與蛋白質(zhì)結(jié)合了的DNA片段用瓊脂糖凝膠電泳能看出條帶阻滯嗎?
-
前提:蛋白是已知純化好的蛋白,DNA是已知的純化好的DNA片段;且在適當(dāng)結(jié)合體系里使其發(fā)生結(jié)合反應(yīng)。 問題:到底該蛋白和該DNA片段反應(yīng)了沒有,可以用瓊脂糖凝膠電泳鑒定嗎?結(jié)合蛋白質(zhì)的DNA片段會跑得慢一些,從而得出結(jié)論。還是說,結(jié)合產(chǎn)物在瓊脂糖中會分... 前提:蛋白是已知純化好的蛋白,DNA是已知的純化好的DNA片段;且在適當(dāng)結(jié)合體系里使其發(fā)生結(jié)合反應(yīng)。 問題:到底該蛋白和該DNA片段反應(yīng)了沒有,可以用瓊脂糖凝膠電泳鑒定嗎?結(jié)合蛋白質(zhì)的DNA片段會跑得慢一些,從而得出結(jié)論。還是說,結(jié)合產(chǎn)物在瓊脂糖中會分離而不能使用這種方法鑒定嗎? 實驗室沒有條件做放射性標(biāo)記等操作,正常的DNA凝膠阻滯實驗不太可取。想問有沒有簡單可行的方法,可以鑒定蛋白質(zhì)和DNA發(fā)生了結(jié)合,用于大量篩選。 求指點!大謝! 展開
全部評論(3條)
熱門問答
- 與蛋白質(zhì)結(jié)合了的DNA片段用瓊脂糖凝膠電泳能看出條帶阻滯嗎?
- 前提:蛋白是已知純化好的蛋白,DNA是已知的純化好的DNA片段;且在適當(dāng)結(jié)合體系里使其發(fā)生結(jié)合反應(yīng)。 問題:到底該蛋白和該DNA片段反應(yīng)了沒有,可以用瓊脂糖凝膠電泳鑒定嗎?結(jié)合蛋白質(zhì)的DNA片段會跑得慢一些,從而得出結(jié)論。還是說,結(jié)合產(chǎn)物在瓊脂糖中會分... 前提:蛋白是已知純化好的蛋白,DNA是已知的純化好的DNA片段;且在適當(dāng)結(jié)合體系里使其發(fā)生結(jié)合反應(yīng)。 問題:到底該蛋白和該DNA片段反應(yīng)了沒有,可以用瓊脂糖凝膠電泳鑒定嗎?結(jié)合蛋白質(zhì)的DNA片段會跑得慢一些,從而得出結(jié)論。還是說,結(jié)合產(chǎn)物在瓊脂糖中會分離而不能使用這種方法鑒定嗎? 實驗室沒有條件做放射性標(biāo)記等操作,正常的DNA凝膠阻滯實驗不太可取。想問有沒有簡單可行的方法,可以鑒定蛋白質(zhì)和DNA發(fā)生了結(jié)合,用于大量篩選。 求指點!大謝! 展開
- 為什么血漿脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳只出來兩條帶
- 聚丙烯酰胺凝膠電泳與瓊脂糖凝膠電泳的區(qū)別
- DNA瓊脂糖凝膠電泳出現(xiàn)拖尾的原因是什么
- 瓊脂糖膠回收大片段DNA的方法求助
- 請問哪位大俠知道回收大片段DNA的方法,我用天根的膠回收試劑盒,回收效果非常不理想,而且片段要比回收前??! 我從土壤里提取的DNA(23KB),所含雜質(zhì)特別的多,所以Z好只能用膠回收,求有經(jīng)驗的大俠指點!感激不盡?。?! 回答滿意,雙倍增分??!
- 瓊脂糖凝膠電泳時如果提取的DNA中含有蛋白質(zhì)和RNA污染應(yīng)如何解決?
- 堿裂解法提取的質(zhì)粒DNA瓊脂糖凝膠電泳應(yīng)該是什么樣的?
- 瓊脂糖凝膠電泳常見問題有哪些
- 聚丙烯酰胺凝膠電泳和瓊脂糖凝膠電泳的異同?
- 談?wù)劸郾0纺z電泳與瓊脂糖凝膠電泳有哪些異同點~~詳細(xì)點,謝謝
- 瓊脂糖凝膠電泳和DNA鑒定、核酸分離鑒定之間有什么關(guān)系?
- 我知道DNA鑒定是通過核酸的分離鑒定來進行的,瓊脂糖凝膠電泳可以檢測DNA,我就是想知道瓊脂糖凝膠電泳實驗可不可以應(yīng)用于DNA鑒定,怎么用的?謝謝了!答的好喔加分的??!
- 瓊脂糖凝膠電泳是從負(fù)極到正極跑嗎
- 血漿脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳為什么a脂蛋白在前
- 瓊脂糖凝膠電泳操作應(yīng)注意哪些環(huán)節(jié)
- 瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA圖譜顏色太淺是什么原因?qū)е碌??大神們幫幫?
- 蛋白質(zhì)凝膠電泳的詳細(xì)步驟
- 比如轉(zhuǎn)膜應(yīng)該注意哪些問題
- HBV DNA進行PCR擴增后的瓊脂糖凝膠電泳拖尾非常嚴(yán)重的原因
- 蛋白質(zhì)與DNA的關(guān)系
- 核酸的瓊脂糖凝膠電泳為什么要用電泳緩沖液配制凝膠
- 瓊脂糖凝膠電泳檢測核酸的原理及產(chǎn)品優(yōu)勢
瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作為介質(zhì)的一種電泳方法,其兼具“分子篩”和“電泳的雙重作用。
瓊脂糖(Agarose)是一種線性多糖聚合物,是從紅色海藻產(chǎn)物瓊脂中提取而來的,當(dāng)瓊脂糖溶液加熱到沸點后冷卻凝固便會形成良好的電泳介質(zhì),其密度是由瓊脂糖的濃度決定的。
經(jīng)過化學(xué)修飾的低熔點的瓊脂糖,在結(jié)構(gòu)上比較脆弱,因此在較低的溫度下便會熔化,可用于核酸片段的電泳檢測。
瓊脂糖凝膠電泳檢測的主要是核酸的完整性和大小,只要核酸不是太小或者太大(超出電泳分離范圍),該方法的可信度非常高。
核酸會根據(jù)pH不同帶有不同電荷,在電場中受力大小不同,因此跑的速度不同,瓊脂糖凝膠電泳即根據(jù)這個原理對核酸進行區(qū)分。
核酸分子在pH高于其等電點的溶液中帶負(fù)電荷,在電場中向正極移動。由于核酸的戊糖-磷酸骨架在結(jié)構(gòu)上具有重復(fù)性,長度相同的核酸鏈幾乎具有等量的凈電荷,因此它們能以同樣的速率向正極方向移動。
此外,含有瓊脂糖的凝膠具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),物質(zhì)分子通過時會受到阻力,大分子物質(zhì)在涌動時受到的阻力大,因此在瓊脂糖凝膠電泳中,帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質(zhì)和數(shù)量,而且還取決于分子大小,這就大大提高了分辨能力。
在同樣電場的強度下,核酸分子的遷移速度取決于核酸分子本身的大小和構(gòu)型以及瓊脂糖凝膠的濃度,簡而言之,分子量較大的核酸遷移速度較慢,分子量較小的核酸遷移速度較快,這就是應(yīng)用凝膠電泳技術(shù)分離核酸片段的基本原理。
德晟公司產(chǎn)品特點及優(yōu)勢:
您不用再四處采購瓊脂糖、核酸染料、電泳液和loading buffer等試劑,一個試劑盒全部解決。
本試劑盒可以給您節(jié)省一個小時左右的實驗時間。
a. 省去了您制膠的繁瑣,并且預(yù)制膠是核酸染料預(yù)染的,無需電泳液染色或后染色。簡捷方便,即開即用。
b. 本試劑盒專門配備了高壓快速電泳液,如果您的核酸樣品片段在2000bp以下,電泳的快慢您可以隨時掌控,調(diào)整電壓即可,一般的mini膠最快可以5-10分鐘完成;如果您在實驗中使用的Marker或者核酸樣品條帶多、片段長(核酸樣品片段大于2000bp),您就需要根據(jù)實際情況,調(diào)節(jié)到合適的低壓,或仍使用您原來的低壓電泳條件。
3. 用本產(chǎn)品電泳得到的DNA片段進行膠回收,不影響后續(xù)的DNA連接等反應(yīng)。
運輸及保存:4°C保存和運輸,有效期3個月,切勿放置于0°C以下或者常溫以上,這樣試劑盒內(nèi)的預(yù)制膠就會凍裂或變形,影響您的使用。
- 核酸瓊脂糖凝膠電泳時電壓一般為多少
4月突出貢獻榜
推薦主頁
最新話題





參與評論
登錄后參與評論