Western blot化學(xué)發(fā)光(ECL)時(shí)，出現(xiàn)非特異條帶，應(yīng)該怎么辦？

細(xì)胞異質(zhì)性是腫瘤研究，干細(xì)胞研究，免疫學(xué)研究的極其重要的研究方向。單細(xì)胞研究是

分析細(xì)胞異質(zhì)性的主要手段。單細(xì)胞組學(xué)研究也是jing準(zhǔn)醫(yī)學(xué)首要的研究領(lǐng)域。

美國(guó)ProteinSimple公司首推基于芯片Western Blot技術(shù)，進(jìn)行單個(gè)細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)水平定

量分析系統(tǒng): Milo.

Milo具有極其強(qiáng)大的功能：

1. 單張芯片進(jìn)行1000個(gè)單細(xì)胞western blot

2. 每個(gè)單細(xì)胞可進(jìn)行數(shù)十個(gè)靶蛋白檢測(cè)

3. 僅需使用Western blot驗(yàn)證抗體，具有抗體通用性

4. 基于western blot技術(shù)，蛋白進(jìn)行分離后檢測(cè)，提高免疫學(xué)檢測(cè)特異性

5. 全程檢測(cè)只需4小時(shí)

期刊對(duì)Western Blot數(shù)據(jù)要求：

1. 內(nèi)參和目的蛋白在同一張印跡膜上；

2. zuihao選擇膜染色進(jìn)行總蛋白歸一化；

3. 如果使用看家蛋白，需要提供看家蛋白表達(dá)穩(wěn)定并且不受實(shí)驗(yàn)條件影響的證據(jù)；

4. 成像方法的線性范圍需要提供。

看家蛋白一般常用于內(nèi)參質(zhì)控，整張膜上的weiyi質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)，但是看家蛋白一般表達(dá)量比較高，可能與目的蛋白不在一個(gè)線性范圍內(nèi)，影響定量；并且看家蛋白證明在多種實(shí)驗(yàn)條件下是會(huì)發(fā)生變化，例如：細(xì)胞融合，疾病和藥物ZL等等，影響定量jingzhun性。

總蛋白質(zhì)控直接在膜上檢測(cè)總蛋白，變異性小，誤差小，動(dòng)態(tài)范圍更寬，使用整個(gè)泳道或泳道中大部分信號(hào)用于歸一化，而不是單一的條帶，例如JBC、Nature和Proteomics等期刊推薦使用總蛋白進(jìn)行歸一化。

Azure可提供一站式Western Blot歸一化解決方案。

提供兩種總蛋白染色試劑Azure Red和TotalStainQ進(jìn)行膜染色和總蛋白歸一化，AzureRed適合低豐度表達(dá)樣品，TotalStain更適合細(xì)胞裂解液樣品。

Azure Sapphire雙模式多光譜激光成像系統(tǒng)和Azure Imager多功能分子成像系統(tǒng)可進(jìn)行總蛋白歸一化，成像更簡(jiǎn)單，歸一化更方便。

Azure成像系統(tǒng)除了可進(jìn)行Western Blot成像外，功能非常強(qiáng)大，可進(jìn)行凝膠、In cell Western孔板成像、2D和2D-DIGE、微陣列芯片、切片、動(dòng)植物組織、小鼠成像、放射性同位素磷屏成像等。