本文由 艾普拜生物科技（蘇州）有限公司 整理匯編

2024-09-30 01:34 848閱讀次數(shù)

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• 定量western blot ：為什么需要驗(yàn)證抗體

  驗(yàn)證抗體對(duì)于WB結(jié)果的一致性和重復(fù)性是至關(guān)重要的，即確認(rèn)抗體能特異性識(shí)別感興趣的蛋白，抗體與其他蛋白的交叉反應(yīng)性情況。在您的論文提交給期刊發(fā)表之前，經(jīng)常需要驗(yàn)證抗體的特異性，但并非所有人都花時(shí)間進(jìn)行驗(yàn)證?；蛘吆芏嗳硕颊J(rèn)為他們使用抗體進(jìn)行了免疫共沉淀驗(yàn)證，因而不需要再通過蛋白質(zhì)印跡進(jìn)行驗(yàn)證。然而，抗體與抗原的親和性高度依賴于實(shí)驗(yàn)條件，因此，驗(yàn)證您的試驗(yàn)方法中的條件適用于抗體與抗原的結(jié)合是十分重要的。在《JBC》雜志中關(guān)于抗體驗(yàn)證信息如下:[詳細(xì)]

  2024-09-30 01:34

  實(shí)驗(yàn)操作

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• 蛋白質(zhì)印跡分析（Western Blot Analysis）

  蛋白質(zhì)印跡分析（WesternBlotAnalysis）【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹苛私獾鞍踪|(zhì)印跡法的基本原理及其操作和應(yīng)用?！緦?shí)驗(yàn)原理】蛋白質(zhì)印跡法又稱為免疫印跡法，這是一種可以檢測(cè)固定在固相載體上蛋白質(zhì)的免疫化學(xué)技術(shù)方法。待測(cè)蛋白既可以是粗提物也可以經(jīng)過一定的分離和純化,另外這項(xiàng)技術(shù)的應(yīng)用需要利用待測(cè)蛋白的單克隆或多克隆抗體進(jìn)行識(shí)別。如圖所示，可溶性抗原，也就是待測(cè)蛋白首先要根據(jù)其性質(zhì)，如分子量，分子大小，電荷以及其等電點(diǎn)等采用不同的電泳方法進(jìn)行分離；通過電流將凝膠中的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到聚偏二氟乙烯膜上；利用抗體（一抗）與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的原理，以抗體作為探針釣取目的蛋白。值得注意的是在加入一抗前應(yīng)首先加入非特異性蛋白，如牛血清白蛋白對(duì)膜進(jìn)行“封阻”而防止抗體與膜的非特異性結(jié)合。經(jīng)電泳分離后的蛋白往往需再利用電泳方法將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到固相載體上,我們把這個(gè)過程稱為電泳印跡。常用的兩種電轉(zhuǎn)移方法分別為:1.半干法:凝膠和固相載體被夾在用緩沖溶液浸濕的濾紙之間,通電時(shí)間為10分鐘~30分鐘。2.濕法：凝膠和固相載體夾心浸放在轉(zhuǎn)移緩沖溶液中，轉(zhuǎn)移時(shí)間可從45分鐘延長(zhǎng)到過夜進(jìn)行。由于濕法的使用彈性更大并且沒有明顯浪費(fèi)更多的時(shí)間和原料，因此我們?cè)谶@里只描述濕法的基本操作過程。對(duì)于目的蛋白的識(shí)別需要采用能夠識(shí)別一抗的第二抗體。該抗體往往是購(gòu)買的成品，已經(jīng)被結(jié)合或標(biāo)記了特定的試劑，如辣根過氧化物酶。這種標(biāo)記是利用辣根過氧化物酶所催化的一個(gè)比色反應(yīng)，該反應(yīng)的產(chǎn)物有特定的顏色且固定在固相載體上，容易鑒別。因此可通過對(duì)二抗的識(shí)別而識(shí)別一抗，進(jìn)而判斷出目標(biāo)蛋白所在的位置。其他的識(shí)別系統(tǒng)包括堿性磷酸酶系統(tǒng)和125I標(biāo)記系統(tǒng)?！緦?shí)驗(yàn)操作】⒈.蛋白質(zhì)的分離根據(jù)目的蛋白的性質(zhì)，利用電泳方法將其進(jìn)行分離。為提高電轉(zhuǎn)移的效率，通常采用SDS/PAGE技術(shù)。分離實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，首先將樣品墻的上邊緣用小刀去除，然后在膠板的右上角切一個(gè)小口以便定位，小心放入轉(zhuǎn)移緩沖溶液中待用。⒉.電轉(zhuǎn)移⑴準(zhǔn)備PVDF膜根據(jù)膠的大小剪出一片PVDF膜，膜的大小應(yīng)略微小于膠的大小。將膜置于甲醇中浸泡1分鐘，再移至轉(zhuǎn)移緩沖溶液中待用。夾心放置順序⑵制作膠膜夾心在一淺盤中打開轉(zhuǎn)移盒，將一個(gè)預(yù)先用轉(zhuǎn)移緩沖溶液浸泡過的海綿墊放在轉(zhuǎn)移盒的黑色篩孔板上，在海綿墊的上方放置經(jīng)轉(zhuǎn)移緩沖溶液浸濕的3MM紙，小心地將膠板放在3MM紙上，并注意排除氣泡。將PVDF膜放在膠的上方同時(shí)注意排除氣泡，再在膜的上方放上一張同樣用轉(zhuǎn)移緩沖溶液浸濕過的3MM紙并趕出氣泡，放置另一張浸泡過的海綿墊，關(guān)閉轉(zhuǎn)移盒。將轉(zhuǎn)移盒按照正確的方向放入轉(zhuǎn)移槽中，轉(zhuǎn)移盒的黑色篩孔板貼近轉(zhuǎn)移槽的黑色端，轉(zhuǎn)移盒的白色篩孔板貼近轉(zhuǎn)移槽的白色端，填滿轉(zhuǎn)移緩沖溶液同時(shí)防止出現(xiàn)氣泡。⑶電轉(zhuǎn)移連接電源,在4°C條件下維持恒壓100v，1小時(shí)⒊.免疫檢測(cè)⑴膜染色斷開電源，將轉(zhuǎn)移盒從轉(zhuǎn)移槽中移出，將轉(zhuǎn)移盒的各個(gè)部分分開。用鑷子將PVDF膜小心放入一個(gè)干凈的容器中，用TBS緩沖溶液進(jìn)行短暫清洗，從膜上剪下一條寬約5mm的膜放入另一個(gè)干凈的容器中。將這條膜在染色液中浸泡1分鐘，然后在脫色液中脫色30分鐘,確定蛋白質(zhì)已經(jīng)轉(zhuǎn)移到PVDF膜上。⑵膜的封閉和清洗對(duì)于沒有進(jìn)行染色的膜，首先倒出TBS緩沖溶液,加入3%封閉緩沖溶液,輕輕搖動(dòng)至少1小時(shí)。倒掉3%封閉緩沖溶液，并用TBS緩沖溶液清洗3次,每次5分鐘。⑶一抗倒掉TBS緩沖溶液，加入10ml0.5%封閉緩沖溶液及適量的一抗，輕輕搖動(dòng)1小時(shí)以上。從容器中倒出一抗及封閉緩沖溶液，用TTBS緩沖溶液清洗兩次，每次10分鐘。⑷二抗倒出TTBS緩沖溶液，加入5ml0.5%封閉緩沖溶液及適量的二抗。輕輕搖動(dòng)30分鐘，倒出二抗及封閉緩沖溶液，用TTBS緩沖溶液清洗兩次，每次10分鐘。⑸檢測(cè)倒掉TTBS緩沖溶液，并加入顯影劑，輕輕搖動(dòng)PVDF膜，觀察顯影情況，當(dāng)能夠清晰的看到顯色帶時(shí)，用蒸餾水在30分鐘內(nèi)分三次清洗PVDF膜以終止顯色反應(yīng)的繼續(xù)進(jìn)行。【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】檢查膜上顯色結(jié)果，藍(lán)紫色帶所對(duì)應(yīng)的即是目標(biāo)蛋白的位置。WesternBlotAnalysis【Purpose】ComprehendthetheoryofWesternblotting;understanditsbasicmanipulationandapplication.【Principle】WesternblottingisalsocalledImmunoblotting.Itisakindofimmunochemicaltechniqueswhichisusedtodetectaproteinimmobilizedonamatrix.Thetargetproteincanbeinacrudeextractoramorepurifiedpreparationandthemonoclonalorpolyclonalantibodyagainstthisproteinisnecessarytohelpustorecognizetheantigen.AsintheFigure,solubleantigens（thetargetprotein）maybeseparatedbyelectrophoresisbasedonitsmolecularweight（SDS/PAGE）,sizeandcharge（nondenaturatinggelelectrophoresisorisoelectricpoint（isoelectricfocusing）.Aftertheseparation,theproteinsaretransferredfromthegeltoaPVDFmembrane.Onceonthemembraneantibodies（firstantibodies）canbeusedtoprobeforthepresenceofparticularproteinbecauseofthespecificallybindingofantigenwithagainstit.Non-specificbindingsitecanbe“blocked”usingothernon-specificproteinsuchasbovineserumalbuminbeforeaddingfirstantibodytoavoidnon-specificbinding.Proteintransferismostcommonlyaccomplishedbyelectrophoresis，Thisprocedureiscalledelectrophoreticblotting.Thetwocommonelectrophoreticmethodsare:⒈Semi-dryblotting,inwhichthegelandimmobilizingmatrixaresandwichedbetweenbuffer-wettedfilterpapersthroughwhichacurrentisappliedfor10-30minutes.⒉Wet（tank）blotting,inwhichthegel-matrixsandwichissubmergedintransferbufferforelectrophoresis,whichmaytakeaslittleas45minutesormaybeallowedtocontinueovernightWeonlydescribewetblottinghere,sinceitpermitsgreaterflexibilitywithoutbeingsignificantlymoreexpensiveintimeormaterials.Thedetectionoftargetproteinisusingasecondantibody,whichcanrecognizethefirstantibody.Typically,thesecondantibodyispurchasedalreadyconjugatedtoalabe領(lǐng)agentsuchastheenzymehorseradishperoxidase.Thismarkeristhenvisualizedbyacolorimetricreactioncatalyzedbytheenzymewhichyieldsacoloredproductthatremainsfixedtothemembrane.Thus,itispossibletorecognizefirstantibodythroughrecognizingsecondantibody,andthenidentifythepositionoftargetprotein.Otherdetectionsystemsincludealkalinephosphataseand125Ilabels.【Materials】⒈Apparatus:ApparatusofSDS-PAGE,ElectroblottingApparatus,Powersupply,PVDFmembrane（MilliporeImmobion-P#IPVH00010）,Whatman3MMpaper,AdditionalTools:Forceps,spongepad,scissor,gloves,smallplasticorglasscontainer,Shallowtray.⒉Reagents:⑴10xtransferbuffer（1L）:30.3gTrizmabase（0.25M）,144gGlycine（1.92M）,pH首ldbe8.3;withoutadjustment.⑵1xtransferbuffer（2L）:400mlMethanol,200ml10xtransferbuffer,1400mlwater.⑶TBSbuffer:Add1.22gTris（10mM）and8.78gNaCl（150mM）to1LdistilledwaterandadjustpHto7.5withHCl.⑷TTBSbuffer:1LTBSbufferadd0.5mlTween20（0.05%）.⑸Firstantibody:antibodyagainstthetargetprotein.⑹Secondantibody:goatanti-rabbit-HRP（horseradishperoxidase）.⑺3%Blockingbuffer（0.5L）:Add15mgBovineserumalbumininTBSbuffertofinalvolume0.5L,keepat4°Ctopreventbacterialcontamination.⑻0.5%Blockingbuffer（0.5L）:Add2.5mgBovineserumalbumininTBSbuffertofinalvolume0.5L,keepat4°Ctopreventbacterialcontamination.⑼Developingreagent:1mlchlonoaphtholsolution（30mg/mlinmethanol）,add10mlmethanol,addTBSbufferto50mlandadd30ul30%H2O2.⑽Stainingbuffer:Add1gamidoblack18B（0.1%）,250mlisopropanol（25%）and100mlaceticacid（10%）todistilledwaterwithfinalvolume1L.⑾Destainingbuffer:Add350mlisopropanol（35%）and2mlaceticacid（2%）todistilledwaterwithfinalvolume1L.【Procedure】⒈.SeparationofProteinRunanelectrophoreticseparationofknownantigenicproteins.Themethodofseparationdecidedbythecharactersoftargetprotein,butforsufficientlytransferring,themostcommonmethodisSDS-PAGE.Afterseparation,removeuppersideofsamplewellswitharazorblade.Notchingbottomright-handcornerofgelfororientationandputgelintransferbufferuntilreadytouse.⒉.Electrotransfer⑴PreparationofmembraneCutapieceofPVDFmembrane（MilliporeImmobion-P#IPVH00010）accordingtothesizeofgel.Incubateinmethanolforabout1minonarockeratroomtemp.Removemethanolandequilibratemembranein1xtransferbufferuntilreadytouse.⑵Arrangegel-membranesandwichInashallowtray,openthetransfercassette.Putawell-soakedspongepadontheblackpieceofthetransfercassetteandawetted3MMpaperonthespongepad.Placethegelonthepaperandarrangewellsothatallairbubblesareremoved.LaythePVDFmembraneonthetopofgelandremoveanyairbubbles.Placeawettedsheetof3MMpaperoverthePVDFmembraneandremovethebubble.Coveredwiththesecondwell-soakedpad.Closethesandwichwiththewhitepieceofthecassette.Mountthesandwichinthetransfertank;puttheblacksidesneartheblacksideofthedevice.Fillthebuffertankwiththetransferbuffer.⑶Electrotransfer:Attachtheelectrodes.Setthepowersupplyto100V（constantvoltage）for1hat4°C.⒊.Immunodetection⑴MembranestainingDisconnecttransferapparatus,removetransfercassette,andpeel3MMpaperfrommembrane.Removethemembranetoasmallcontainer.Add10mlTBSbufferandwashforshorttime.Cutoutonestripewith5mmwidthandputinanothercleancontainer.Stainthisstripeinstainingbufferfor1min.Destainfor30minindestainingbuffertocheckwhetherproteinhasbeentransferredfromgeltomembraneornot.⑵MembraneblockingandwashingForotherpartofmembrane,pouroffTBSbuffer.Add3%blockingbuffer，rockgentlyforatleast1h.Pouroff3%blockingbufferandrinsebrieflywithTBSbufferthreetimes,5minutesforpertime.⑶FirstantibodyPouroffTBSbuffer.Addfirstantibodyatappropriatedilutionin10ml0.5%blockingbuffer.Rockgentlyforatleast1h;pourofffirstantibodysolutionfrommembraneandwashtwicefor10minuteswithTTBSbuffer.⑷SecondantibodyPouroffTTBSbuffer.Addsecondantibodyatappropriatedilutionin5ml0.5%blockingbuffer.Rockgentlyfor30min,pouroffsecondantibodysolutionfrommembraneandwashtwicefor10minuteswithTTBSbuffer.⑸DetectionPouroffTTBSbufferfrommembraneandadddevelopingreagent,RockPVDFgently,monitoringdevelopment.Whenthebandscanbeseenclearly,stopdevelopmentbywashingmembranewithdistilledwaterfor30minuteswith3changes.【Result】Checkthebandsonmembrane,thebandwithblue-purplecolorcorrespondingtothetargetprotein.實(shí)驗(yàn)材料】1.實(shí)驗(yàn)器材SDS/PAGE實(shí)驗(yàn)相關(guān)材料；電轉(zhuǎn)移裝置；供電設(shè)備；PVDF膜（MilliporeImmobion-P#IPVH00010）；Whatman3MM紙；其他工具：鑷子、海綿墊、剪子、手套、小塑料或玻璃容器、淺盤。Detection2.實(shí)驗(yàn)試劑⑴10x轉(zhuǎn)移緩沖溶液（1L）：30.3gTrizmabase（0.25M）,144g甘氨酸（1.92M）,加蒸餾水至1L,此時(shí)pH約為8.3，不必調(diào)整。⑵1x轉(zhuǎn)移緩沖溶液（2L）：在1.4L蒸餾水中加入400ml甲醇及200ml10x轉(zhuǎn)移緩沖溶液。⑶TBS緩沖溶液:將1.22gTris（10mM）和8.78gNaCl（150mM）加入到1L蒸餾水中，用HCl調(diào)節(jié)pH至7.5。⑷TTBSbuffer：在1LTBS緩沖溶液中加入0.5mlTween20（0.05%）。⑸一抗：兔抗待測(cè)蛋白抗體（多克隆抗體）。（6）二抗：辣根過氧化物酶標(biāo)記羊抗兔。⑺3%封阻緩沖溶液（0.5L）：牛血清白蛋白15mg加入TBS緩沖溶液并定容至0.5L，過濾，在4°C保存以防止細(xì)菌污染。⑻0.5%封阻緩沖溶液（0.5L）：牛血清白蛋白2.5mg加入TTBS緩沖溶液并定容至0.5L，過濾，在4°C保存以防止細(xì)菌污染。⑼顯影試劑：1ml氯萘溶液（30mg/ml甲醇配置），加入10ml甲醇，加入TBS緩沖溶液至50ml，加入30ul30%H2O2。⑽染色液：1g氨基黑18B（0.1%），250ml異丙醇（25%）及100ml乙酸（10%）用蒸餾水定容至1L。⑾脫色液：將350ml異丙醇（35%）和20ml乙酸（2%）用蒸餾水定容至1L。[詳細(xì)]

  2018-09-27 10:01

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 使用 ScanLater Western Blot protein Ladder 估算蛋白分子量

  使用 ScanLater Western Blot protein Ladder 估算蛋白分子量[詳細(xì)]

  2024-09-27 05:16

  應(yīng)用文章

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• 為什么需要相位修正

  為什么需要相位修正[詳細(xì)]

  2008-10-23 00:00

  應(yīng)用文章

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• 為什么需要在線氣體分析儀

  為什么需要在線氣體分析儀[詳細(xì)]

  2015-09-09 00:00

  期刊論文

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• 一文教你如何在Western Blot中選擇一抗？

  說到免疫印跡Z重要的就是抗體的選擇了。在免疫印跡中我們會(huì)用到一抗和二抗等抗體，本文著重給大家介紹一下一抗的選擇。 一抗就是能和特異性抗原特異性結(jié)合的蛋白。種類包括單克隆抗體和多克隆抗體。抗體因其種屬來源不同可以分為多種類型，如鼠抗，兔抗，羊抗等等，那么在使用時(shí)我們應(yīng)該怎么選擇呢？ 檢測(cè)任何一種目的蛋白都有不止一種抗體可供選擇，為了在試驗(yàn)過程中盡快找到Z適合的抗體，往往需要考慮以下幾種因素： 1.確定自己的實(shí)驗(yàn)類型。如WB、IHC、ICC、ELASA等。一般的抗體說明書上都會(huì)給出該抗體適用于哪一種分析類型。 2. 單克隆or多克隆抗體的選擇。一般單克隆抗體特異性強(qiáng)，但親和力相對(duì)小，檢測(cè)抗原靈敏度相對(duì)就低；而多克隆抗體特異性稍弱，但抗體的親和力強(qiáng)，靈敏度高，但極易出現(xiàn)非特異性條帶。 3.確定自己的實(shí)驗(yàn)樣本的結(jié)構(gòu)信息。不同的抗體是由不同的免疫原（全長(zhǎng)蛋白、蛋白片斷、多肽、全有機(jī)體或細(xì)胞等）免疫宿主而制備得來，抗體說明書一般都有免疫原的描述，如果檢測(cè)的樣本是蛋白片斷或蛋白全長(zhǎng)的某一區(qū)域，則必須選擇用含此片段結(jié)構(gòu)域的免疫原制備出的抗體。還有一點(diǎn)就是樣本的制備過程，有些抗體要求樣本經(jīng)過某些特殊處理[詳細(xì)]

  2019-11-18 17:12

  實(shí)驗(yàn)操作

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• 數(shù)顯推拉力計(jì)為什么需要校準(zhǔn)？

  就目前來看，產(chǎn)品結(jié)構(gòu)更新?lián)Q代是行業(yè)持續(xù)發(fā)展的源泉。隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，數(shù)顯推拉力計(jì)已由傳統(tǒng)的工業(yè)領(lǐng)域，如治金、衡器、包裝等行業(yè)向許多邊緣及交叉領(lǐng)域方面拓展，如汽車檢測(cè)及自控、橋梁及公路檢測(cè)、織布機(jī)、化纖制造、建材試驗(yàn)等領(lǐng)域發(fā)展，這些行業(yè)不斷增長(zhǎng)的需求，要求數(shù)顯推拉力計(jì)新品不斷涌現(xiàn)。為什么有時(shí)候數(shù)顯推拉力計(jì)要校準(zhǔn)，對(duì)數(shù)顯推拉力計(jì)不懂的朋友可能會(huì)這樣問，我總結(jié)出幾點(diǎn)原因，請(qǐng)大家繼續(xù)往下看：數(shù)顯推拉力計(jì)使用時(shí)，在緯度跨越比較大的時(shí)候，重力加速度g就會(huì)隨著緯度和高度產(chǎn)生變化，蕞后稱出的值會(huì)有差別。這就需要通過校準(zhǔn)來消除重力加速度g對(duì)質(zhì)量m的影響。雖然我們開機(jī)時(shí)，數(shù)顯推拉力計(jì)顯示的是零點(diǎn)，不過這時(shí)候測(cè)量出的數(shù)據(jù)我們不能確定是否符合極ng確度測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)，只能說明數(shù)顯推拉力計(jì)零位的穩(wěn)定性是合格的。數(shù)顯推拉力計(jì)的位置移動(dòng)、存放時(shí)間和環(huán)境變化都會(huì)影響數(shù)顯推拉力計(jì)的極ng確測(cè)量，所以在使用數(shù)顯推拉力計(jì)前都要進(jìn)行校準(zhǔn)的操作。我們常說的克(g)，公斤(kg)，噸(t)，等單位是質(zhì)量單位，數(shù)顯推拉力計(jì)的原理造成稱出的實(shí)際上是重量，G=mg，G為重量，m為質(zhì)量，g為重力加速度。另外，不同季節(jié)的外界溫度也會(huì)使數(shù)顯推拉力計(jì)的讀數(shù)發(fā)生偏差，校準(zhǔn)可以蕞大限度的消除這些偏差校準(zhǔn)主要分為內(nèi)部校準(zhǔn)(內(nèi)校)和外部校準(zhǔn)(外校)兩種。外部校準(zhǔn):指使用數(shù)顯推拉力計(jì)外部的標(biāo)準(zhǔn)器具校正天平；內(nèi)部校準(zhǔn)：指數(shù)顯推拉力計(jì)內(nèi)部安裝有校準(zhǔn)零件。內(nèi)部校準(zhǔn)分全自動(dòng)及手動(dòng)校準(zhǔn)。全自動(dòng)校準(zhǔn)的數(shù)顯推拉力計(jì)一般只需按一個(gè)按鍵，即可自動(dòng)完成校準(zhǔn)步驟。手動(dòng)內(nèi)校其實(shí)與外校區(qū)別不大，另外補(bǔ)充提示：數(shù)顯推拉力計(jì)通常預(yù)熱半小時(shí)以上再校準(zhǔn)效果蕞好。[詳細(xì)]

  2018-11-24 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 如何對(duì)化學(xué)發(fā)光Western Blot (1D 和2D) 進(jìn)行高質(zhì)量的成

  如何對(duì)化學(xué)發(fā)光Western Blot (1D 和2D) 進(jìn)行高質(zhì)量的成[詳細(xì)]

  2024-09-15 22:18

  其它

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• Western Blot結(jié)果出乎意料，有可能是轉(zhuǎn)印海綿墊惹的禍

  轉(zhuǎn)印問題的常見根源是三明治結(jié)構(gòu)的松緊度。三明治結(jié)構(gòu)一定要緊！請(qǐng)定期更換轉(zhuǎn)印海綿墊，以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。使用額外的濾紙來填補(bǔ)海綿的磨損，可能會(huì)導(dǎo)致傳輸不一致。 我們都會(huì)定期更換海綿墊，因?yàn)樗鼈儠?huì)吸收污染物，隨著時(shí)間的推移，轉(zhuǎn)印海綿墊也會(huì)被污染。使用干凈的海綿墊對(duì)熒光應(yīng)用尤為關(guān)鍵，因?yàn)檫@些污染物會(huì)產(chǎn)生自發(fā)熒光，從而導(dǎo)致高背景。 [詳細(xì)]

  2024-09-30 01:24

  實(shí)驗(yàn)操作

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• 為什么高科技紡織工程需要掃描電鏡分析

  在新石器時(shí)代，人類就開始利用樹皮等韌皮纖維紡紗織布。自古以來，紡織工業(yè)基本上都是以天然纖維作為原材料的，并對(duì)天然纖維過度依賴。在過去的幾十年里，合成纖維逐漸引起了人們的興趣，其價(jià)格便宜，容易生產(chǎn)，而且性能更好。與此同時(shí)，為了提高產(chǎn)品的質(zhì)量，人們研究了很多化學(xué)處理方法來提高天然纖維和合成纖維的光滑度與韌性。閱讀這篇博客，可以了解掃描電鏡如何在這一發(fā)展過程中發(fā)揮基礎(chǔ)性作用。高性能運(yùn)動(dòng)服的秘密不僅在于設(shè)計(jì)，而且在于產(chǎn)品背后的創(chuàng)新技術(shù)。特殊的編織技術(shù)，結(jié)合極為先進(jìn)的紡織材料，是開發(fā)新穎高性能運(yùn)動(dòng)服，軍裝和其他許多高級(jí)工程織物中兩個(gè)Z重要的方面。合成纖維的發(fā)展，使得紡織品的彈性大幅度提高，并降低了與空氣或水的摩擦系數(shù)。如何用掃描電鏡觀察各類化學(xué)物質(zhì)在纖維中的作用為了提供這些技術(shù)參數(shù)，我們需要對(duì)纖維的化學(xué)成分，尺寸和表面形貌進(jìn)行研究。纖維這些特征的尺寸對(duì)于光學(xué)顯微鏡來說太小，難以觀察，所以掃描電鏡顯成為紡織材料開發(fā)人員的普遍選擇。掃描電鏡不僅可以提供編織圖案的圖像，而且還可以檢測(cè)纖維的實(shí)際表面以及所有的表面缺陷。圖1&2：在掃描電鏡中，不同放大倍率和不同角度下的一種羊毛樣品紡織材料通常是非導(dǎo)電的，因此，擁有低真空的掃描電鏡（SEM）對(duì)于得到好的圖片是非常重要的。通過特定的化學(xué)處理可以去除表面雜質(zhì)或粗糙部分，從而平滑表面。掃描電鏡(SEM)可以用來關(guān)聯(lián)曝光時(shí)間和化學(xué)品的濃度，以優(yōu)化生產(chǎn)率，和減少不必要的成本開銷?？招睦w維要求更精密的生產(chǎn)流程，但Z終產(chǎn)品的附加值引起了許多大廠商的注意。除了在原材料上的節(jié)省，纖維還可以應(yīng)用于更加多樣化的領(lǐng)域，并提高彈性和降低重量。熱交換特性也可以根據(jù)應(yīng)用程序設(shè)計(jì)。研究這些纖維的空腔形狀，對(duì)于驗(yàn)證生產(chǎn)過程的準(zhǔn)確性，以及觀察和測(cè)量它們對(duì)熱和張力響應(yīng)關(guān)系是至關(guān)重要的。為什么SEM技術(shù)非常適合新材料的研究與開發(fā)飛納電鏡擁有各種各樣的配件以及快速成像的特點(diǎn)，成為新材料研究和開發(fā)的一種強(qiáng)有力的工具，其對(duì)于Z終產(chǎn)品的檢測(cè)可以成為質(zhì)量檢測(cè)的一部分。利用掃描電鏡，可以觀察和記錄纖維在拉伸或者溫度變化過程中的變化情況。將纖維用樹脂包埋，做成金相，還可以觀察到纖維的截面形貌。[詳細(xì)]

  2018-08-22 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• IMPS/IMVS 測(cè)試為什么需要光強(qiáng)控制

  IMPS/IMVS 測(cè)試為什么需要光強(qiáng)控制[詳細(xì)]

  2024-09-28 01:21

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• 為什么數(shù)顯推拉力計(jì)需要定期維護(hù)

  數(shù)顯推拉力計(jì)屬高精密儀器，使用數(shù)顯推拉力計(jì)時(shí)需要細(xì)心呵護(hù)，并定期做保養(yǎng)，那么為什么要對(duì)數(shù)顯推拉力計(jì)進(jìn)行定期保養(yǎng)呢？原因很簡(jiǎn)單，Z主要的是需要延長(zhǎng)數(shù)顯推拉力計(jì)的使用壽命。想延長(zhǎng)數(shù)顯推拉力計(jì)的使用壽命的用戶可以點(diǎn)擊資料下載。本文由數(shù)顯推拉力計(jì)：http://www.shtuilali極.com/cqx0709-ParentList-885341/友情提供閱讀本文的還閱讀：東日扭力扳手扭力扳手價(jià)格定扭矩電動(dòng)扳手扭力檢測(cè)儀拉力測(cè)試儀數(shù)顯推拉力計(jì)扭矩測(cè)試儀[詳細(xì)]

  2024-09-27 11:03

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 何謂超音波清洗機(jī)脫氣(degassing) ? 為什么需要脫氣?

  何謂超音波清洗機(jī)脫氣(degassing) ? 為什么需要脫氣?[詳細(xì)]

  2015-08-21 00:00

  安裝說明

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• GE給您完全的蛋白印跡方案--Western Blot相關(guān)產(chǎn)品秋季開學(xué)特惠

  GE給您完全的蛋白印跡方案--Western Blot相關(guān)產(chǎn)品秋季開學(xué)特惠[詳細(xì)]

  2012-09-05 00:00

  專利

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• 真空干燥箱為什么需要先抽真空再加熱呢

  真空干燥箱為什么需要先抽真空再加熱呢[詳細(xì)]

  2016-03-30 00:00

  安裝說明

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• 為什么Q-Lab老化試驗(yàn)箱需要特定的輻照度校準(zhǔn)儀

  QUV 和 Q-S UN 加 速老 化測(cè) 試儀 需要 使用特 殊的 校準(zhǔn) 輻照度計(jì)。 CR 10 和 U C10 用 于熒 光燈 UV 燈 ， CR 20 和 U C20 用 于 氙燈。 這 些標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)儀可以溯源到 NIST 確 保傳 遞給測(cè) 試樣 品的 輻照 度等于 用戶 測(cè)試 方法 中要求的輻 照度 。在 本 Q-Tip 中， 我們 將介紹 光譜 失配 的概 念， 以解 釋為什 么我 們的 燈具 必須 用我 們的輻射 測(cè)量 設(shè)備 進(jìn)行 專 門的 校準(zhǔn) 。我 們還 將 研究 為什 么 在 340 nm 控 制點(diǎn) 的 校準(zhǔn) 需要 使用 特定 于 濾 波器的輻射計(jì)進(jìn)行，而在 420 nm 的校準(zhǔn)則不 需要。[詳細(xì)]

  2024-09-20 13:35

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• 為什么真空干燥箱需要先抽真空再加熱呢

  為什么真空干燥箱需要先抽真空再加熱呢[詳細(xì)]

  2024-10-03 06:22

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• 為什么你需要一臺(tái)飛納臺(tái)式場(chǎng)發(fā)射電鏡

  2018 年，飛納臺(tái)式場(chǎng)發(fā)射掃描電鏡 Phenom LE 橫空出世，成為臺(tái)式場(chǎng)發(fā)射，將臺(tái)式電鏡的分辨率提升至 2.5 nm。那么您可能不禁會(huì)問，究竟什么是場(chǎng)發(fā)射電鏡，其優(yōu)勢(shì)是什么？為何飛納能夠?qū)?chǎng)發(fā)射的設(shè)計(jì)融入到臺(tái)式電鏡？飛納臺(tái)式場(chǎng)發(fā)射能為您創(chuàng)造哪些價(jià)值？ [詳細(xì)]

  2020-06-30 14:50

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• 小鼠抗核抗體（ANA）定量EIA試劑盒使用說明

  小鼠抗核抗體（ANA）定量EIA試劑盒使用說明原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ELISA法。用抗小鼠ANA單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的ANA與單抗結(jié)合，加入酶標(biāo)抗體，形成免疫復(fù)合物連接在板上，加入酶底物TMB，出現(xiàn)藍(lán)色，加終止液，顏色變黃，在450nm處測(cè)OD值，ANA濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中ANA濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體稀釋液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：500ng2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml酶標(biāo)抗體濃縮液（100X）120ul終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)，2-8℃保存48小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。正常標(biāo)本測(cè)定前用標(biāo)本稀釋液作1：10稀釋（取20ul，加標(biāo)本稀釋液180ul,稀釋10倍）。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml蒸餾水混勻，配成1000ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，每管加入標(biāo)本稀釋液300ul。在**管中加入1000ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul，移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.酶標(biāo)抗體濃縮液用酶標(biāo)抗體稀釋液作1:100倍稀釋（示例：10ul濃縮液+990ul稀釋水）。5.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測(cè)程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。。3.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。6.每孔加入100ul終止液混勻。7.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品500、250、125、62.5、31.2、15.6、7.8、0ng/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)ANA含量，再乘上稀釋倍數(shù)10即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的ANA檢測(cè)濃度小于4ng/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的小鼠ANA。不與小鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于12％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔，每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:01

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• HunterLab測(cè)色差儀需要定期維護(hù)保養(yǎng)嗎？為什么？多久做一次維保？

  HunterLab色差儀在使用前，都要進(jìn)行校正，即使用色差儀的黑卡或者黑玻璃、白板進(jìn)行校正。如用黑玻璃和白板校正，即將色差儀此時(shí)讀到的數(shù)據(jù)對(duì)標(biāo)到色差儀內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)值。 當(dāng)點(diǎn)擊測(cè)量時(shí)，測(cè)色儀開始閃光到最終被接收分析，中途要經(jīng)過諸如UV濾光片、D65濾光片、積分球、反射鏡、目鏡、多個(gè)光纖頭、鏡頭等。 如果您的測(cè)色儀是新儀器，儀器校正讀到的白板當(dāng)然能對(duì)應(yīng)到測(cè)色儀內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)值，也就是白板背部的標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)。但是隨著測(cè)色儀的使用，不可避免有灰塵、待測(cè)樣進(jìn)入儀器內(nèi)部，并附著在光線傳播過程中的各個(gè)元器件上。 本來被接受的應(yīng)該是白光，但是隨著測(cè)色差儀長(zhǎng)時(shí)間的使用，色差儀內(nèi)部的污染使得接收光其實(shí)是略微泛黃的光。而校準(zhǔn)則將這黃光對(duì)標(biāo)到白光，于是便產(chǎn)生一種增白的效果。那么當(dāng)測(cè)量樣品時(shí)，校正時(shí)產(chǎn)生的增白效果，同樣會(huì)作用在您的樣品，于是測(cè)量結(jié)果看起來相比較于以往更白了。 通過定期的維保，清理內(nèi)部的污染，將增白效果去除，使測(cè)色儀測(cè)量反饋的是真實(shí)數(shù)據(jù)。往往維保完成后，對(duì)比維保前的數(shù)據(jù)，測(cè)試結(jié)果會(huì)更黃一點(diǎn)，如L*變小，b*變大，YI變大，WI變小的等現(xiàn)象。 維保建議一年做一次。HunterLab中國(guó)技術(shù)與售后服務(wù)中心[詳細(xì)]

  2024-06-28 14:30

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