全部評(píng)論(2條)
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- 美玲*wang 2018-05-15 00:00:00
- 前β脂蛋白得半衰期只有幾個(gè)小時(shí)，乳糜微粒的半衰期僅十多分鐘，所以在我們進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，這兩種成分早就代謝完了。
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- toyboy3 2016-05-14 00:00:00
- 血液中的脂蛋白不是單一的分子形式，其脂類和蛋白質(zhì)的組成有很大的差異，因此血液中的脂蛋白存在多種形式。根據(jù)它們各自的特性采用不同的分類方法，可將它們進(jìn)行多種分類，一般采用電泳法和超速離心法進(jìn)行血漿脂蛋白的分類。 (一)電泳分類法 本法根據(jù)不同脂蛋白所帶表面電荷不同，在一定外加電場(chǎng)作用下，電泳遷移率不同，可將血漿脂蛋白分為四類。如以硝酸纖維素薄膜為支持物，電泳結(jié)果是:α-脂蛋白泳動(dòng)Z快，相當(dāng)于α1-球蛋白的位置;前β脂蛋白次之，相當(dāng)于α2-球蛋白位置;β-脂蛋白泳動(dòng)在前-β之后，相當(dāng)于β-球蛋白的位置;乳糜微粒停留在點(diǎn)樣的位置上 (二)超速離心法 本法依據(jù)不同脂蛋白中蛋白質(zhì)脂類成分所占比例不同，因而分子密度不同(甘油三酯含量多者密度低，蛋白質(zhì)含量多的分子密度高)，在一定離心力作用下，分子沉降速度或漂浮率不同，將脂蛋白分為四類，即乳糜微粒(chylomicrons)、極低密度脂蛋白(very low density lipoprotein，VLDL)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein，LDL)和高密度脂蛋白(highdensity lipoprotein，HDL);分別相當(dāng)于電泳分離中的乳糜微粒、前β脂蛋白、β脂蛋白和α脂蛋白。除上述幾類脂蛋白以外，還有一種中間密度脂蛋白(intermediate density lipoprotein，IDL)其密度位于VLDL與LDL之間，這是VLDL代謝的中間產(chǎn)物。HDL在代謝過(guò)程中分子中蛋白與脂類成分有變化，可將HDL再分為HDL1、HDL2與HDL3。HDL1是在高膽固醇膳食時(shí)才出現(xiàn)，HDL2為成熟的HDL，HDL3為新生的HDL，其分子中蛋白成分多。 血漿中的游離中短鏈脂肪酸可與血漿白蛋白結(jié)合而被運(yùn)輸，稱之為脂酸白蛋白。由于脂類染色時(shí)脂肪酸不著色，所以不易觀察，實(shí)際上它的位置與白蛋白相當(dāng)。
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瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作為介質(zhì)的一種電泳方法，其兼具“分子篩”和“電泳的雙重作用。
瓊脂糖(Agarose)是一種線性多糖聚合物，是從紅色海藻產(chǎn)物瓊脂中提取而來(lái)的，當(dāng)瓊脂糖溶液加熱到沸點(diǎn)后冷卻凝固便會(huì)形成良好的電泳介質(zhì)，其密度是由瓊脂糖的濃度決定的。
經(jīng)過(guò)化學(xué)修飾的低熔點(diǎn)的瓊脂糖，在結(jié)構(gòu)上比較脆弱，因此在較低的溫度下便會(huì)熔化，可用于核酸片段的電泳檢測(cè)。
瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)的主要是核酸的完整性和大小，只要核酸不是太小或者太大(超出電泳分離范圍)，該方法的可信度非常高。
核酸會(huì)根據(jù)pH不同帶有不同電荷，在電場(chǎng)中受力大小不同，因此跑的速度不同，瓊脂糖凝膠電泳即根據(jù)這個(gè)原理對(duì)核酸進(jìn)行區(qū)分。
核酸分子在pH高于其等電點(diǎn)的溶液中帶負(fù)電荷，在電場(chǎng)中向正極移動(dòng)。由于核酸的戊糖-磷酸骨架在結(jié)構(gòu)上具有重復(fù)性，長(zhǎng)度相同的核酸鏈幾乎具有等量的凈電荷，因此它們能以同樣的速率向正極方向移動(dòng)。
此外，含有瓊脂糖的凝膠具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，物質(zhì)分子通過(guò)時(shí)會(huì)受到阻力，大分子物質(zhì)在涌動(dòng)時(shí)受到的阻力大，因此在瓊脂糖凝膠電泳中，帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質(zhì)和數(shù)量，而且還取決于分子大小，這就大大提高了分辨能力。
在同樣電場(chǎng)的強(qiáng)度下，核酸分子的遷移速度取決于核酸分子本身的大小和構(gòu)型以及瓊脂糖凝膠的濃度，簡(jiǎn)而言之，分子量較大的核酸遷移速度較慢，分子量較小的核酸遷移速度較快，這就是應(yīng)用凝膠電泳技術(shù)分離核酸片段的基本原理。
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3. 用本產(chǎn)品電泳得到的DNA片段進(jìn)行膠回收，不影響后續(xù)的DNA連接等反應(yīng)。
運(yùn)輸及保存：4°C保存和運(yùn)輸，有效期3個(gè)月，切勿放置于0°C以下或者常溫以上，這樣試劑盒內(nèi)的預(yù)制膠就會(huì)凍裂或變形，影響您的使用。
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