，本試劑不同批號組分不得混用。2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。3．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。4．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5．底物請避光保存。6．試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準，使用雙波長檢測時，參考波長為630nm7．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為2M的硫酸，使用時必須注意安全。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2024-09-28 07:02

  產(chǎn)品樣冊

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