本文由 重慶市華雅干細(xì)胞技術(shù)有限公司 整理匯編

2018-08-24 10:00 1220閱讀次數(shù)

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  2024-09-29 11:24

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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  詳見(jiàn)論文[詳細(xì)]

  2018-08-24 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 人神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)檢測(cè)試劑盒

  人神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]

  2015-03-06 00:00

  標(biāo)準(zhǔn)

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• 人神經(jīng)元烯醇化酶（NSE）ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

  電話：021-6533363955229872網(wǎng)址：http://www.westang.com人神經(jīng)元烯醇化酶（NSE）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人NSE單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的NSE與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人NSE，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液硫酸，在450nm處測(cè)OD值，NSE濃度與OD值成正比，可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中NSE濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：1000ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)，2-8℃保存48小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。血清、血漿作1：2稀釋（取100ul，加標(biāo)本稀釋液100ul,稀釋2倍）。細(xì)胞培養(yǎng)上清可以不做稀釋直接檢測(cè)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成1000ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，**管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入1000ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測(cè)程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品100、50、25、12.5、6.25、3.12、1.56、0ng/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)NSE含量，再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的NSE檢測(cè)濃度小于1ng/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人NSE。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于9.7％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔，每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:01

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 常用的細(xì)菌培養(yǎng)基培養(yǎng)的方法

  常用的細(xì)菌培養(yǎng)基培養(yǎng)的方法配方一牛肉膏瓊脂培養(yǎng)基牛肉膏0.3克，蛋白胨1.0克，氯化鈉0.5克，瓊脂1.5克，水100毫升在燒杯內(nèi)加水100毫升，放入牛肉膏、蛋白胨和氯化鈉，用蠟筆在燒杯外作上記號(hào)后，放在火上加熱。待燒杯內(nèi)各組分溶解后，加入瓊脂，不斷攪拌以免粘底。等瓊脂完全溶解后補(bǔ)足失水，用10%鹽酸或10%的氫氧化鈉調(diào)整pH值到7.2～7.6,分裝在各個(gè)試管里，加棉花塞，用高壓蒸汽滅菌30分鐘。配方二馬鈴薯培養(yǎng)基取新鮮牛心（除去脂肪和血管）250克，用刀細(xì)細(xì)剁成肉末后，加入500毫升蒸餾水和5克蛋白胨。在燒杯上做好記號(hào)，煮沸，轉(zhuǎn)用文火燉2小時(shí)。過(guò)濾，濾出的肉末干燥處理，濾液pH值調(diào)到7.5左右。每支試管內(nèi)加入10毫升肉湯和少量碎末狀的干牛心，滅菌，備用。配方三根瘤菌培養(yǎng)基葡萄糖10克磷酸氫二鉀0.5克碳酸鈣3克硫酸鎂0.2克酵母粉0.4克瓊脂20克水1000毫升1%結(jié)晶紫溶液1毫升先把瓊脂加水煮沸溶解，然后分別加入其他組分，攪拌使溶解后，分裝，滅菌，備用。[詳細(xì)]

  2024-09-29 07:30

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• 銷剪切實(shí)驗(yàn)方法

  銷剪切實(shí)驗(yàn)方法[詳細(xì)]

  2018-08-31 10:11

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• 帆布織物實(shí)驗(yàn)方法

  帆布織物實(shí)驗(yàn)方法[詳細(xì)]

  2018-08-31 10:11

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• Elisa實(shí)驗(yàn)比色方法

  Elisa實(shí)驗(yàn)比色方法，酶標(biāo)比色儀簡(jiǎn)稱酶標(biāo)儀，通常指專用于測(cè)讀ELISA結(jié)果吸光度的光度計(jì)。針對(duì)固相載體形式的不同，各有特制的適用于板、珠和小試管的設(shè)計(jì)。許多試劑公司配套供應(yīng)酶標(biāo)儀。酶標(biāo)儀的主要性能指標(biāo)有：測(cè)讀速度、讀數(shù)的準(zhǔn)確性、重復(fù)性、極ng確度和可測(cè)范圍、線性等等。優(yōu)良的酶標(biāo)儀的讀數(shù)一般可極ng確到0.001，準(zhǔn)確性為±1%，重復(fù)性達(dá)0.5%。舉例說(shuō)，若某孔測(cè)得的A值為1.083，則該孔相對(duì)于空氣的真實(shí)A值應(yīng)為1.083±0.01（1.073~1.093），重復(fù)測(cè)定數(shù)次，其A值均應(yīng)1.083±0.05（1.078~1.088）在之間。酶標(biāo)儀的可測(cè)范圍視各酶標(biāo)儀的性能而不同。普通的酶標(biāo)儀在0.000~2.000，新型號(hào)的酶標(biāo)儀上限拓寬達(dá)2.900，甚至更高。超出可測(cè)上限的A值常以"*"或"over"或其它符號(hào)表示。應(yīng)注意可測(cè)范圍與線性范圍的不同，線性范圍常小于可測(cè)范圍，比如某一酶標(biāo)儀的可測(cè)范圍為0.000~2.900，而其線性范圍僅0.000~2.000，這在定量ELISA中制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)應(yīng)予注意。酶標(biāo)儀不應(yīng)安置在陽(yáng)光或強(qiáng)光照射下，操作時(shí)室溫宜在15~30℃，使用前先預(yù)熱儀器15-30分鐘，測(cè)讀結(jié)果更穩(wěn)定。Elisa實(shí)驗(yàn)比色方法，測(cè)讀A值時(shí)，要選用產(chǎn)物的敏感吸收峰，如OPD用492nm波長(zhǎng)。有的酶標(biāo)儀可用雙波長(zhǎng)式測(cè)讀，即每孔先后測(cè)讀兩次，**次在Z適波長(zhǎng)（W1），第二次在不敏感波長(zhǎng)（W2），兩次測(cè)定間不移動(dòng)ELISA板的位置。例如OPD用492nm為W1，630nm為W2，Z終測(cè)得的A值為兩者之差（W1-W2）。雙波長(zhǎng)式測(cè)讀可減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。[詳細(xì)]

  2018-11-16 10:02

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 48T人神經(jīng)元特異性烯醇化酶ELISA檢測(cè)試劑盒

  人神經(jīng)元特異性烯醇化酶ELISA檢測(cè)試劑盒　　　　　　　　　　　　本試劑僅供研究使用標(biāo)本：血清或血漿試驗(yàn)原理：　　　　NSE試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知NSE濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將NSE和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中NSE的濃度呈比例關(guān)系?！∽詡洳牧险麴s水。加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。人神經(jīng)元特異性烯醇化酶ELISA檢測(cè)試劑盒操作注意事項(xiàng)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人神經(jīng)元特異性烯醇化酶ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與人其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。人神經(jīng)元特異性烯醇化酶ELISA檢測(cè)試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值：于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的NSE標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的NSE含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍：0-80ng/ml4、敏感度：0.1ng/mlP311protein神經(jīng)再生相關(guān)蛋白抗體0.2mlP38ERK/MAPK（MAPK14）絲裂原活化蛋白激酶p38抗體0.1mlRabbitanti-pigIgG/Cy3熒光素Cy3標(biāo)記兔抗豬IgG0.1mlRabbitanti-PigIgM/Cy3熒光素Cy3標(biāo)記兔抗豬IgM0.1mlRabbitanti-DogIgG/Cy3熒光素Cy3標(biāo)記兔抗狗IgG0.1mlRabbitanti-RatIgG/Cy3熒光素Cy3標(biāo)記兔抗大鼠IgG0.1mlP38ERK/MAPK（MAPK14）絲裂原活化蛋白激酶p38抗體0.2mlphospho-p38ERK/MAPK14（pThr180/pTyr182）磷酸化-絲裂原活化蛋白激酶p38抗體0.1mlphospho-p38ERK/MAPK14（pThr180/pTyr182）磷酸化-絲裂原活化蛋白激酶p38抗體0.2mlMKK3（MAPKinaseKinase3）抗絲裂原活化蛋白激酶MKK3/6抗體0.2mlMKK4/MAP2K4（mitogen-activatedproteinkinasekinase4）絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體0.2mlMKK7（MAPKinaseKinase7）絲裂原活化蛋白激酶激酶70.2mlRabbitanti-guineapigIgG/Cy3熒光素Cy3標(biāo)記兔抗豚鼠IgG0.1mlRabbitanti-guineapigIgM/Cy3熒光素Cy3標(biāo)記兔抗豚鼠IgM0.1mlRabbitanti-bovIgG/Cy3熒光素Cy3標(biāo)記兔抗牛IgG0.1mlMKK7（MAPKinaseKinase7）ret,mouse絲裂原活化蛋白激酶MKK70.2mlP53（wt-p53）腫瘤YZ基因抗體（野生型P53）0.1mlP53（wt-p53）腫瘤YZ基因抗體（野生型P53）0.2mlMtp53（Mutanttypep53,N235KN239Y）突變型P53抗體0.2mlphospho-P53（pSer392）抗磷酸化腫瘤YZ基因P53抗體0.2mlWIG-1（wtp53-inducedgene1）野生型p53誘導(dǎo)基因1抗體0.1mlWIG-1（wtp53-inducedgene1）野生型p53誘導(dǎo)基因1抗體0.2mlRabbitanti-chiIgG/Cy3熒光素Cy3標(biāo)記兔抗雞IgG0.1ml[詳細(xì)]

  2018-09-27 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 巨噬細(xì)胞培養(yǎng)

  巨噬細(xì)胞培養(yǎng)[詳細(xì)]

  2024-09-17 05:25

  課件

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